丹参酮ⅱa对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及机制

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1、丹参酮ⅡA对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及机制作者：李浩，刘开祥，俸军林，曾爱源，唐永刚【摘要】　　目的探讨丹参酮ⅡA（TanⅡA）对缺血再灌注损伤大鼠保护作用及对额顶部皮质中性粒细胞浸润、自由基含量、能量代谢的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、TanⅡA低剂量治疗组和TanⅡA高剂量治疗组，线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。TanⅡA高、低剂量治疗组于术前连续灌胃给药3d，1次/d。用生化法观察缺血90min再灌注24h大鼠额顶部皮质髓过氧化物酶（MPO）活性、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA）含量、三磷酸腺苷

2、（ATP）含量及脑含水量变化，并进行2，3，5－三苯基氯化四氮唑（TTC）染色检测脑梗塞体积。结果TanⅡA治疗组脑梗塞体积较缺血再灌注组减小，高、低剂量组之间差异亦具有显著性（P<0.05）；与缺血再灌注组比较，TanⅡA治疗组显著降低MPO活性、MDA含量，增加SOD、ATP含量，降低脑组织含水量，高、低剂量组之间差异亦具有显著性（P<0.05）。结论TanⅡA对缺血再灌注脑损伤具有保护作用，其机制可能与减轻缺血再灌注损伤炎症反应，减轻氧化性损伤和改善能量代谢有关。【关键词】缺血再灌注；髓过氧化物酶；自由基；三磷酸腺苷；

3、丹参酮Ⅱ　　Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofTanshinoneⅡA(TanⅡA)onneutrophilsinfiltrationandthecontentsoffreeradicalandATPinischemicfrontalandparietalcortexofcerebralischemiareperfusion（I/R）rats.MethodsInthisexperiment,ratslydividedinto4groups,namelyshamoperatedgroup,I/Rgro

4、up,loiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)modeladebysuture-occludedmethod.RatsinMCAOfolloicfrontalandparietalcortexe.Resultsparedeinloanner(allP<0.05).paredayaueviatecerebralischemia-reperfusioninjurybydecreasingtheinflammationreaction,freeradicalsandthedisbanlanceofener

5、gymetabolism.　　Keyia-reperfusion;Myeloperoxidase;Freeradical;ATP；TanshinoneⅡA丹参SalviamiltorrhizaBge为唇形科多年生草本植物，是我国传统具有活血化淤作用的中药，已被广泛用于心脑血管疾病的治疗，但其作用机制尚不十分清楚。丹参酮(Tanshinone)是丹参的有效活性组分，其中丹参酮ⅡA（TanshinoneⅡA，TanⅡA）为丹参酮中含量最高的活性成分。本实验采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，研究丹参酮ⅡA对大鼠脑缺血再灌注损伤缺血区额顶部皮质中

6、性粒细胞浸润、自由基含量、能量代谢、脑组织含水量及梗塞体积变化的影响，探讨其对脑再灌注损伤保护作用机制。　　1材料与方法　　1.1药品与试剂　　TanⅡA由提供上海第一生化药业有限公司提供，纯度85％。髓过氧化物酶（MPO），丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。TTC购自中国医药集团上海化学试剂公司。　　1.2动物分组及给药方法　　健康PO活性的测定　　再灌注24h，将大鼠开颅取脑，置于4℃冰箱5min，在冰浴下取左侧距离嗅球尖端7～11mm之间的额顶部皮质，以试剂盒提供的匀浆介质制成脑组织匀浆

7、。严格按试剂盒说明书步骤要求操作，计算出MPO活力单位。　　1.5MDA和SOD的测定　　再灌注24h，将大鼠开颅取脑，置于4℃冰箱5min，在冰浴下取左侧距离嗅球尖端7～11mm之间的额顶部皮质，以试剂盒提供的匀浆介质制成脑组织匀浆（步骤和方法同上）。严格按试剂盒说明书步骤要求操作，计算出MDA和SOD含量。　　1.6三磷酸腺苷（ATP）含量测定　　再灌注24h，将大鼠开颅取脑，置于4℃冰箱5min，在冰浴下取左侧距离嗅球尖端7～11mm之间的额顶部皮质，迅速加入乙腈，混匀，冰浴离心脱蛋白，离心后取上清液水系滤膜过滤后，-86℃保存。

8、用高效液相测定ATP含量。　　1.7脑含水量检测　　再灌注24h，各组随机取5只大鼠，断头取脑后，快速称取左右大脑半球湿重，置110～115℃烤箱内烤至恒重，再分别称其干重，用(湿重-干重)/湿重的百分比，