缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏内皮素受体基因表达的影响

《缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏内皮素受体基因表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏内皮素受体基因表达的影响【关键词】糖尿病缬沙坦内皮素受体基因表达Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofangiotensinⅡreceptorantagonistvalsartanonintrarenalmRNAexpressionsofETAandETBindiabeticrats.MethodsTheexperimentalcontrolgroup(C)andfourgroupsofstreptozotocin-induceddiabeticSprague-DainedbyRT-PCRa

2、fter9alcontrol,theexpressionsofETAandETBgenesproved)byhigh-dosevalsartan(P<0.01),uchbetterthanprovementayaffordtherenoprotectionbydecreasingtheintrarenalexpressionsofETAandETBmRNA.Keyeinhibitor，ACEI）及血管紧张素受体阻断剂（angiotensinreceptorblocker,ARB）已被作为DN临床治疗一线药物。Fujihara等［1］发现,传统

3、剂量ARB不能完全阻滞肾脏过度激活的肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensinsystem,RAS），从而达不到完全肾脏保护作用。目前国内外文献多是ARB对糖尿病肾脏内皮素（endothelin，ET）水平影响的研究，缺乏ARB对糖尿病内皮素受体基因表达影响的研究。本研究目的在于观察缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏内皮素受体A（endothelinreceptorA，ETA）、内皮素受体B（endothelinreceptorB，ETB）基因表达的影响，进一步探讨ARB对糖尿病肾病的作用机制。1材料和方法1.1动物模型制备、分组及处理雄性SD大

4、鼠50只，78周龄，体重180220g。链脲佐菌素（STZ）65mg/kg经腹腔注入，4872h后血糖≥16.7mmol/L,确认为糖尿病模型成功。造模成功后模型鼠随机分成4组：①糖尿病组（D组），8只；②小剂量缬沙坦治疗组（DV10组），10只，缬沙坦10mg·kg-1·d-1，灌胃；③大剂量缬沙坦治疗组（DV50组），10只，缬沙坦50mg·kg-1·d-1,灌胃；⑤极大剂量缬沙坦治疗组（DV100组），8只，100mg·kg-1·d-1,灌胃。设正常对照组（C组），8只。干预治疗至9周结束。动物空腹在3％水合氯醛麻醉下腹主动脉插管，接XY-1

5、型血压监测仪记录平均动脉压，收集血标本；取肾，部分肾组织液氮保存备用。1.2实验方法1.2.1血糖测定采用罗氏血糖仪测定尾静脉血糖。1.2.2逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）总RNA的提取：取液氮保存的肾组织，一步法总RNA提取试剂盒提取RNA。逆转录：取肾组织总RNA2μg，按常规反应体系，于42℃反应50min，92℃加热５min，灭活MMLV。PCR反应：ETA引物，上游5′-CGAGGTCATGAGGCTTTTGG-3′，下游5′-GTGTTTAAGCTGTTGGCGGG-3′，扩增出的cDNA序列长度787bp；ETB引物，上游5′-

6、TGCACACCTTTCCGCAAGCACG-3′，下游5′-AGCTGGTGCCCTTCATACAGAAGGC-3′，cDNA序列长度919bp；β-actin引物，上游5′-CAGAAGGACTCCTACGTG-3′，下游5′-GCTCGGTCAGGATCTTCATG-3′，cDNA序列长度442bp。PCR反应条件设置：ETA94℃5min，94℃30s、53℃45s、72℃45s（36个循环），72℃5min；ETB94℃3min，94℃45s、60℃45s、72℃45s（34个循环），72℃10min。扩增产物定量分析：扩增产物在1.0%

7、琼脂糖凝胶上进行电泳，以凝胶成像系统对DNA扩增带进行图像分析，以ET受体/β-actin的光密度值比值（D比值）表示ET受体基因表达水平。1.3统计学处理采用SPSS11.5统计软件对数据分析处理，计量资料采用±s表示，多组间均数比较采用单因素方差分析和秩和检验，组间两两比较采用q检验，P<0.05认为差异有统计学意义。2结果各组糖尿病大鼠均出现明显多尿、血糖升高，干预治疗对这些指标无显著影响。与C组相比，平均动脉压、ETA、ETB表达在D组、DV10组增高（P<0.01）；与DV10组相比，上述指标在DV50组下降(P<0.0

8、1)；与DV50组相比，DV100组平均动脉压降低，其余指标无明显改变（P>0.05）。具体见表1、图1。表1各组大