survivin蛋白及其mrna在子痫前期患者胎盘中的表达

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1、survivin蛋白及其mRNA在子痫前期患者胎盘中的表达：李雪兰，李春芳，王少丽，苟文丽【摘要】目的探讨survivin蛋白及其mRNA的表达与子痫前期的关系。方法采用免疫组化SP法和实时荧光定量PCR(FQPCR)技术，检测20例轻度子痫前期、25例重度子痫前期和20例正常晚孕妇女胎盘组织中survivin蛋白及其mRNA的表达情况。结果survivin蛋白主要位于绒毛小叶的合体滋养细胞及细胞滋养细胞，在子痫前期胎盘中的表达较正常晚孕妇女明显降低，且重度子痫前期的表达明显低于轻度;survivinm

2、RNA在子痫前期胎盘中的表达也明显低于正常晚孕，重度明显低于轻度。结论胎盘组织中survivin蛋白及其mRNA的异常表达可能在子痫前期的发生中起着重要的作用。【关键词】子痫前期;胎盘;survivin　　ABSTRACT:ObjectiveTodetecttheexpressionsofsurvivinproteinandsurvivinmRNAinplacentaofenpsiaandnormalpregnancy.MethodsTheexpressionsofsurvivinproteinandsu

3、rvivinmRNAcollectedfromplacentaof45preeclampsiapatients(20casesofmildpreeclampsiaand25casesofseverepreeclampsia)and20normalpregnanteninedbyimmunohistochemistry.Theimageanalysistechniqueployedtoanalyzesurvivinprotein.RealtimeFQPCRRNA.Resultssurvivinpr

4、oteinostlyinsyncytiotrophoblastsandcytotrophoblasts,anditpsiathanthatinnormalplacenta,andsignificantlylopsiathaninmildpreeclampsia.survivinmRNApsiathaninnormalplacentaandsignificantlylopsiathaninmildpreeclampsia.ConclusionTheabnormalexpressionsofsurvivi

5、nproteinandmRNAinplacentaltissuesmayplayanimportantroleinthepathogenesisofpreeclampsia.　　KEYoticMed6.0数码医学图像分析系统(A)进行灰度分析(细胞平均灰度值愈小，蛋白表达愈高)。　　1.3FQPCR法检测survivinmRNA的表达　　1.3.1RTqPCR试剂RealtimePCR试剂盒及反转录试剂盒(Tany)，引物设计与合成(大连宝生物工程有限公司)。survivin引物序列：正向：5′T

6、TCTCAAGGACCACCGCATC3′，　　反向：5′GCCAAGTCTGGCTCGTTCTC3′。　　1.3.2RealtimePCR反应按AmpliQ，Cat.No.260802，Germany试剂盒要求依次加入SYBRGreenqPCRSuperMix12.5μL、Forer　　1μL、Reverseprimer1μL、cDNA1μL、DEPCtreatedin1个循环;PCR反应：95℃30s，58～60℃1min，72℃30s共40～45个循环。测定各样本PCR反应液的溶解曲线，鉴

7、定PCR产物的特异性。数据应用仪器自带软件ABIPrism7300SDSSoftRNA相对表达量计算公式，βactin作为内参照基因。按照下列公式计算样本中目的基因mRNA的相对表达量：△CT(目的基因)=目的基因CT-内对照基因CT，△△CT=△CT(目的基因)-△CT(标准值)，目的基因的相对总量为2-△△CT。　　1.4统计学处理采用SPSS13.0软件包进行统计分析。计量资料以±s表示，统计学分析采用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。　　图1正常晚孕者(A)及子痫前期(B)胎盘组织

8、中survivin蛋白的表达　　Fig.1Expressionofsurvivinproteinofplacentainnormallatepregnancy(A)andpreeclampsia(B)(SP,×400)　　2.2survivinmRNA的表达情况子痫前期胎盘组织中survivinmRNA的表达明显低于正常晚孕组，且重度子痫前期者明显低于轻度者，差异有统计学意义(P<0.05，表1)。表1正常晚孕者与子痫