《中药鉴定学》实验指导

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1、全国中医药高职高专卫生部规划教材(供中药等专业用)《中药鉴定学》实训指导书主编彭志芬副主编王小平周铁文编者彭志芬王小平周铁文陈文吴卫江西中医药高等专科学校2007年7月前言《中药鉴定学》是阐述中药鉴定基本理论和技能的一门学科,为中药学、医药营销、中药制药技术、中药材栽培技术等专业的一门重要专业课,在中药学各专业学科中占有极为重要的地位。根据卫生部教材办公室《全国中医药高职高专卫生部规划教材编写要求》、七院校教材编写委员会《全国中医药高职高专教材编写基本原则》和《中药鉴定学》教学大纲的要求,本实训指导书在编写过程中,以就业为导向,以培养技术应用能力为主线,力求与专业培养

2、目标相一致,与国家药品标准、中药现代化要求相统一,与《药用植物学》、《中药化学》、《中药制剂分析》等相关学科的内容相衔接,注重吸收中药鉴定发展的最新研究成果,注重教材整体内容的优化,力求内容充实、简明扼要、重点突出。全书内容包括总论、植物药类、动物药类、矿物药类、中成药类的实验指导5大篇,共40项实验。由于编写时间仓促,业务水平有限,不足之处在所难免,希望广大师生在使用过程中提出宝贵意见,以便修订和完善。《中药鉴定学》编写组2007.7《中药鉴定学》实验指导实验一显微镜的使用和组织制片【实验时数】2学时【实验地点】中药鉴定学实验室【实验器具准备】显微镜、培养皿、毛笔、

3、刀片等;稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液。【实验要求】掌握显微镜的使用方法,掌握徒手制片的制作和永久制片的制作过程,注意事项【实验内容】熟练显微镜的使用,采用徒手切片法制作药材的横切片或纵切片,操作简便,迅速,制成的切片能保持其细胞内含物的固有形态,便于进行各种显微化学反应。熟悉永久制片的制作过程【实验内容方法】(一)徒手切片法徒手切片法主要用于临时制片,制片迅速,更为重要的是制片过程中没有复杂的化学处理,可以观察到植物的天然色彩,真实地反映植物细胞组织的本来面目,也利于显微化学的观察,因而必须熟练掌握。1、 材料的软化(1)热水浸泡法:材料置600C温水浸泡数小时

4、。本法适用于纤细的根茎、根、全草、叶、花等质软而细薄的材料。(2)水煮法:材料置沸水中煮一段时间,软后取出。本法适用于软质的根、根茎、茎木、皮类等材料。2、 切片方法(1)手持法:先将材料断面削平,用左手拇指和食指夹住材料下端,用中指或无名指托住,使材料高出拇指和食指,并注意食指应略高于拇指以防切片。然后用右手平拿刀片,刀口向内,并与材料的断面平行,切时应用臂力以轻微均匀的动作向后拉切,不得断续,更不得来回拉力,切片以薄而透明,组织、细胞形态清晰者为好。(2)夹持法:取夹持物切成适当大小,纵向剖开一定深度,将材料夹入按手持拉切,切下的片子放入培养皿中即可。(3)压切法

5、:将材料放于切片板上,左手中指及食指轻轻压住材料,右手持刀自左向右或自上而下切削,切片用毛笔挑入培养皿中备用。此法刀刃易伤,应避免刀刃与板接触。此法对于细小果实种子类或某些较硬的材料效果比前二法要佳。3、不染色装片   用毛笔挑取或用镊子轻取透明的薄片放于载玻片中央,直接观察或用水合氯醛透化后加封芷剂盖上盖玻片即可。4、染色装片(1)番红染色:将手切的薄片移入置番红水溶液或酒精中进行染色,番红染色2~24小时,酒精溶液染色1~24小时。(2)冲洗:染色后用水或5%酒精冲洗,除去多余的番红色水。(3)脱水:用30%、50%、70%、80%不同浓度的酒精依次各浸约5分钟,

6、以逐渐脱除组织细胞内的水分。如果番红染色是用酒精液,则可自5%酒精开始脱水。(4)龙胆紫二重染色:将脱水至80%酒精溶液的切片用龙胆紫酒精溶液染1~5分钟可使纤维素细胞壁呈紫色,如龙胆紫染色适宜即可,用80%酒精浸洗后,用90%及无水酒精(二次)各2分钟以脱去材料中全部水分。   在二重染色后,如紫色太深可用盐酸酒精溶液作褪色剂(100ml)的70%~80%酒精中加1~2滴盐酸放置数刻至紫色适宜为止,用70%~80%酒精洗数次以除去盐酸。(5)透明:材料脱水后浸入50%甲苯(即等重的二甲苯与无水乙醇)5~10秒及纯二甲苯10秒使细胞组织透明,便于观察与封芷。(6)封芷

7、:将材料移入载玻片上,取加拿大香脂1~2滴于材料上加盖玻片即可长久保存。(7)标签:写明材料名称及制作日期等。(二)表面制片法   表面制片通常属整体封固法的一类,它是将叶的表皮、花冠、果实、种子的外表皮、草质茎的表皮等采取不同的方法取下经过处理而制成的玻片标本。1、材料的预处理   新鲜材料可用剪刀剪下所需部位,用清水冲洗,处理成适当大小备用。若干药材叶可先用冷水浸,再用温水浸到能恢复原样即可,若是较硬的材料(果实、种子)还需经过软化处理。2、方法(1)撕取法,一般用于表皮易于剥离的表皮制片,取材料分清上、下表皮用刀片在表面轻划一刀或等分折叠后,用

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