乳腺浸润性导管癌中galectin3、opn的表达及其临床病理学意义

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1、乳腺浸润性导管癌中Galectin3、OPN的表达及其临床病理学意义作者：余慧萍，樊祥山，孟凡青，张东生，周强，吴鸿雁，孟奎【摘要】目的：检测Galectin3和骨桥蛋白(OPN)在乳腺浸润性导管癌(IDC)中的表达情况，并探讨其在IDC进展过程中的意义。方法：应用组织芯片技术和免疫组化法研究100例乳腺IDC和35例乳腺良性病变中Galectin3、OPN的表达情况，并统计分析其与年龄、肿瘤最大直径、组织学分级、TNM分期以及淋巴结转移间关系。结果：Galectin3在乳腺IDC和良性病变中的表达强度具有明显差异(χ

2、2=47.814，P=0.000)，OPN在二者中的表达差异无统计学意义。在IDC组,Galectin3表达强度与TNM分期、淋巴结转移均呈正相关关系(分别为：rs=0.300，P=0.002;rs=0.335，P=0.001)，与年龄、肿瘤最大直径、组织学分级的关系无统计学意义;OPN的表达强度与肿瘤最大直径、TNM分期以及淋巴结转移均呈正相关(分别为：rs=0.236，P=0.018;rs=0.389，P=0.000;rs=0.404，P=0.000)，与年龄、组织学分级的关系无统计学意义;Galectin3与OPN的

3、表达也呈正相关关系(rs=0.266，P=0.007)。结论：Galectin3在乳腺良、恶性病变中的表达水平具有明显差异，在乳腺病变中检测Galectin3的表达对病变性质的判断具有重要意义;高表达Galectin3、OPN的乳腺IDC具有更高侵袭性和淋巴结转移能力，对二者作用机制的深入研究有可能使其成为乳腺IDC患者个体化治疗的新靶点。14【关键词】乳腺肿瘤;浸润性导管癌;淋巴结转移;Galectin3;骨桥蛋白Galectin3是一种β半乳糖苷结合蛋白,具有影响细胞黏附[12]、抗凋亡[3]、促进肿瘤微血管

4、发生[4]等作用，与肿瘤的侵袭和转移密切相关。骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种分泌型钙结合磷酸化糖蛋白，近年来，OPN与肿瘤的发生发展，特别是与肿瘤转移的关系日益引起人们的关注，其在许多人类肿瘤组织中过表达，被公认为是与肿瘤转移相关的基因。目前二者在乳腺癌方面的相关研究还较少，因此我们希望通过组织芯片技术进一步研究人类乳腺癌组织中这两种蛋白的表达情况及其临床病理学意义。　　1材料与方法　　1.1标本来源　　收集南京大学医学院附属鼓楼医院2002年6月至2006年5月间存档的乳腺浸润性导管癌(IDC)标本共计10

5、4例，患者年龄28～80岁，中位年龄49岁，平均年龄51.32岁;另收集该院2006年1月至2006年12月期间乳腺良性增生41例(纤维腺瘤30例，腺病11例)。所有病例术前均未行放、化疗,14临床资料完整，标本均经4%中性甲醛固定，常规处理后石蜡包埋。　　1.2主要试剂和仪器　　Galectin3兔抗人多克隆抗体工作液及OPN鼠抗人单克隆抗体工作液均购自北京中杉公司，组织微阵列打孔系统购自美国Beecher公司，组织芯片载体采用德国MenzelGlaserSuperFrostPlus玻片。　　1.3组织芯片制备和免疫组织

6、化学染色　　所有病例经复诊并根据HE切片标记出典型病变范围后，应用组织微阵列打孔仪在每例组织典型病变处取样，分别移植至受体蜡块上，制成乳腺病变组织芯片蜡块;按同样方法构建另一个包含相同病例且阵列设计相同的组织芯片蜡块以进行实验重复;分别连续4μm切片，制备成组织芯片备用。对组织芯片进行Envision二步法免疫组织化学染色，实验步骤按试剂盒说明书进行，每个检测指标均在另一张组织芯片上重复1次。　　1.4结果判定　　Galectin143及OPN阳性部位在细胞质，以出现黄色颗粒且染色强度高于背景非特异性着色者为阳性细胞。综合考

7、虑染色强度和阳性细胞数：无染色(-)，<60%肿瘤细胞弱到中等染色(+)，<60%肿瘤细胞强染色或>60%肿瘤细胞弱到中等染色(++)，>60%肿瘤细胞强染色(+++)[5]。由两名富有经验的病理医师独立对2张组织芯片上的染色结果分别进行评分，对同一病例的评分结果取平均值作为该病例的最终评分。　　1.5统计学分析　　所有数据应用SPSS12.0统计软件进行处理。各组资料的比较采用χ2检验和Fisher’s精确概率检验，相关性采用Spearman秩相关分析，P<0.05认为差异有统计学意义。　　2结

8、果　　2.1组织芯片质量　　组织芯排列整齐，共有104例乳腺IDC组织和41例良性病变样本，去除肿瘤细胞过少及掉片的样本，并选取Galectin3与OPN二者染色共同有效者，共计135例有效样本(乳腺IDC100例，乳腺良性病变35例)。14　　2.2Galectin3与