机油降解菌的分离、鉴定及高效降解菌降解特性的初步研究

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1、分类号：Ｑ９３９．９单位代码：１０７２０：１５０７１００５０２密级：公开学号ＳｈａａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．硕士学位论文机油降解菌的分离、鉴定及高效降解菌降解特性的初步研究Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆ－ｒｅｍｎａｒｏｉｌｄｅｒａｄｉｎｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｌｉｉｇｇｐｙｓｔｕｄｏｎｔｈｅｄｅｒａｄａｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｙｇｈｉｈｌｅｆｆｉｃｉｅｎｔｄｅｒａｄａｔｉ

2、ｏｎｂａｃｔｅｒｉａｇｙｇ论文作者：黄曼曼指导教师、职称：邓百万教授学科、专业名称：微生物学研究方向：微生物资源保育及开发利用二〇一八年五月分类号：Q939.9单位代码：10720密级：公开学号：1507100502硕士学位论文机油降解菌的分离、鉴定及高效降解菌降解特性的初步研究Isolationandidentificationofoil-degradingbacteriaandpreliminarystudyonthedegradationcharacteristicsof

3、highlyefficientdegradationbacteria论文作者：黄曼曼指导教师、职称：邓百万教授学科、专业名称：微生物学研究方向：微生物资源保育及开发利用二〇一八年五月摘要近年来，随着石油开采及石油工业的发展，石油污染问题日趋严重，而机油作为石油非常重要的一个馏分，在机械制造、维修等行业被广泛应用，产生的大量含油废水不仅污染环境，同时也给人类及其他生物带来很大的危害。分离、驯化高效机油降解菌成为机油污染环境生物修复的一个重要研究方向。本研究通过采集长期受各种机油类物质污染的汉中某工具厂污水处

4、理车间内部活性污泥，利用初筛和复筛的实验方法，筛选出多株机油高效降解菌株，并对机油高效降解菌株进行了降解特性的研究。具体研究结果如下：（1）从机油污染环境中经分离、筛选得到36株可降解机油的菌种，分别为JZ2~JZ4，JZ6~JZ15，JZ17~JZ18，JZ21~JZ24，JZ26~JZ28，JZ30，JZ32，JZ34，JZ36~JZ37，JZ39，JZ41，JZ43~JZ45，JZ47~JZ49，JZ50。从菌落形态学观察、菌体形态观察、革兰氏染色、生理生化测试以及16SrRNA序列分析等方法，对所

5、得的36株机油降解菌株进行鉴定，鉴定结果36株机油降解菌株属于Dyadobacter、Massilia、Arthrobacter（节细菌属）、Acidovorax（食酸菌属）、Pseudomonas（假单胞菌属）、Ochrobactrum（苍白杆菌属）、Hydrogenophaga（氢噬胞菌属）、Perlucidibaca、Rhodobacter（红杆菌属）、Stenotrophomonas（嗜麦芽窄食单胞菌）、Sphingobacterium（鞘氨醇杆菌属）、Paracoccus（副球菌属）、Catel

6、libacterium和Shinellazoogloeoides各菌属。（2）利用紫外分光光度法测定初步筛选出的36株机油降解菌的机油降解率，筛选出了JZ6，JZ18，JZ41和JZ50四株高效机油降解菌，在培养温度为30℃，含终浓度为机油1g/L的原油培养基中培养7d后，4株菌株JZ6，JZ18，JZ41和JZ50的机油降解率分别为42.16%，33.94%，33.75%和41.89%。（3）研究了不同培养时间、pH、温度、原油初始浓度、辅助碳源和辅助氮源6个因素对4株高效机油降解菌降解率的影响。结果表

7、明，在最佳条件下，JZ6的最高降解率为60.63%，JZ18的最高降解率为53.28%，JZ41的最高降解率为52.19%，JZ50的最高降解率为56.34%。对筛选出的4株机油降解菌进行随机组合组建复合菌群，由菌株JZ6、JZ18、JZ41和JZ50组合形成的复合菌群K机油i降解率达到最高，为66.87%。将4株菌株在含单一组分十二烷、十六烷、十八烷、二十二烷、苯、萘、芘和菲的不同石油烃组分中培养，观察生长特性，结果表明4株菌株均能以十二烷，十六烷，十八烷，苯和萘为唯一碳源生长，JZ6和JZ50还能在含

8、芘和菲的培养基中生长。GC-MS分析机油残油组分，发现原油主要组分为直链烷烃，其次为支链烷烃、环烷烃，以及一定量的芳香烃和非烃类物质，菌株JZ6、JZ18、JZ41和JZ50对总烷烃的降解率分别达到69.72%、48.00%、51.00%和62.20%，对直链烷烃的降解率分别为86.89%、55.98%、58.42%和89.13%，表明4株菌对烷烃具有很强的降解效果，其中菌株JZ6和JZ50对除烷烃的其他芳香烃类物质也具有一定