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1、黄芩苷对实验性脑出血大鼠脑损伤的保护作用论文.freelagefolloentalintracerebralhemorrhageinrats.MethodsRatmodelofintracerebralhemorrhageethod.Theratslydividedintoshamoperationcontrolgroup,modelgroup,high-,middle-andloeasuredatthethirdandseventhdayaftermodelingrepectively.Resultsparedoperationcontrolgroup,.freelo
2、delgroup.Thebrainiddle-andloodelgroup.ConclusionBaicalinhasevidentprotectiveeffectonbraindamageafterexperimentalintracerebralhemorrhageinrats,ayberelatedtotheincreaseofSODanddecreaseofMDA,NOandNOS.Keyorrhage；brainorrhage,ICH)是指脑实质内血管破裂出血,多由高血压、脑动脉硬化、肿瘤等引起,其发病年龄多在40～60岁,男性多于女性。脑出血是临床常见病,具
3、有较高发病率、病死率及致死率1。本研究通过检测黄芩苷对大鼠脑出血后脑组织含水量及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)等生化指标的影响,探讨其对大脑的保护机制。1实验材料1.1动物健康SD大鼠,雌雄各半,共100只,体重200～250g,购于安徽医科大学实验动物中心,合格证号：皖医动准字03号。1.2药物与试剂Ⅶ型胶原酶(批号036k8600)由Sigma公司提供；肝素钠(批号F20041223)由国药集团化学试剂有限公司提供；黄芩苷由博泰生物科技有限公司提供；SOD试剂盒(批号20070414)、MDA试剂盒(批号2007
4、0416)、NO试剂盒(批号20070416)、NOS试剂盒(批号20070414)及考马斯亮兰蛋白试剂盒(批号20070413),均购自南京建成生物工程研究所。1.3仪器脑立体定位仪(江湾Ⅰ型C)；7200型紫外分光光度计(尤尼柯上海仪器有限公司)；冷冻离心机(Sigma,3K30)；玻璃匀浆器、微量进样器均为上海仪器二厂产品。2实验方法2.1分组与给药随机将大鼠分为5组,即假手术组、模型组及黄芩苷高、中、低剂量组,每组12只。造模成功后2h开始给药。黄芩苷低、中、高剂量组分别按50、100、200mg/kg剂量腹腔注射,之后连续用药3～7d,每日1次；假手术组与模型
5、组在相应时间点注射等体积生理盐水,每日1次。2.2大鼠脑出血模型制作1大鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉(380mg/kg)。将大鼠俯卧固定于立体定位仪上,使前囟与后囟相平,剪去顶毛,局部皮肤消毒,头皮正中切口0.8cm,暴露前囟,于前囟后0.2mm,中线右旁开2.9mm处钻孔,用固定于立体定向仪上的微量注射器(5μL,针头直径0.7mm)沿钻孔进针,深约6mm(此处为尾状核位置),缓慢注入含0.5U/μLⅦ型胶原酶和7U/μL肝素的生理盐水1.2μL,留针8min后退针,缝合头皮。假手术组：注入等量生理盐水。2.3神经症状观察根据Bederson等2的评定方法分为3级。
6、1级：将大鼠尾巴提起，瘫痪侧前肢回收屈曲于腹下,正常侧前肢向地面伸展(0～4分)；2级：除1级体征外,向瘫痪侧倒推大鼠时阻力较从对侧明显降低(0～4分)；3级：除以上体征外,大鼠有向瘫痪侧旋转的行为(0～4分)。术后根据此标准进行评分,将不符合此标准及死亡的大鼠剔除。2.4脑含水量测定分别于3d和7d后将动物处死迅速取脑,并取含注射部位脑组织做脑含水量测定。脑含水量测定采用干湿重法：称量湿重后,在100℃烘箱内烘干24h至恒重,称量干重。脑含水量(%)＝(湿重－干重)/湿重×100%。2.5脑组织超氧化物歧化酶、丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合酶的检测分别于造模后3d和7d
7、将动物处死取脑,制备脑匀浆,严格按照试剂盒说明书进行检测。SOD测定采用黄嘌呤氧化酶法,MDA测定采用硫代巴比妥酸(TBA)法,NO测定采用硝酸还原酶法。2.6统计学方法数据以x±s表示,组间差异用SPSS统计软件进行方差分析。3结果(见表1、表2)表1各组大鼠脑组织SOD、MDA、NO、NOS含量比较(略)注：与假手术组比较,*P0.05；与模型组比较,△P0.05(下同)表2各组大鼠脑含水量比较(略)4讨论脑组织水份含量测定是反映脑水肿的主要指标,脑含水量的高低直接反映脑水肿的严重程度,同时也可反映脑细胞的损伤程度。本研究采用胶原酶注
