苔藓植物的组织培养——小立碗藓、真藓、小蛇苔

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1、硕士学位论文Y932013苔藓植物的组织培养——小立碗藓、真藓、小蛇苔导师：曹同硕士研究生：陈静文上海师范大学生命与环境科学学院二零零六年五月摘要本论文分别选取用于分子生物学实验的模式植物——小立碗藓：在生态系统中起着重要作用的“先锋植物”——真葑；以及有药用价值的小蛇替为刈琢，进行组织培养的实验硎t究。筛选了这三种苔藓植物的最佳培养条件，诱导了小矗：碗藓和真藓的愈伤组织，完成了小立碗藓整个生活史的培养，并对真藓的士培进行了研究。同时，对小立碗藓总DNA的提取做了初步探讨。主要实验结果如卜．：(1)采用改良的吲体Knop为基本培养基，添

2、加一定量的酒石酸铵，、lpH65，糖浓度为O．5％时，钮(25士t)oC，光照岗期12h／12h，光照强度3500Lx条件F培养小立碗藓的效果最好。将小立碗藓移至室外培养，散光照射，喷洒营养液，可在低温条件b-诱导出孢子体。成熟孢子在诱导孢子萌发的培养基上培养6d后能够萌发，二个月就可完成小立碗藓的生活史。(2)当糖浓度为2％，添加K，IO．05mg一或添加6一BA005nagI。l，诱甘小、i碗藓愈伤组织的效果最为理想。诱导愈伤组织分化的实验绵果表明：未添加任何植物激素的Knop培养基上分化出j_：F常的配子体数量最多。添加2,4一D

3、或IAA的培养基上能长出较多的原丝体。(3)真藓在改良的Knop培养摹上，(25士1)℃，光照强度3500Lx，光照蒯期12h／12h条件下培养时生长情况良好。(4)当糖浓度为2％，6-BA0．05mgL。和KT0．1mgL。1时，真藓愈伤组织的诱导率为100％，愈伤较大，褐化最少。(5)真藓土培的最适条件为：(25土1)℃，泥土+砂+营养十的基质；营养液的种类列其生长的影Ⅱ向并不明显。(6)小蛇苔在(18士1)℃，光照强度3000Lx，光照周期121f12h条件下培养时生长情况良好，与培养基的种类和pH值无明显关系。本研究首次报道真藓

4、愈伤组织的诱导，申请小立碗藓愈伤组织诱导与分化的发明专利，为苔藓植物组织培养的深入研究提供科学依据和技术方法。关键词：苔藓植物组织培养小立碗藓真藓小蛇苔愈伤组织植物激素AbstractThreerepresentativespeciesofbryophyteswereselectedforstudyoi、tissueculture：Physcomitrellapatenswhichasmodelplantiswidelyusedinmolecularbiology；Bryumargenteumwhichaspioneerplanthas

5、importantecologicalfunctionindifferentecosystemsandConocephalumszq，radecompositumwhichasmedicineplantshavepotentialeconomicvalue．Theexperimentsofselectingbestcultureconditionofthreebryophytes，inducingcalliofPpatensandB，argenteumandculturingwholelifehistoryof尸patenswereca

6、rriedOUt．Moreover，extractingDNAfromPpatensistriedandtested，Mainresultsoftheexperimentscallbesummarizedasfollows：(1)PhyscomitrellapatenscarlbeculturedbestontheimprovedmediumKnopaddedtartrateandO．5％glucoseunder(25±1)℃，ligh￡intensity3500Lx，and12hday／12hnightwhenptI65．Thespo

7、rophyteofPpatenscanbeinducedunderlowtemperatureThen，sporecangenerateonthemediumafter6dayscultureCultureofthewholelifehistoryofPpatenstakesabout3monthes．(2)Calliof尸patenswereinducedbetteronmediumKnopplus6-BA0．05mgL“orK’11O．05mg．L。whentheconcentrationofglucoseis2％．Inthedif

8、ferentiationexperiment．normalgamctophyteofPpatensweredifferentiatedinmediumKnop，Moreover,themuchmossofp