全血dna小量试剂盒说明书

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1、杭州新景生物试剂开发有限公司区地址：浙江省杭州市西湖科技经济园金蓬街366号1幢东4F邮编：310030电话：0571-87381295传真：0571-87381297全血DNA小量试剂盒说明书产品组成全血DNA小量试剂盒Cat.No.5次样品300100550次制备3001050250次制备3001250核酸纯化柱2ml离心管BufferL1BufferL2BufferWA（浓缩液）BufferWB（浓缩液）BufferTE说明书5个5个2ml2ml1.9ml1.5ml1.2ml1份50个50个16ml16ml12ml9.5ml12ml1份250个250

2、个80ml80ml56ml50ml60ml1份产品储存与有效期产品如果储存于室温（15~25℃），可在两年内保持使用性能无明显变化；如果将产品储存于2~8℃，可延长产品的有效期至两年以上。技术支持杭州新景生物试剂开发有限公司研发部：e-mail:technical@simgen.cn,电话：400-0099-857。产品介绍本产品可在15－20分钟内从200－400µl新鲜的或者是冷冻贮藏的人或动物全血中快速分离纯化基因组DNA。产品不使用蛋白酶K，裂解液BufferL1溶解全血后，经BufferL2沉淀去除血红蛋白，上清中的基因组DNA可结合到纯化柱上，

3、经BufferWA和BufferWB洗涤去除残留在膜上的蛋白与PCR抑制物后，基因组DNA用BufferTE洗脱，并可立即用于各种分子生物学实验。用户需自备的试剂与物品1．无水乙醇2．1.5ml离心管3．移液器吸头（为避免样品间的污染，建议选用含有滤芯的移液器吸头）4．一次性手套及防护用品和纸巾5．台式小量离心机（可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子）6．水浴锅和旋涡振荡器7．可能需要使用生理盐水使用前准备1）如果离心机有制冷功能，请将温度设置到25℃。2）将BufferTE在56℃温育。3）根据试剂瓶标签上的指示在BufferWA和BufferW

4、B中加入无水乙醇，并在标签的方框中打勾作好“乙醇已加”的标记。www.simgen.cn仅供科研使用，请勿用于人体及动物的治疗或临床诊断。Ver.2杭州新景生物试剂开发有限公司区地址：浙江省杭州市西湖科技经济园金蓬街366号1幢东4F邮编：310030电话：0571-87381295传真：0571-87381297操作步骤本操作步骤是为从400µl全血中提取DNA而设计，如果血液体积小于400µl但大于200µl，可按比例减少BufferL1和BufferL2的用量(注意必须严格按BufferL1：抗凝全血：BufferL2=3:4:3的体积比进行操作，否

5、则将导致后续步骤不能进行)，其他试剂用量不变；如果血液体积小于200µl，建议在血液中补充生理盐水使血液体积至少至200µl。1.加300µlBufferL1到1.5ml离心管中。2.加入400µl抗凝全血，盖上管盖，旋涡振荡30秒。*不可加少于400µl体积的抗凝全血。如果血液体积不足400µl，则补加生理盐水使血液体积达到400µl。3.加入300µlBufferL2，剧烈摇晃离心管3－5次，再旋涡振荡30秒混匀。*此步骤将出现大量血红蛋白沉淀。4.13000rpm离心2分钟。5.将步骤4中的上清液倒入到核酸纯化柱中（核酸纯化柱置于2ml离心管中），盖

6、上管盖，12000rpm离心30秒。*从某些动物血液中提取DNA，由于其血红蛋白较少，离心得到上清液的体积可能会大于纯化柱的容积，此时建议吸取700µl上清液到核酸纯化柱中，或者将上清液分两次进行本步骤的操作。6.弃2ml离心管中的滤液，将核酸纯化柱置回到2ml离心管中，在核酸纯化柱中加入500µlBufferWA,盖上管盖，12000rpm离心30秒。*确认在BufferWA中已经加入无水乙醇。*纯化柱膜上如残留有血色素为正常现象，可被BufferWA洗去。*滤液无须彻底弃尽，如果要避免粘附在离心管管口的滤液对离心机的污染，可将2ml离心管在纸巾上倒扣拍

7、击一次。7.弃2ml离心管中的滤液，将核酸纯化柱置回到2ml离心管中，在核酸纯化柱中加入600µlBufferWB,盖上管盖，12000rpm离心30秒。*确认在BufferWB中已经加入无水乙醇。8.弃2ml离心管中的滤液，将核酸纯化柱置回到2ml离心管中，14000rpm离心1分钟。*如果离心机的离心速度达不到14000rpm，则用最高速离心2分钟。*请勿省略该步骤，否则可能因所纯化的核酸中混有乙醇而影响后续的PCR效果。9.弃2ml离心管，将核酸纯化柱置于一个洁净的1.5ml离心管中，在纯化柱中加入100-200µl56℃温育的BufferTE，盖上

8、管盖，室温静置1分钟，12000rpm离心30秒。*如果离心机没有