缬草油体外抑菌活性研究

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1、缬草油体外抑菌活性研究【摘要】目的探讨缬草油的抑菌活性。方法以索氏提取法和水蒸气蒸馏法提取的缬草油为试材，用管碟法和微量稀释法比较两种方法提取的缬草油对供试菌的抑菌活性、最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果两种方法提取的缬草油对细菌和真菌有一定程度的抑制作用。结论缬草油有抑菌作用，具很大应用潜力。实验结果为其在食品、化妆品行业的开发应用提供了依据。【关键词】缬草；挥发油；抑菌活性　　Abstract：ToinvestigatetheinhibitoryeffectsofthevolatileoilfromVal

2、erianaofficinalisL.VolatileoilValerianaofficinalisL.bydistillationorSoxhletmethod.Inhibitionzone,minimuminhibitoryconcentration(MIC)andminimalbactericidalconcentration(MBC)inedbyusingplatespreadandmicrodilutionmethod.TheresultsindicatedthattheValerianaofficinalisL.v

3、olatileoilsshoicrobialactivitytotestedbacteriaandfungi.Andthehighertheconcentrationofthevolatileoilis,thebettertheantimicrobialeffectis.　　Keyicrobialactivity　　缬草ValerianaofficinalisL.是一种败酱科、缬草属多年生草本植物〔1〕。缬草原产于亚洲，在北美、欧洲、日本和我国的湖南、云南、贵州、四川等省有广泛的分布。缬草的根和根茎具有很高的经济价值和药用价值

4、〔2〕，我国民间很早就用于治痢疾、驱蛔虫、降血压、解痉挛等。从缬草根中提取的挥发油对神经衰弱、失眠、癫痫等有明显疗效〔3〕。同时缬草油还是名贵的天然香料，特别适用于配制高档烟的加香和食品的定香剂。许多植物挥发油由于其特殊的化学组成，在很多研究中表现出了很好的抗菌活性，成为新的高效低毒防腐剂的重要来源〔4〕。目前尚未有对缬草油体外抗菌作用的详细报道，本实验以水蒸气蒸馏法和索氏提取法提取缬草油为试材，进行体外抗菌作用研究，旨在拓宽缬草资源的应用范围，以期为进一步开发利用这一丰富的植物资源提供参考数据。　　1材料与仪器　　1.1原料

5、缬草，采于湖南省湘西自治州(经鉴定为宽叶缬草V．officinalisL．var．latifoliaMiq．）　　1.2菌种枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis，金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus，大肠杆菌Escherichiacoli，黑曲霉Aspergillusniger，青霉Penicilliumcitrinum，根霉Rhizopusspl.。以上菌种均由中南林业科技大学发酵工程实验室提供。　　1.3培养基牛肉膏蛋白胨培养基(细菌用)；马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基(真菌用)121℃高压灭菌

6、20min,备用。　　1.4器材牛津杯，LAC-5060S高压灭菌锅，PYX-280S-A生化培养箱，HIC)的测定　　采用微量稀释法〔8〕。微孔板上的各孔中，依次加入用培养基二倍稀释的药物溶液，每孔200μl，最后一孔不加药物(仅加培养基和细菌)为细菌生长对照孔，然后在每孔中加入稀释菌液50μ1，另外留一列孔不加细菌(仅加培养基和药液)作药液对照孔，使得各孔中挥发油浓度分别50.00，25.00，12.50，6.25，3.13，1.56mg/ml，置于振荡器上振荡1min使孔内溶液充分混匀，置于恒温箱中培养（细菌在37℃下培

7、养24h，真菌在28℃下培养48～72h)，无细菌生长孔所含最低药物浓度即为最小抑菌浓度。　　2.2.4最小杀菌浓度(MBC)的测定　　取上述提取物最低抑菌浓度以上未见细菌生长的各管培养物，分别吸取100μl，移至不含提取物的平皿琼脂培养基上，轻轻推开提取液，置37℃培养过夜，观察有无菌生长，计数少于5个菌落者即为该药的最低杀菌浓度(MBC)〔9〕。　　3结果　　3.1缬草油的抑菌效果　　抑菌效果判断标准为（D为抑菌圈直径）：D≤8mm为不敏感，8mm19mm为高度敏感。　　如表1所示，缬草油对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球

8、菌、青霉均有抑制作用。两种方法得到缬草油对细菌有抑菌效果，抑菌圈直径>14.00mm，而对根霉和黑曲霉的抑菌圈直径8.00mm。缬草油对供试菌株的抑制效果顺序为：金黄色葡萄球菌>枯草杆菌>大肠杆菌>青霉。表1两种方法提取的挥发油对供试菌作用的抑菌圈直径