浅析基质细胞衍生因子在哮喘小鼠气道中的表达

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1、浅析基质细胞衍生因子在哮喘小鼠气道中的表达【摘要】目的观察基质细胞衍生因子-1(stromal-derivedfactor-1,SDF-1)在鸡卵清蛋白(OVA)诱导小鼠哮喘模型中的表达，探索哮喘气道重塑的发生机制。方法40只雌性SPF级C57BL/6小鼠，体重18～22g，随机分为哮喘组和对照组。按照文献方法建立OVA小鼠哮喘模型。两组动物于末次雾化结束后24h处死，取肺组织行病理切片，苏木精-伊红染色(HE)观察肺脏的组织病理学变化;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Westernblot)、免疫组织化学(immunohistochemistry,IH)技术检测肺

2、组织SDF-1的表达。结果①哮喘组支气管上皮细胞脱落、气道壁增厚，细支气管和血管周围有大量炎细胞浸润;②哮喘组肺组织SDF-1在RT-PCR、Westernblot及IH中均为阳性表达，而对照组则否。结论小鼠哮喘时肺组织分泌大量细胞趋化因子SDF-1，可能是哮喘气道重塑的重要因素之一。【关键词】基质细胞衍生因子;哮喘;气道重塑ABSTRACT:ObjectiveTostudytheexpressionofstromal-derivedfactor-1(SDF-1)intheairwayofmicewithallergicasthmainducedbyovalbumin(OVA)soa

3、stoexplorethemechanismofasthmaticairwayfemaleC57BL/miceofSPFgradewererandomlydividedintoasthmagroupandcontrolgroupwith0ineach.Miceweresensitizedandchallengedwithovalbumintoestablishtheasthmaticmodel.Allthemicewerekilledhoursafterthelastaerosolisation.Theparaffinembeddedsectionsoflungtissueswere

4、stainedwithhematoxylinandeosin(HE)foranalyzingpathologicalchanges.SDF-1mRNAextractedfromlungtissueswasassessedbyRT-PCRwhileSDF-1protEinextractedfromlungtissueswasassessedbyWesternblotandimmunohistochemistry(IH).Results①Afterrepeatedallergenchallenge,obviousinfiltrationofinflammatorycellsandprol

5、iferationofgobletcellsandsmoothmusclesappearedinmousebronchi.②AccordingtoRT-PCRandWesternblotandIHresults,theexpressionofSDF-1waspositiveinasthmagroupbutnegativeincontrollargeamountofSDF-1issecretedinthelungtissuesinasthmaticmice,whichmaybeoneofthecriticalfactorsinasthmaticairwayremodeling.KEYW

6、ORDS:stromal-derivedfactor-1;asthma;airwayremodeling支气管哮喘是一种慢性气道炎症，伴有气道高反应性和气道重塑，而气道重塑则是一个在慢性炎症基础上的异常损伤修复过程。基质细胞衍生因子-1(stromal-derivedfactor-1,SDF-1)是由基质细胞产生的一种CXC型趋化因子。近年来研究表明，基质细胞衍生因子对组织或器官的创伤、炎症损伤修复起到了重要的作用。但是，SDF-1与哮喘相关性的研究目前还未见报道，我们就此进行了探讨。　1材料与方法药品与试剂鸡卵清蛋白(OVA)Ⅴ级(美国GBICO公司);氢氧化铝干粉(郑州派尼化学试

7、剂公司);PBS(美国GBICO公司);SDF-1兔抗小鼠一抗(武汉博士德生物有限公司);过氧化物酶标记羊抗兔二抗(美国DAKO公司);ECL发光液(北京碧云天公司);兔抗小鼠内参β-actin(北京博奥森公司);免疫组织化学试剂盒(美国DAKO公司)。方法哮喘模型的制备小鼠哮喘模型实验参考文献[1]，略有变动。实验动物为40只雌性SPF级C57BL/6小鼠(第四军医大学动物中心提供)，体重18～22g，随机分为哮喘组和对照组。按照文献方法[1]构建哮喘模