桦褐孔菌对糖尿病豚鼠脂类代谢机理的影响论文

《桦褐孔菌对糖尿病豚鼠脂类代谢机理的影响论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、桦褐孔菌对糖尿病豚鼠脂类代谢机理的影响论文李天洙，朴永泉，张学武【摘要】目的通过观察桦褐孔菌水提取物对糖尿病豚鼠的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等生化指标及对Ser/Thr激酶蛋白激酶B(PKB)、HMGCoA还原酶(HMGCoAreductase)表达的影响，初步探讨桦褐孔菌影响糖尿病豚鼠脂类代谢的机理。方法选用成年雄性豚鼠48只分组，每组8只：正常组，桦褐孔菌小剂量组、中剂量组、大剂量组，阴性对照组及阳性对照组。链脲佐菌素(STZ)腹腔注射

2、制作豚鼠糖尿病模型.freela公司)，蛋白质提取纯化试剂盒(Biossp1250)，HMGCoA还原酶、PKB单克隆抗体(SantaCruz,USA);其他试剂均应用国产优级纯试剂。1.4仪器全自动生化分析仪(日立7600)，电泳装置(Bio-rad)。2方法2.1制作糖尿病动物模型实验动物适应性喂养1周后,禁食不禁水12h,一次性腹腔注射STZ80mg/kg(临用前用pH4.5的柠檬酸缓冲液溶解,配成浓度为1%混合液,30min内注射完),第7天禁食不禁水12h,用乙醚麻醉后取眦静脉血,离心后取血清测FBG,取

3、FBG≥8.83mmol/L者作为糖尿病成模标准2。2.2实验分组及药物处理取造模成功的糖尿病豚鼠48只(本实验造模成功54只)，按血糖和体质量随机分为阴性对照组(模型组)，桦褐孔菌小剂量组、中剂量组、大剂量组及阳性对照组(盐酸二甲双胍治疗组)，每组各8只，另选未造模的8只豚鼠为正常对照组，桦褐孔菌小剂量组、中剂量组、大剂量组分别灌胃桦褐孔菌提取物300，600，900mg/kg。阳性对照组灌胃盐酸二甲双胍200mg/kg，正常对照组和糖尿病模型组每天灌胃相同剂量的蒸馏水1次,.freelin/次。加入1∶1000

4、稀释的羊抗豚鼠HMGCoA还原酶、PKB单克隆抗体室温培育1h，再加入1∶200稀释的兔抗羊IgG二抗培育2h。取出膜后，TBST充分冲洗3次,15min/次。压片后加入ECL显色液，置于UVP图像成像仪中观察并分析结果。条件设置为曝光1，2，4min，CCD自动获取图像。以β-actin作为内参对照。2.5统计分析数据以±s，实验前后数据比较采用t检验，各组间进行单因素方差分析。实验数据处理均用SPSS16.0统计软件进行统计分析。3结果3.1实验组TG、TC的变化实验前后相比较，阳性对照组和桦褐孔菌提取物大剂量

5、组的TG水平均显著减少(P0.01)，桦褐孔菌提取物中剂量组的TG水平均明显减少(P0.05)，阳性对照组和桦褐孔菌提取物大、中剂量组的TC水平均显著减少(P0.01)。实验后，与阴性对照组比较，阳性对照组和桦褐孔菌提取物大剂量组的TG水平显著减少(P0.01)，桦褐孔菌提取物中剂量组的TG水平均明显减少(P0.05),阳性对照组和桦褐孔菌提取物大、中剂量组的TC水平均显著减少(P0.01),并表现为浓度梯度依赖性。结果见表1。表1各实验组实验前后TG、TC的比较实验后与实验前比较，*P0.05，**P0.01;与

6、阴性对照组比较，▲P0.05，▲▲P0.01;n=83.2实验组LDL-C和HDL-C的变化实验前后相比较，阳性对照组和桦褐孔菌提取物大剂量组的LDL-C水平显著下降(P0.01)，桦褐孔菌提取物中剂量组的LDL-C均明显下降(P0.05),阳性对照组和桦褐孔菌提取物大剂量组的HDL-C水平显著下降(P0.01)，桦褐孔菌提取物中剂量组的HDL-C均明显下降(P0.05)。实验后，与阴性对照组比较，阳性对照组和桦褐孔菌提取物大剂量组的LDL-C水平显著下降(P0.01)，桦褐孔菌提取物中剂量组的LDL-C均明显下降

7、(P0.05)，阳性对照组和桦褐孔菌提取物大剂量组的HDL-C水平显著下降(P0.01)，桦褐孔菌提取物中剂量组的HDL-C均明显下降(P0.05)，并表现出浓度梯度依赖性;阳性对照组与桦褐孔菌提取物大、中剂量组的HDL-C水平比较无显著变化。结果见表2。表2各实验组实验前后LDL-C和HDL-C的比较3.3各实验组HMGCoA还原酶和PKB表达的变化实验后，各实验组PKB和HMGCoA还原酶表达情况见图1，桦褐孔菌低剂量组和阴性对照组与正常组比较PKB表达略低于正常组，阳性对照组和阴性对照组比较PKB表达显著增高

8、，桦褐孔菌组的PKB表达呈浓度依赖性增加，桦褐孔菌高剂量组与阳性对照组比较，PKB表达显著增高。与此相反，桦褐孔菌组的HMGCoA还原酶表达呈浓度依赖性减少，桦褐孔菌高剂量组的HMGCoA还原酶表达均低于阴性对照组、正常组和阳性对照组表达，其中阴性对照组的HMGCoA还原酶的表达量最多。图1桦褐孔菌对HMGCoA还原酶和PKB表达的影响4讨论糖尿病是一种内分