灵芝中灵芝多糖的含量测定研究

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1、维普资讯http://www.cqvip.com第31卷第1O期中国中药杂志Vo1．31，Issue102OO6年5月ChinaJournalofC]l~etieMateriaMedieaMay，2006灵芝中灵芝多糖的含量测定研究戚雁飞(浙江省药品检验所，浙江杭州310004)灵芝为多孔菌科真菌赤芝C,anodermaluc／dum2．3标准曲线的绘制精密称取105℃干燥至恒(Leyss．exFr．)Ka瑙t．或紫芝C,anodermasinenseZhao．重的葡萄糖对照品适量，加水制成每lmL含0．1nagXuetZhang的干燥子实体。其化学成分复杂，目前的

2、溶液，作为对照品溶液。分别精密吸取对照品溶已知主要含有多糖(肽)类、三萜类、核苷类等⋯1。灵液0．2，0．4，0．6，0．8，1．0，1．2mL置10mL具塞试管芝多糖类具有抗肿瘤作用、免疫调节作用、降血糖、中，加水至2．0mL，精密加入硫酸蒽酮溶液(精密称降血脂、抗氧化和抗衰老等作用，被认为是灵芝扶正取蒽酮0．1g，加80％的硫酸溶液100mL使溶解，即固本的重要有效成分2。本研究建立了灵芝多糖的得)6mL，摇匀，置沸水浴中加热15min，取出，放人含量测定方法。本实验采用分光光度法，以葡萄糖冰浴中冷却，以相应的试剂为空白，在625砌的波为对照品，经硫酸葸酮显色后

3、测定其吸收度。通过长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，含量为横坐方法学验证，重复性良好，经药典会审批，本方法已标，绘制标准曲线。其回归方程为：Y=2．7248X+被收入《中国药典)2005年版一部灵芝项下。0．0011，R=0．9993。1仪器与试药2．4测定方法精密量取灵芝提取液2mL，置l0岛津UV一260分光光度计；蒽酮、硫酸、乙醇等mL具塞试管，照标准曲线制备项下的方法，自“精密试剂均为分析纯。葡萄糖对照品由中国药品生物制加入硫酸蒽酮溶液6mL”起同法操作，测定吸收度。品检定所提供。灵芝样品共8批，分别来自浙江42．5显色稳定性取同一灵芝的提取液，按上述测批、

4、广西2批、四JII、福建各l批，经浙江省药品检验定法显色后，每隔一定时间测定吸收度，结果表明在所郭增喜副主任中药师鉴定。l1h内稳定。2方法与结果2．6显色重复性取同一灵芝的提取液，按上述方2．1灵芝多糖的提取取药材粉末2g，精密称定，法分别显色6份，测定吸收度，RSD1．2％。置索氏提取器中，加水9omL，加热回流提取至提取2．7重复性实验取同一批样品，按前文所述方法液无色，将提取液转移至100mL量瓶中，加水稀释分别提取6份，显色后测定多糖含量，结果多糖的平至刻度，摇匀，精密吸取l0mL，加入乙醇150mL，摇均含量为0．78％，RSD2．3％(=6)。匀，4℃

5、放置12h，取出，离心，弃去上清液，沉淀加2．8样品测定结果见表l。水溶解并定量转移至50mL量瓶中，用水稀释至刻表1灵芝多糖含量度，摇匀。2．2条件的选择2．2．1最大吸收波长的选择分别取经硫酸蒽酮显色后的无水葡萄糖对照品液和灵芝供试品液，于400～700nln扫描，结果对照品液和供试品液均在625nln处有最大吸收。故选择625nln为测定波长。2．2．2另对加入硫酸蒽酮的量和反应时间进行了3结果与讨论比较，显示此二者对结果影响不大，最终选择加入63．1灵芝多糖的提取曾比较了沸水浴回流和索氏mL，反应l5IIlin。提取，经醇沉后，回流提取的多糖沉淀极少，故选择

6、[收稿日期]2006-01—25索氏提取至提取液无色以使多糖提取完全。此外还[通讯作者】戚雁飞。Tel：(0571)86462075对醇沉时不同的乙醇含量进行了考察，结果显示乙·852·维普资讯http://www.cqvip.com第3l卷第l0期中国中药杂志Vn1．31．Issuel02006年5月ChinajournalofChMateriaMedicaMay，2006醇含量达到95％时多糖沉淀最多，乙醇含量为9o％芝和紫芝的性状无必然的联系，而多糖的含量较为时沉淀的多糖与之接近(偏差小于2．O％)，为节省接近，故认为采用灵芝多糖作为含量测定的指标，用溶剂，选

7、择后者。本方法因无多糖对照品而以葡萄于灵芝的质量控制更为合理。糖为对照品。多糖提取采用水提醇沉方法，葡萄糖[参考文献]用乙醇无法使其沉淀，故未进行回收率考察。[1]邓海林，吴佩颖，王建新．灵芝的研究进展．时珍国医国药．2005，16(o2)：141．3．2灵芝中的三萜类成分因未找到合适的灵芝酸[2]单卫华．灵芝菌发酵液制剂中灵芝多糖及总糖含量测定．时对照品，未测定其含量。核苷类是有广泛活性的一珍国医国药。2OOO，11(9)：797．类水溶性成分【3j，故又测定了核苷类中腺苷和尿苷[3]肖培根．新编中药志．第三卷．北京：化学工业出版社．的含量，结果表明其含量在各