卵巢癌组织中upa与pai1 mrna表达及意义论文

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1、卵巢癌组织中uPA与PAI1mRNA表达及意义论文【摘要】目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)和纤溶酶原激活剂抑制物1（PAI1）mRNA在卵巢癌组织中的表达及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应技术,检测38例卵巢癌、21例卵巢良性上皮性肿瘤及17例正常卵巢组织中uPA及PAI1mRNA的表达，并分析其与病理分化程度的相关性。结果uPA及PAI1mRNA在卵巢癌中的表达水平均较卵巢良性上皮性肿瘤、正常卵巢组织显著升高(F=184.51、51.00，q=11.34～26.69,P0.05)。在不同分化程度的卵

2、巢癌组织中uPA及PAI1mRNA的表达量随肿瘤分化程度的降低而增加(F=110.62、38.43,q=3.10～6.86，P0.05)。结论卵巢癌组织中uPA及PAI1mRNA呈高表达,且与卵巢癌的病理分化程度相关。【关键词】卵巢肿瘤尿纤溶酶原激活物纤溶酶原灭活剂基因表达［ABSTRACT］ObjectiveToexploretheexpressionsandtheirsignificanceofurokinasetypeplasminogenactivator(uPA)andplasminogenactivator

3、inhibitor1(PAI1)inovariancancer.MethodsTheexpressionsofuPAmRNAandPAI1mRNAor(n=21)andnormalovary(n=17).ResultsTheexpressionsofuPAmRNAandPAI1mRNAinthecancertissueorandnormalovariantissue(F=184.51,51.00;q=11.34-26.69;P0.05).AnegativecorrelationexistedbetRNAandPAI

4、1mRNAandthedifferentiationofthecancer,thehigherofexpressionsofuPAmRNAandPAI1mRNA,theloRNAandPAI1mRNAs;urinaryplasminogenactivator;plasminogeninactivators；geneexpression肿瘤细胞的浸润和转移能力与其降解细胞外基质(ECM)有关。细胞外基质降解和基膜破坏是肿瘤浸润、转移的必要条件,其中尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）系统介导的细胞外基质水解起着重要作用［1］。

5、本研究采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)测定uPA及纤溶酶原激活剂抑制物1（PAI1）mRNA在卵巢癌中的表达,探讨其与临床病理分化程度的关系。1资料与方法1.1一般资料2005年1月～2006年5月，收集青岛大学医学院附属医院妇科治疗的病人的标本共76例，其中17例为因子宫肌瘤行手术治疗病人的正常卵巢组织，病人年龄27～52岁，平均为46.4岁。21例为卵巢良性上皮性肿瘤组织.freelg，剪碎,加入Trizol溶液1mL裂解，按Trizol一步法抽提得到总RNA，紫外线分光光度计检测RNA浓度和纯度,放置-70

6、℃冰箱保存。1.2.2RTPCR反应取0.18μg总RNA,在50μL体系中扩增，引物由上海生工生物工程公司合成［2］。uPA引物序列Primer1:5′ACTACTACGGCTCTGAAGTCACCA3′，Primer2:5′GAAGTGTGAGACTCTCGTGTAGAC3′。RTPCR产物长度为200bp。uPARTPCR条件为：50℃反转录30min，95℃预变性15min；然后94℃变性1min，62℃退火1min，72℃延伸1min,30个循环；最后72℃延伸10min。PAI1引物序列Prime

7、r1:5′TGCTGGTGAATGCCCTCTACT3′，Primer2:5′CGGTCATTCCCAGGTTCTCTA3′。RTPCR产物长度398bp。PAI1RTPCR条件为：50℃反转录30min，95℃预变性15min；然后94℃变性1min，60℃退火1min，72℃延伸1min,32个循环；最后72℃延伸10min。内对照看家基因GAPDH引物序列Primer1：5′ACTGCCACCCAGAAGACT3′,Primer2:5′GCTCAGTGTAGCCCAGGAT3′。RTPCR产

8、物长度292bp。GAPDHRTPCR条件为：50℃反转录30min，95℃预变性15min；然后94℃变性1min，62℃退火1min，72℃延伸1min,27个循环；最后72℃延伸10min。1.2.3RTPCR半定量分析取3μLPCR扩增产物，经20g/L琼脂糖电泳后，置于凝胶成