t淋巴瘤侵袭转移诱导因子1与胃癌细胞侵袭移行能力的相关性研究

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1、T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1与胃癌细胞侵袭移行能力的相关性研究朱金明　余佩武　李翠芳　赵永亮【摘要】　　目的：检测T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)在胃癌细胞株中的表达并分析其与胃癌细胞侵袭、移行能力的关系。方法：采用层黏连蛋白黏附法，从胃癌MKN-45细胞株(MO)中筛选获得高黏附亚株(MH)和低黏附亚株(ML)。应用RT-PCR和SABC免疫组化技术分别检测Tiam1mRNA与蛋白在MO、ML、MH细胞中的表达。应用Boyden小室测定MO、ML、MH细胞的体外侵袭、移行能力并分析其与Tiam1表达间的关系。结果：胃癌MKN-45细胞高黏附亚株(MH)的体外侵袭、移行

2、能力均较MKN-45细胞(MO)及其低黏附亚株(ML)为强(P<0.05)，但MO与ML细胞间无差异(P>0.05)。Tiam1mRNA和蛋白在MH细胞中的表达均较其在MO和ML细胞中的表达为强(P<0.05)，但在MO与ML细胞中的表达无差异(P>0.05)。Tiam1蛋白和mRNA表达水平与胃癌细胞体外侵袭、移行能力呈正相关(P<0.05或P<0.01)。结论：Tiam1基因表达水平升高有可能促进胃癌细胞侵袭、移行能力的增强。【关键词】胃肿瘤　T淋巴瘤侵袭转移诱导因子　侵袭转移　　Correlationbet1andtheinvasiv

3、eandmigratorypotentialofgastriccancercells【ABSTRACT】Objective:ToinvestigatetheexpressionofTlymphomainvasionandmetastasisinducingfactor1(Tiam1)ingastriccancercelllinesandanalysethecorrelationbet1andtheinvasiveandmigratorypotentialofgastriccancercells.Methods:TangastriccancercelllineMKN-45(MO

4、),lessadhesivesubgroup(ML)andhigheradhesivesubgroup(MH)ininadhesionmethodinvitro.RT-PCRandSABCimmunohistochemicaltechnique1mRNAandproteininMO,MLandMHcells.TheinvasiveandmigratorypotentialofMO,MLandMHcellsinvitrober,simultaneouslythecorrelationbet1andtheinvasiveandmigratorypotentialofgastric

5、cancercellsalsoigratorypotentialofMHcellsuchhigherthanthatofMOandMLcells(P<0.05),sodidtheexpressionofTiam1mRNAandproteininMHcells(P<0.05),butthere1andtheinvasiveandmigratorypotentialofgastriccancercells(P<0.05orP<0.01).Conclusion:IncreasingexpressionofTiam1genemightpromotetheinv

6、asiveandmigratorypotentialofgastriccancercells.【KEYigration　　肿瘤细胞的侵袭、转移与其运动能力密不可分，细胞骨架特性则是影响其运动能力的结构基础之一。T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tlymphomainvasionandmetastasisinducingfactor1，Tiam1)作为重要的细胞骨架结构调节因子，已被证明与乳腺癌、卵巢癌、结肠癌等多种恶性肿瘤细胞的侵袭、转移密切相关［1,2］，但目前尚缺乏Tiam1与胃癌细胞间关系的研究。2005年以来，我们通过检测Tiam1在具有不同黏附及侵袭、移行能力的胃癌细胞中

7、的表达，初步探讨了Tiam1表达与胃癌细胞侵袭、移行的关系。1材料与方法1．1　主要试剂　RPMI1640培养基、小牛血清(fcs)和胰蛋白酶(美国Hyclone公司)，层黏连蛋白(美国Sigma公司)，Boyden小室(美国Millipore公司)，Matrigel人工基质(美国BD公司)，TriPure试剂(德国宝灵曼公司)，第一链cDNA合成试剂(上海Sangon公司)，DNA聚合酶(大连Takara公司)，DNALadder(美国MBI公司)，兔抗人/鼠Tiam1多克隆抗体(美国SantaCru