sysmex五分类血球分析仪

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1、Sysmex五分类血球分析仪韩骏飞日本Sysmex公司系列血细胞分析仪是在国内应用非常广泛的仪器,从三分类法到五分类法的各种型号仪器都有大量用户。其仪器型号种类丰富,功能和测定参数各异,其各种仪器间均有近似的检测原理,但在结合特定的功能以达到不同的分析目的方面,其原理和所用试剂又有不完全相同之处。本文XE-2100型血细胞分析仪为例说明其在白细胞计数和分类方面的原理和特点。SysmexXE-2100在白细胞分类上采用半导体激光流式细胞技术结合核酸荧光染色技术进行白细胞计数和分类。半导体激光照射在通过鞘流技术处理的细胞上,可根据每个细胞所产生的三种信

2、号来鉴别细胞类别。前向散射光(FSC)信号可反应细胞体积大小;侧向散射光(SSC)信号可反应细胞的颗粒和细胞核等内含物的信息;侧向荧光(SFL)强度信号则用于分析细胞内脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的含量。在白细胞分析上主要采用两个通道进行细胞计数和分类,两个通道均采用激光和鞘流进样的方式测定。DIFF通道:STROMATOLYSER-4DL试剂中的表面活性剂可以溶解掉标本中的红细胞和血小板,并在白细胞膜上打出小孔;然后第二种试剂STROMATOLYSER-4DS中的聚次甲基染料通过这个小孔进入白细胞中,与细胞核的核酸和细胞器结合,在经

3、过波长633nm的激光照射,产生的荧光强度与细胞的核酸含量成正比。STROMATOLYSER-4DL试剂还具有与嗜酸性颗粒特异性结合的能力,可根据侧向散射光信号强度,将嗜酸性粒细胞从中性粒细胞中分离出来。这样可以将中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞清楚的分离开。在DIFF散射图当中可以得到白细胞的四个分群(LMNE)。WBC/BASO通道是专用作检测嗜碱性粒细胞的通道,因为嗜碱性粒细胞数量非常少,因此必须采用特殊技术处理。STROMATOLYSER–FB是一种酸性试剂,可将红细胞和血小板形成淡影化,将除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成裸核形

4、态,然后采用前向散射光(FSC)信号和侧向散射光(SSC)信号使嗜碱性粒细胞从其它细胞中分离出来。前向散射光与细胞体积测定相关,侧向散射光与裸核后的细胞结构复杂性有关。在这个通道中可以获得白细胞总数和嗜碱性粒细胞的数量。图4SysmexXE-2100白细胞分类散点图仪器在幼稚粒细胞分析上有特殊的IMI通道,在IMI检测通道中主要应用射频(RF)技术和直流电阻抗法(DC)。这个测定通道根据幼稚细胞膜表面比成熟细胞膜表面含有脂质少的现象,在稀释液中加入硫化氨基酸(IM试剂),由于占位不同,结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多,对溶血剂有抵抗作用,对幼稚细胞具

5、有保护作用。当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解掉,而幼稚细胞不易被溶解破坏,可通过电阻法检测出来。射频技术用于测量细胞核的大小和颗粒的多少,而直流电信号可反应出细胞体积的大小。在有核红细胞计数上通过专门的有核红细胞检测程序和专用通道-NRBC通道,在处理标本时加入STROMATOLYSER-NR专用试剂,它能使成熟红细胞溶解又可保持有核红细胞的核结构,同时也将白细胞保持完好。STROMATOLYSER-NR试剂中的聚次甲基荧光染料可渗透进入白细胞膜内,将白细胞和有核红细胞的核染色。通过检测荧光强度得到:白细胞核大荧光强度高,有核红细胞核小,荧光强度低,

6、正常红细胞无细胞核和破碎,荧光强度极低。根据荧光强度差和前向散射光信号测定的细胞体积差,可将有核红细胞从其他细胞群中区分出来。图5SysmexXE-2100的幼稚细胞通道和有核红细胞通道散点图该仪器在红细胞和血小板的计数和分析上仍然沿用了经典的电阻抗方法,在血红蛋白测定上采用了无剧毒物质的SLS溶血剂比色法。很多时候,大家都会使用仪器,但是很少有人会仔细研究仪器。掌握散点图,有助于大家掌握更多的血液信息,比如异淋,传单,血小板体积,幼稚细胞等等。希望这些材料对大家的工作有所帮助。

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