shh基因在肝细胞癌中的表达及意义　

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1、Shh基因在肝细胞癌中的表达及意义作者：云建刘蛟陈强谱欧琨管清海夏国华汪谦【摘要】目的探讨sonichedgehog(Shh)基因在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片技术和免疫组化(ABC?HRP)法对150例HCC手术切除标本进行Shh检测，评估Shh的表达与HCC临床病理的关系。结果150例肝癌组织，脱片9例，139例中39例有高表达(％);25例癌旁肝组织无脱片，阳性表达3例(％);二者比较有显著性差异(POoShh阳性表达与HCC的转移、淋巴浸润、包膜形成及细胞分化密切相关(P<)。结论

2、Shh检测对判断HCC的转移、复发及预后具有意义。【关键词】肝肿瘤Sonichedghog基因[Abstract]0bjectiveToinvestigatetheeffectofsonichedgehoggeneontheinvasion,metastasisandprognosisofhepatocellularcarcinoma(HCC).Methodslmmunohistochemistryandtissuemarraytechniquewereusedtoevaluatetheexpressionofson

3、ichedgehoggene，andtherelationshipbetweenitsexpressionandtheclinicopathologicalprognosticparameterswasanalyzedin150HCC.ResultsTheresultsshowedthatthepositiveexpressionrateofpatchedgeneinHCCtissue(n=139)was%,butthatinnormallivertissuewas%.Theexpressionwassignific

4、antlyhigherinHCCthanthatinnormallivertissue.ThepositiverateofShhgenewascorrelatedwithlymphnodeinvasion,capsule，metastasis(intra?orextra?hepaticmetastasis)andpathologicalTheseresultssuggestthatShhgenemayplayimportantrolesintheinvasion,metastasisandprognosisofHCC

5、.【Keywords】hepatictumor,sonichedgehoggeneSonichedgehog(Shh)基因与肿瘤的发生和发展关系密切。我们采用组织芯片技术和免疫组化(ABC?HRP)法对150例肝细胞癌(HCC)手术切除标本进行检测，研究Shh基因表达与HCC临床病理的关系，旨在探讨其在HCC的转移、复发及预后判断中的作用，现报告如下。1材料与方法材料标本来自本院1993—1997年手术切除的HCC150例，肝癌癌旁组织25例为对照，患者术前未行放疗、化疗。标本在甲醛中浸泡8〜12h后石蜡包埋。150

6、例中，脱片11例；参检的139例中，男115例，女24例；年龄24〜77岁。有肝外转移者占％(42/139)，有淋巴结转移者占％(15/139)。对照组25例组织取自肿瘤边缘外部位，并经HE染色，病理切片证实无癌变。组织微阵列制备蜡块用组织芯片仪（MD）制作。150例肿瘤组织和25例癌旁组织每例放入两孔，孔直径mm。制作芯片时参考HE染色玻片，选择最有代表性区域取组织。小心切片（厚约6um）固定在显微镜的玻片上。HE染色的组织芯片供形态学参考。免疫组化石蜡包埋的组织芯片经脱蜡，％H20210min阻断内源性过氧化酶活

7、性。微波炉抗原热修复处理（700WX20min）。山羊血清封闭非特异性抗原，滴加一抗4°C过夜，然后滴加生物素化羊抗鼠/兔IgG，37°C孵育30min。DAB显色后，苏木素复染细胞核，脱水树胶封固。每项试验都有阴性对照（缺少一抗）。结果判定光镜下以细胞质（膜）呈棕黄色为阳性。每例组织芯片随机观察10个高倍（HPFsX400）视野，胞质（膜）呈棕黄色细胞数＜10%为0，10%〜30%为1，31%〜50%为2，＞50%为3。对照组Shh染色程度1为正常。统计学方法采用Fisher精确计算法或x2检验。P＜为差异有统计学

8、意义。2结果Shh在肝细胞癌中的表达139例HCC中，39例阳性表达；25例癌旁组织中，3例（12%）阳性表达。两者比较，有显著性差异（P＜）。Shh表达水平和HCC临床病理特征的关系见表1。Shh阳性表达率与HCC的淋巴浸润、转移、包膜形成、肿瘤分化明显相关(分别为P=，P=，P=)，而与性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤分期无明显关系。表IShh表