近年白芨组织培养的研究进展

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1、近年白芨组织培养的研究进展娜，程磊，刘耀武，郭伟娜陈(亳州职业技术学院药学院，安徽亳州236800)摘要:白芨组织培养研究是近年白芨研究的一个热点。综述了白芨外植体、植物生长调节剂和添加剂的使用、生根炼苗、移栽等技术的研究概况，总结了常用的外植体类型及适宜的植物生长调节剂与添加剂类型，在此基础上，对白芨组织培养研究的前景进行了展望。关键词:白芨;组织培养;外植体中图分类号:Q943文献标识码:A文章编号:2095－3488(2014)04－0034－03料，张燕［5］以白芨种子为培养材料，对白芨种子无菌非共生萌发过程中原球茎发育进行了研究，结果表白芨(Bletillastriata)

2、为兰科白芨属多年生草本植物，也叫“白及”，别名冰球子、地螺丝和连及草等。其干燥块茎，具有收敛止血、消肿生肌等功效，常用于治疗咯血、吐血、疮疡肿毒、皮肤皲裂等。［1］已有研究表明白芨具有抗菌和抗肿瘤的作用。［2］白芨不仅用于中医临床，也广泛应用于日化产品，如化妆品、高级陶瓷制造、纺织、橡胶生产等。随着白芨应用的不断拓展，其需求量不断增加。然而，由于其种子发育不完全，在自然条件下很难正常萌发，主要靠块茎繁殖，繁殖系数有限，因而白芨的产量很难满足产业的需求，致使其价格连年攀升。［3］为此，无菌快繁就成为繁殖白芨的一条有效且重要的途径。近年来，白芨组培研究的报道显著增多，主要集中在种质资源的

3、研究和种苗的繁育方面。［4］现就近年来白芨组织培养的相关研究进展进行综述，并对今后的研究方向提出建议，旨在为白芨的快繁研究、工厂化育苗及炼苗移栽提供一定的参考。1外植体选择的研究根据植物细胞全能性的原理，适宜的条件下，每个植物细胞都具有发育成完整植株的能力。根据实验的目的和要求不同，研究者在进行白芨组织培养时分别选用了种子、侧芽和幼根做外植体，最终均建立了无菌体系。［5－10，12－14］明:种子萌发的最适培养基为1/2MS+1．0mg/LNAA。袁宁［6］等用白芨种子无菌播种研究表明:种子成熟度对种子的萌发影响较大，促进种子萌发的培养基为1/2MS+1．0mg/L6－BA。叶静［7

4、］的研究结果表明:1/2MS+1．0mg/L6－BA+1%活性炭最适合白芨种子萌发。根据上述报道，尽管很多研究在种子萌发过程中采用的激素种类和浓度有差异，但最终采用1/2MS为基本培养基都获得了丛芽，形成了幼苗。由此可见，激素对白芨种子的萌发影响不大，这与郭顺星［8］的研究结果一致:白芨胚的薄壁细胞贮存大量的蛋白质、油脂和碳水化合物，可作为种子萌发的营养成分。影响种子萌发的最主要因素是种子的成熟度和种子萌发时的湿度。因此，种子萌发时，采用1/2MS为基本培养基，6－BA控制在1．0mg/L以内，可以获得丛生芽，而NAA控制在1．0mg/L以内，适当调整其比例，最终可形成正常试管苗。但

5、张燕［5］提出低浓度的细胞分裂素与NAA组合会严重抑制种子的萌发，导致萌发率下降;而袁宁［6］的研究表明种子成熟度较高时，萌发率基本不受外源激素的影响，这与张燕的实验结果相悖，有待于进一步研究论证。1．11．2侧芽、幼根、叶片作外植体的无菌培养从文献看，茎尖是最早也是使用频率最高的兰种子的无菌萌发研究大多数的实验研究采用种子作为初代培养材收稿日期:2014－04－10作者简介:陈娜(1986—)，女，安徽淮北人，毫州职业技术学院讲师，主要研究方向:药用植物栽培与发育。基金项目:中央财政支持中药专业发展项目子课题“白及高效再生体系的优化研究”(BYZ1211)。·34·花外植体，由于茎

6、尖数量有限，以侧芽做外植体的应用相当广泛。［9，10］茎尖作为外植体较适合于复茎性兰花，如石斛兰、大花蕙兰、文心兰等，但对于一些单茎性兰花，用茎尖作为外植体，则有可能丧失母株，人们更倾向于用侧芽做外植体。而且在此过程中，还可以避免实生苗在培养过程中容易产生变异的缺点［11］;其次，在选择材料时可以有效地剔除病株和变异株，并且侧芽恢复生长快，形成丛生芽需要的时间比较短。石云平［12］等以白芨侧芽为外植体继代培养后得到了丛芽，摸索了侧芽灭菌的方法，得出:用0．2%升汞消毒灭菌8min的效果较好，同时还得出侧芽是白芨进行组织培养的适宜外植体。田英翠［13］以白芨幼根为材料，添加不同浓度水平

7、的生长调节剂成功诱导出原球茎并进行分化培养。利用叶片作为外植体诱导形成愈伤组织，再分化形成丛芽，是植物快繁的另一途径。但是，这种途径形成的幼苗变异率较高，更多地是应用于植物育种。刘军凯［14］选用9月份的白芨叶作为外植体，进行愈伤组织的诱导，结果表明幼叶上无法诱导出愈伤组织。这与石云平［12］的研究结果一致:叶片诱导愈伤组织较困难，诱导率只有3．3%。因此，叶片不适合作为愈伤组织诱导的外植体。［15］活性炭等。不同的培养目的需要不同的添加剂，而不同的添加剂