黄芪治疗消渴病糖尿病的药证文献与有效成分研究

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1、南京中医药大学博士学位论文黄芪治疗消渴病（糖尿病）的药证文献与有效成分研究姓名：高美风申请学位级别：博士专业：中医医史文献指导教师：沈澍农20080501。黄芪治疗消渴病(糖尿病)的药证文献与有效成分研究摘要文章从文献研究、文献统计分析、有效成分分离、药效学验证四个方面探求黄芪治疗消渴病的用药规律及有效成分，进行了中药文献分析和现代实验研究结合的初步尝试，得到了系统的有关黄芪治疗消渴病(糖尿病)的研究资料，为推进黄芪降糖新药单体及复方的研发提供了理论依据，为中医文献的研究提供了新的思路。第一章，运用文献学的方法，收集整理古代文献，对历代医家关于消渴病及黄

2、芪治疗消渴病的论述进行了全面总结和回顾。从文字学和文献学角度进行了消渴及相关病名的释义；从学术史发展的角度对消渴的病因进行了总结；对各个时代有特色的消渴证治进行了总结与汇总；分析了黄芪的药性功效，整理了古医籍中黄芪治疗消渴类方的资料，即晋唐时黄芪多以治消渴虚劳小便数症属下消者，如参芪汤方；宋时黄芪治消渴的范围扩大至三消皆治，同时注重了用黄芪对消渴并发痈疽的治疗；金元时则以朱丹溪的滋阴降火治则对黄芪组方影响最大，如地黄饮子，清心莲子饮等；明清时代的竹叶黄芪汤方，为治消渴气阴两虚的传统方剂；近代张锡纯的滋脾饮方，以黄芪配山药、葛根生津止渴；现代医家则多以黄芪

3、、山药、人参、生地等配伍．同时分析了黄芪治疗消渴兼证的情况，在消渴兼痈疽，兼中风，兼肾病，兼阳痿等方面黄芪都有很好的应用。最后，探讨了黄芪的炮制方法及生用、炙用对其功效的影响。从整体上认识了消渴病的发展规律及黄芪在其中的重要地位，为以后的研究奠定了文献基础。第二章，建立了黄芪治疗消渴病方药数据库，利用Excel和SPSS统计软件对其进行频数、因子、聚类等数理统计，分析黄芪治疗消渴病的证治规律和特点。黄芪治疗消渴病的组方中，补虚药为黄芪治疗消渴的主要配伍药物，其次是清热药，同时注重利水渗湿，安神收敛药物的配伍；补虚药中，以人参、甘草为代表的补气药为主；清热

4、药中清热泻火药使用频次最多，但高频清热药物是清虚热的地骨皮；统计表明，宋代医家在治疗消渴时较多的应用黄芪；黄芪的用量在唐时最大，元时最低，至明清则又渐增；黄芪治疗消渴类方中，剂型随症而变，汤剂、丸剂、散剂均占据了较大的比重，煎服方法，丰富多变；方剂主治以三消和肾元亏虚的下消为主；兼症的治疗方面，消渴兼虚劳，渴兼痈，渴兼小便不利为主要治疗方面；方剂名称中，以黄芪命名的方剂占了绝对优势；在组方配伍时，更注重’肾经药物的选用，注重循经导药的作用，同时肝经的药物也多有选用；在配伍药物的性味上以甘味为主，取其甘补之效。因子分析表明，黄芪治疗消渴类方中，益气养阴药为

5、主因子。快速聚类分析表明其相关连VII配伍药为人参，茯苓，甘草，益气养阴，淡渗利湿，治以脾肾俱损，气阴两虚，小便白浊如膏之消渴日久为主症。统计中发现许多至今已不常用之中药，如土瓜根，羊肾，桑螵蛸等，一些药物的特殊用法如生地黄绞汁服用等也值得进一步研究．第三章对黄芪治疗消渴病(糖尿病)的有效成分进行了分离纯化与结构确证．在文献综述的基础上确定了以黄芪多糖与黄芪皂甙两种成分为研究对象．确定黄芪多糖的最优化提取工艺为12倍量的蒸馏水浸泡，100。C沸水浴煮沸2h；加入无水乙醇至浓度70％，离心取沉淀，得黄芪粗多糖；用732树脂静态吸附除蛋白，二次醇沉，上DEA

6、ESepharoseFastFlow离子交换柱和ToyopearHw-75分子筛柱进行层析，得黄芪多糖，定量分析方法为以葡聚糖为标准品的硫酸蒽酮法较好。运用糖组成分析、红外、紫外、气相及高效液相色谱等方法研究多糖的理化性质及结构，证实该多糖为分子量约38万道尔顿的中性多糖，分析表明其可能是一种新的黄芪多糖，其性质易溶于水，不溶于高浓度的乙醇，丙酮等有机溶剂，与碘试剂反应不显蓝色，不含硫酸基团，非酸性多糖，不舍蛋白质、核酸组分，也不舍酚类色素；水解后单糖是葡萄糖；红外分析说明所得的黄芪多糖为0【一葡聚糖．并得到黄芪皂甙的最佳提取工艺为，提取黄芪多糖后的醇沉

7、上清液，减压浓缩至干，过AB-8树脂柱，收集富皂甙部分，减压浓缩后真空干燥，得棕黄色黄芪皂甙，提取过程中以黄芪甲甙为对照品进行了定量测定。该提取方法的优点是可以同时提取到多糖和皂甙两种有效成分，同时减少了有机溶剂的使用。第四章对提取的黄芪有效成分进行了药效学验证．对黄芪多糖作了四氧嘧啶小鼠(I型糖尿病模型)与kkay鼠(Ⅱ型糖尿病模型)的降糖效果验证。黄芪皂甙则作了体外(Ot一糖苷酶抑制作用)与体内药效学(四氧嘧啶模型小鼠)验证。结果表明黄芪多糖对正常小鼠的血糖水平无影响，对四氧嘧啶诱发高血糖有一定的预防作用，400mg／kg剂量组对四氧嘧啶模型小鼠有较

8、好的降糖效果，有较好的抗氧化作用，对血脂的升高有较好的控制效果，能较好的控制四氧