六君子汤对环磷酰胺的增效减毒作用研究

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1、六君子汤对环磷酰胺的增效减毒作用研究刘智勤,朱惠学,陈鹊汀蒋玉凤,孙宏丽,黄启福【摘要】  目的探讨六君子汤对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)的增效减毒作用。方法建立S180荷瘤小鼠模型后,随机分为4组,即荷瘤对照组、CTX组、六君子汤高剂量+CTX组、六君子汤低剂量+CTX组,每组10只。造模次日开始给药,共10d,停药次日处死,观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况及对小鼠免疫系统和抗氧化酶的影响。结果六君子汤可提高CTX的抑瘤率及血清SOD、GSHpx活性,降低MDA含量,同时还能增强化疗荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力和自然杀伤细胞(NK)活性(P0.05)。结论六君子汤对

2、化疗药物CTX具有增效减毒的作用,其作用可能是通过提高免疫系统功能和抗氧化功能实现的。【关键词】六君子汤环磷酰胺增效减毒肿瘤化疗  Abstract:ObjectiveToobservethesynergyandattenuationofcyclophosphamidum(CTX)activitiesbyLiuJunZiDecoction.MethodsS180tumorbearingmicemodelslyintofourgroups,includingcontrolgroupor,CTXgroup,LiuJunZiDecoction(highandloice.After10days

3、oftreatment,themiceinthefourgroupsormunefunctionandantioxidativeenzymeeasuredrespectively.ResultsLiuJunZiDecoctioncouldpromotespleenlymthocyteproliferation,NKactivityandincreasetumor-proveimmunefunctionandanti-oxidativecapacity.  Keyide;SynergyandAttenuation;TumorChemotherapy  肿瘤是目前严重危害人类生命健康的常见

4、病。当前对肿瘤的治疗仍是以手术为主的综合治疗,其中术后化疗是预防转移和复发的重要治疗手段,然而化疗常引起如脏器损害和免疫力低下等毒副反应,使患者难以坚持治疗。近年来的研究显示,中医药在支持患者完成化疗疗程、增强疗效、防止毒副反应上有着重要的作用,临床运用广泛。六君子汤源自《妇人良方》,主治脾胃气虚兼有痰湿,症见恶心呕吐、胸脘痞闷、四肢无力等症状,其所治疗诸症恰恰为化疗中常见,但六君子汤在肿瘤化疗中的增效减毒作用报道较少,且缺乏系统性和规范性。本研究通过建立S180荷瘤小鼠模型,探讨六君子汤联合化疗药物环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)治疗肿瘤是否具有减毒增效作用,以期

5、为该方的临床应用提供一定实验依据。  1材料与仪器  1.1动物和瘤株清洁级昆明小鼠40只,8~10周龄,雌雄各半,体重18~22g,由河北医科大学实验动物中心提供,合格证编号704113。动物在实验前适应性驯养1周。饲料和垫料由河北医科大学实验动物中心提供。实验期间自由采食饮水。腹水型S180瘤株由河北医科大学实验动物中心提供,L929细胞株由北京市中医研究所提供。  1.2药物六君子汤主要由人参、白术、茯苓、甘草、陈皮、半夏等药物组成,由河北大学附属医院中药房提供,所有药品均经中药专家鉴定。取上述中药自来水浸泡1h后,分别加8,6,4倍量的水煎煮3次,时间分别为药液熬开后40,30

6、,20min,将3次煎煮的药液混合,离心,取上清,80℃水浴浓缩至每毫升含生药0.8g,高温消毒后置4℃冰箱保存备用。化疗药物为注射用环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限公司,批号06112021)。  1.3试剂RpMI1640完全培养基(Amresco公司产品),四氮甲唑蓝(MTT,Amresco公司产品),DMSO(Amresco公司产品),刀豆蛋白A(ConA,Sigma公司产品)。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)测试盒(南京建成生物工程研究所)。  1.4仪器酶标分析仪(北京普朗新技术有限公司产品),CO2培养箱(上海福玛实验设备有限

7、公司产品),超净工作台(苏净集团,苏州安泰空气技术有限公司产品),倒置显微镜(南京江南永新光学有限公司产品)。AE240电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司产品)。22pC分光光度计(上海棱光技术有限公司产品)。  2方法  2.1动物模型的建立〔1〕无菌条件下抽取传代第8天的S180小鼠的腹水,按1:3比例用生理盐水稀释,反复冲打、充分混匀,在显微镜下计数,用生理盐水调整细胞浓度为1×107/ml,取0.2ml于每鼠右侧腋窝下碘酊消毒后皮下接

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