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1、2009年9月September2009色谱ChineseJournalofChromatographyVol.27No.5556～565核酸适配体亲和色谱的研究进展赵强,乐晓春3(加拿大阿尔伯塔大学医学和牙科学院临床医学和病理系分析和环境毒理学专业,埃德蒙顿市T6G2G3)摘要:核酸适配体亲和色谱是将核酸适配体作为色谱固定相上的亲和配体的一种新型色谱技术。核酸适配体是一种可以特异性地识别目标物的寡聚核苷酸,与免疫抗体相比,核酸适配体在筛选制备、稳定性及应用等方面都显示出独特的优点。本文介绍了核酸适配体亲和色谱
2、在小分子、蛋白质和细胞的分离和分析中的应用,对核酸适配体亲和色谱的研究现状和发展前景进行了综述。关键词:核酸适配体;亲和色谱;小分子物质;蛋白质;细胞;分离;检测;综述中图分类号:O658文献标识码:A文章编号:100028713(2009)0520556210栏目类别:专论与综述Recentadvancesinaptameraffinitychromatography3ZHAOQiang,LEXChris(AnalyticalandEnvironmentalToxicology,DepartmentofLabor
3、atoryMedicineandPathology,FacultyofMedicineandDentistry,UniversityofAlberta,EdmontonT6G2G3,Canada)Abstract:Aptameraffinitychromatographymakestheuseofaptamersasaffinityligandstoachievechromatographicseparationandconcentration.Aptamersaresinglestrandedoligonu2cl
4、eotidesthatcanspecificallybindtotargets.Theyshowuniqueadvantagesoverantibodiesinpreparation,stabilityandapplications.Thisarticlesummarizestheapplicationsofaptameraf2finitychromatographytotheseparationandanalysisofsmallmolecules,proteins,andcells.Bycriticallyev
5、aluatingliterature,thisreviewdescribesthecurrentstatusanddiscussesthefu2tureprospectsofaptameraffinitychromatography.Keywords:aptamers;affinitychromatography;smallmolecules;proteins;cells;separation;detection;review亲和色谱是一种重要的具有高选择性的分离技术,其广泛应用于样品的纯化富集和定量定性分析。它的
6、基本原理是利用具有特异性识别功能的试剂,并将其固定于色谱固定相上,待分析物与固定在固定相表面的识别配体产生专一的相互作用,从而实现与样品中其他物质的分离[1]。待分析物的保留时间长短由目标物与配体间的亲和力决定。当配体与待分析物之间存在的亲和力不是很强时,待分析物在固定相上的保留较弱,不需要改变流动相待分析物就可被洗出;当配体与待分析物之间存在很强的亲和力时,待分析物会被选择性地吸附在固定相上,此时需要更换合适的流动相才能将被吸附的待分析物有效地洗脱。亲和配体是亲和色谱技术中的关键,常用的亲和配体包括免疫抗体、金属
7、离子、酶分子、染料等。近几年来,以核酸适配体(子)(aptamer)作为亲和配体用于分离和检测小分子、蛋白质和细胞等的研究工作有不少报道。本文着重综述核酸适配体亲和色谱的进展,对核酸适配体亲和色谱技术的发展、应用以及面临的问题和前景进行介绍。1核酸适配体核酸适配体(子)是指可与目标分子特异性结合的寡聚核苷酸亲和配体(单链脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)),它是通过一种称作SELEX(指数富集式配体系统进化,systematicevo2lutionofligandsbyexponentialenrichm
8、ent)的体外筛选和放大技术,从随机寡聚核苷酸组合库中筛选出来的一组寡聚核苷酸[2-4]。自20世纪90年代以来,核酸适配体(子)作为一种新型的亲和配体出3通讯联系人:乐晓春,博士,教授,研究方向为生物分析化学、环境化学、毒理和人体健康.Tel:+001278024926416,E2mail:xc.le@ualberta.ca.基金项目:NaturalSci
