复方益肝灵片中水飞蓟宾的高效液相色谱分析

《复方益肝灵片中水飞蓟宾的高效液相色谱分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、复方益肝灵片中水飞蓟宾的高效液相色谱分析【摘要】　　目的建立复方益肝灵片中水飞蓟宾的含量测定方法。方法采用HPLC法，ODSC18（4.6mm×250mm，5μm），以甲醇-水-冰醋酸（48∶52∶1）为流动相，流速1.0ml·min-1，检测波长287nm。结果水飞蓟宾在13.75～110.00μg·ml-1的进样浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系（r=0.9998），平均回收率为97.10%（RSD=0.63%，n=6）。结论该方法操作简便、结果可靠，重复性好，可用于复方益肝灵片中水飞蓟宾的分析。【关键词】高效液相色谱复方益肝灵片水飞蓟宾　　Abstract:Obje

2、ctiveTodevelopamethodfordeterminingthecontentofSilymarininFufangYiganlingtablets.MethodsHPLCanalysisasilC18column(4.6mm×250mm,5μm),mobilephase:Methanol-ADZU，4.6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-水-冰醋酸（48∶52∶1）；检测波长287nm；流速1.0ml·min-1；柱温35℃。　　2.2对照品溶液的制备精密称取水飞蓟宾对照品适量，加甲醇制成每毫升含水飞蓟宾0.05mg的溶液，即得。　　2.3供试品溶液的

3、制备取本品5片，除去糖衣，精密称定，研细（过100目筛），取0.5g，精密称定，置150ml具塞锥形瓶中，加石油醚（60～90℃）50ml，置90℃水浴上加热回流1h，放冷，倾出石油醚，用干燥滤纸过滤，再用石油醚40ml，分次洗涤容器内残渣及滤纸，滤过，挥干溶剂后，将滤纸放入原锥形瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，置水浴上加热回流1h，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。　　2.4线性关系考察精密称取水飞蓟宾对照品13.75mg，置50ml量瓶，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。再分

4、别精密吸取0.5，1.0，2.0，3.0，4.0ml到10ml容量瓶，加甲醇稀释至刻度，摇匀。再分别精密吸取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。以进样浓度为横坐标，以水飞蓟宾和异水飞蓟宾的峰面积和为纵坐标进行线性回归，得回归方程为：Y=1017.40+10376.02X,r=0.9998。表明水飞蓟宾在13.75～110.00μg·ml-1的进样浓度范围内，与峰面积线性关系良好。线性回归曲线见图1。　　2.5阴性样品干扰考察取水飞蓟宾对照品、复方益肝灵片供试品溶液、不含水飞蓟素的空白溶液，依法进样测定，结果在水飞蓟宾保留时间处无干扰峰影响。　　2.6精密度实验精密吸取供试品

5、溶液20μl，重复进样6次，记录色谱图，结果RSD为0.24%（n=6）。　　2.7稳定性实验取精密度项下的供试品溶液，在0，2，4，8h先后吸取20μl注入液相色谱仪，进行稳定性考察，结果RSD为0.60%。　　2.8重现性实验取同一批样品，按正文方法制备5份供试品溶液，在相同色谱条件下进行实验，结果RSD为0.33%。　　2.9加样回收率实验精密称取6份已知含量的样品粉末各0.25g,加入等量的水飞蓟宾对照品，按样品含量测定项下的方法操作，记录色谱图，计算加样回收率。结果见表1。其平均回收率为97.10%，RSD为0.63%（n=6）。表1回收率实验结果（略）　　2.1

6、0样品含量测定取3批样品各0.5g，精密称定，依法制成供试品溶液，均以20μl进样，分别测定吸收峰面积，以外标法计算水飞蓟宾含量。结果见表2。表2样品含量测定结果（略）　　3讨论　　曾选用不同溶剂系统作为流动相进行实验，如：甲醇-水-冰醋酸（50∶50∶0.5）、乙腈-甲醇-水-冰醋酸（5∶45∶50∶0.5）、甲醇-水-冰醋酸（48∶52∶1）等［1］溶剂系统，结果甲醇-水-冰醋酸（48∶52∶1）分离效果最好。根据水飞蓟宾的紫外吸收光谱特征，水飞蓟宾在287nm处有最大吸收，选择287nm作为检测波长。　　本研究建立的复方益肝灵片中水飞蓟宾含量的测定方法可为复方益肝灵片

7、标准的进一步完善提供依据。【参考