灵芝多糖对小鼠体液免疫功能的影响

《灵芝多糖对小鼠体液免疫功能的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、维普资讯http://www.cqvip.com第24卷第2期暨南大学学报(医学版)V01．24No．22oo3年4月JournalofJinanUniversity(MedicineEdidon)Apr．2003灵芝多糖对小鼠体液免疫功能的影响江振友，林晨，刘小澄，韦静，袁桂秀，李小兰(暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室，广东广州510632)[摘要]目的：研究灵芝多糖(GLB7)对小鼠特异性体液免疫功能调节的影响。方法：实验小鼠分成4组，分别经胃灌注不同剂量灵芝多糖，每天1次，连续14d，对照组小鼠用等量蒸

2、馏水代替。在实验第1O、24d用羊红细胞(SRBC)免疫小鼠，分别于免疫后第5d进行抗体生成细胞(AFC)检测和血清抗SRBC抗体凝集效价测定。结果：灵芝多糖喂药后2周，高、中、低3个剂量组小鼠抗体生成细胞以及高剂量组小鼠血清溶血素(抗体积数)与对照组比较均有显著性差异(P<0．01；P<0．05)；喂药后4周，高、中、低3个剂量组小鼠抗体生成细胞以及小鼠血清溶血素(抗体积数)与对照组比较均无显著性差异(P>0．05)。结论：灵芝多糖能提高小鼠的B细胞产生特异性抗体的能力。[关键词]灵芝；体液免疫功能；灵芝多糖；

3、抗体生成细胞[中图分类号]R979．5[文献标识码]B[文章编号]1000—9965(2003)02—0051—03现代药理研究发现，灵芝含有1O余种氨基酸、2o多种酶、多种蛋白质、有机酸、糖类及多种微量元素，具有多种生理、药理作用。灵芝多糖(ganodermalucidumpolysacchrides)系灵芝[C．anodermahz／dzun(Leyss．E)【Fr．)Ka瞰]的主要有效成分。灵芝多糖具有免疫增强和抗肿瘤作用[1,2]。本研究旨在整体条件下观察灵芝多糖(GLBT)X~NIH小鼠产生抗一羊红细胞

4、(SrtSC)抗体能力的影响，以探讨灵芝多糖对小鼠体液免疫功能的调节作用，为灵芝的滋补强壮、扶正固本作用提供免疫学实验依据。l材料与方法1．1主要药品试剂、仪器化学灵芝多糖GLB7，按文献[3，4]方法提取，化学组成是以葡萄糖、半乳糖为主的杂多糖，糖苷键连接方式以(1—4)为主，稍多(1—6)，相对分子质量9000；RPMI1640细胞培养液为Hyclone产品，小牛血清为Gibco公司产品。721分光光度计、离心机、恒温水浴箱、SRBC、补体(豚鼠血清)、SA缓冲液。1．2实验动物NIH小鼠，雌雄随机，每只(2

5、0±2)g，广东省医学实验动物中心提供。1．3实验方法(1)分组与处理小鼠随机分为4组，每组3O只。即正常对照组(CK)、灵芝多糖高剂量组(HD)、中剂量组(MD)和低剂量组(LD)；用蒸馏水溶解稀释灵芝多糖(受试物)，每组小鼠均灌胃0．5mL／只。高、中、低剂量组小鼠灌胃灵芝多糖剂量分别为2．15、O．65、O．22me,／只；CK组同时以蒸馏水灌胃O．5mlZ只。每日1次，连续2周，于15d每组取2o只小鼠进行免疫功能调节作用测试，其余1O只动物于第15d起停止给予受试物，正常喂养至第28d进行免疫功能测试。

6、(2)抗体生成细胞(antibodyformingcell，AFC)检测(定量溶血分光光度测定法，QHS)新鲜羊血用生理盐水洗涤3次，每次离心(2000r／min)10min，将压积SRBC用生理盐水配成体积分数为2％的细胞悬液，在实验第1O、24d分别用SRBC免疫小鼠，每只鼠腹腔注射0．2mLSRBC进行免疫。将SRBC免疫4—5d后的小鼠颈椎脱臼处死取出脾脏，置Hanks液的小平皿内，制成细胞悬液，经200目筛网过滤，离心1000r／fnin1Ofnin，用[收稿日期]2OO2—09—04[作者简介]江振友

7、(1963一)，男，安徽舒城人，副教授维普资讯http://www.cqvip.com52暨南大学学报(医学版)2003正Hanks液洗2遍，最后将细胞悬浮在5mLRPMU640培养液中，计数细胞，并将细胞密度调整为5×106／mL。将脾细胞1mL置试管内，依次加入体积分数为10％SRBC0．5mL，补体1mL(用sA液按1：10稀释)。另设不加细胞的对照管(以sA液代替)。置37℃恒温水浴中保温30min后，冰浴终止反应。2000r／rnin离心10min。取上清液于721分光光度计波长413Rill处，分别测

8、定各管吸光度A值。采用单因素方差分析比较各试验组与对照组的差异。(3)血清溶血素的测定(血凝法)新鲜羊血用生理盐水洗涤3次，每次离心2000r／rnin10min。将压积SRBC用生理盐水配成体积分数为2％的细胞悬液，在实验第10、24d分别用SRBC免疫小鼠，每只鼠腹腔注射0．2mL进行免疫。免疫后4～5d后，摘除眼球取血于离心管内，放置约1h，将凝固血与管壁剥离，使血