[相容性试验]血液相容性试验方案

《[相容性试验]血液相容性试验方案》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、[相容性试验]90血液相容性试验方案导读：就爱阅读网友为大家分享了多篇关于“[相容性试验]90血液相容性试验方案”资料，内容精辟独到，非常感谢网友的分享，希望从中能找到对您有所帮助的内容。相关资料一:90血液相容性试验方案HPA25树脂血液相溶性试验方案1．试验目的通过溶血试验，凝血试验以及血小板黏附试验考察HPA25树脂的血液相容性，并与用包膜后的HPA25的树脂比较，考察包膜对生物相容性的影响。2.试验依据根据GB/T16886.4：2003/ISO10993-4:2002：医疗器械生物学评价，第四

2、部分：15与血液相互作用试验选择，为基础进行试验。3．试验项目3.1溶血试验3.1.1试验原理：检验样品、阴性对照品和阳性对照品与新鲜的稀释后兔子抗凝血接触，通过岛津紫外可见分光光度计来测定在545nm波长的吸光率。检验样品的溶血程度可根据下式计算：溶血程度（%）=（X1-X3）／(X2-X3)×100%其中X1为试样的吸光度，X2为阳性对照品吸光度，X3为阴性对照品吸光度。在此项研究的条件下，检验样品的溶血程度不得大于5%，阴性对照品和阳性对照品如预期表现。3.1.2具体试验步骤：(1)按照0.2g:

3、5ml比率[检验样品的重量比0.9%的氯化钠溶液]阴性对照品：0.9%的氯化钠溶液阳性对照品：蒸馏水(2)8ml新鲜的兔子血液加入0.4ml20g/L的草酸钾试剂，外加10ml0.9%的氯化钠溶液。(3)实验过程：将第一份2根试管中各加入0.2g包膜HPA25，然后再分别加入5ml容量0.9%的氯化钠溶液，将第二份2根试管中各加入0.2g未包膜HPA25，然后再分别加入5ml容量0.9%的氯化钠溶液；将第三份2根试管中分别加入5.2ml氯化钠溶液，15用于阴性对照品。第四份2根试管中分别加入5.2ml蒸

4、馏水，用于阳性对照品。把所有试管放入37℃的水浴中30分钟。30分钟后，在所有试管中加入2ml新鲜的稀释后兔子抗凝血后，慢慢将其混合，并再次将所有试管放入37℃的水浴中60分钟。将所有试管内的溶液分别移到离心管内。所有试管进行离心800r×5分钟，将上清液测定在545nm波长下的吸光度，计算平均值，根据公式计算溶血程度。3.2凝血试验3.2.1凝血四项凝血四项包括凝血酶原时间，凝血酶原时间、凝血酶原时间和凝血酶原时间。样本：1.8ml静脉血+0.2ml109mmol/L枸橼酸钠，颠倒5～8次充分混匀，分

5、别缓慢加入0.2g包膜及未包膜HPA25树脂（各三份），轻轻混匀，4-8℃放置30分钟，3000r/min×10min分离血浆，冰浴下保存送检，未加树脂的血浆样品做对照。3.2.2动态凝血试验（1）ACD全血制备ACD保养液配方：每100ml中含枸橼酸钠1.33g，枸橼酸0.47g，葡萄糖3g。每10ml全血中加入ACD保养液2.5ml，可保存3～4周。(2)15动态凝血试验[1]：将0.25g树脂置于小三角瓶底部的中心，烧杯在37℃下恒温5min后，用针筒向树脂中心注入2.5mLACD全血，恒温5mi

6、n后，向血液中注入2.5mL氯化钙(浓度为0.2mol/L)水溶液，开始计时。摇晃小烧杯1min，使氯化钙与血液混合均匀，盖好烧杯再恒温5min，取出烧杯加入50mL生理盐水，摇晃烧杯10min，取上层清液，用分光光度计测定血水在540nm处的相对吸光度。以2.5mL全血与50mL生理盐水混合液相对吸光度为100，作为参考值。每个试样品做3次平行试验，取平均值。材料的凝血指数(bloodclottingindex，BCI)可由下；式求出：式中Is为血液与氯化钙的混合液与样品接触一定时间后，血液的相对吸光

7、度；Iw为血液与一定量的生理盐水混合后的相对吸光度。参考文献：1．TUX，HUX，LIX，etal.Syntheticstudiesonthecompatiblebiomaterials[J]。JFunctionalPolymer(Chinese),1995,8(2):209-212。（3）试验结果记录3.3血小板粘附1.取静脉血4.5ml，置于含109mmol/L枸橼酸钠溶液0.5ml的试管中，混匀。2.15立即用微量加样器取抗凝血1.5ml放入已加0.15g包膜HPA25树脂（或未包膜HPA25树脂

8、，各3份）的球形玻璃瓶中，以3r/min速度转动球形玻璃瓶15min，未加树脂的抗凝血按相同方法做对照。3.分别取接触树脂前后抗凝血各1ml，置2个大试管中，均加入19ml109mmol/L枸橼酸钠溶液，颠倒混匀三次后静置2小时，取上清夜送检（血小板计数）。计算血小板黏附率：接触前血小板数－接触后血小板数血小板黏附率（%）=———————————————×100%接触前血小板数4．结果评价4.1溶血：溶血率应不大于5%，并与包膜后的HPA进