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时间:2018-11-11
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1、儿童和成人急性淋巴细胞白血病中Ki作者:徐卫,李建勇,吴雨洁,盛瑞兰,陆凤翔【摘要】为了观察Ki-67和Bcl-2在儿童和成人ALL中的表达,探讨其与ALL免疫学分型和临床疗效的关系,用链霉菌抗生物素蛋白-碱性磷酸酶(SAP)免疫组织化学染色的方法,对18例儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)和43例成人ALL患者的骨髓或外周血进行Ki-67抗原和Bcl-2蛋白的检测。结果表明:Ki-67抗原在儿童ALL中的表达略低于成人ALL,但差异无显著性(P>0.05);而Bcl-2蛋白在儿童ALL中的表达显著低于成人ALL(P<0.05);在儿童和成人ALL
2、各免疫表型中,T细胞、伴有髓系抗原标记的急性淋巴细胞白血病(My+ALL)的Ki-67阳性表达率显著高于成人(P<0.05);儿童和成人ALL的完全缓解率(CR)在Ki-67和Bcl-2两项同时低表达组中最高,仅一项低表达组中次之,两项均高表达组中最低。结论:对儿童和成人ALL患者进行增殖相关抗原Ki-67和抗凋亡蛋白Bcl-2的检测,能反映患者肿瘤细胞的增殖活性和凋亡抑制情况,Ki-67和Bcl-2的表达与白血病ALL类型和临床疗效密切相关。【关键词】急性淋巴细胞白血病;Ki-67抗原;Bcl-2蛋白;免疫组织化学 ExpressionofKi-6
3、7andBcl-2inAdultsandChildrenphoblasticLeukemiaandItsClinicalSignificance AbstractToevaluatetheexpressionsofproliferativeantigenKi-67andapoptosis-antagonizingprotEinBcl-2asmunohistochemistrystainingphoblasticleukemia(ALL)and43casesofadultsissionrate(CR)otherapeuticeffects. Keyphob
4、lasticleukemia;Ki-67antigen;Bcl-2protein;immunohistochemistry 急性淋巴细胞白血病(ALL)是一种恶性淋巴增殖性疾病,白血病细胞的过度增殖和凋亡受抑是ALL的发病基础,与ALL的治疗和预后也密切相关。对ALL细胞进行增殖和凋亡的研究,有助于揭示部分ALL的发生、发展的机制,为ALL的诊断、治疗和预后提供有价值的指标。我们采集了18例儿童ALL和43例成人ALL患者的骨髓或外周血,用免疫组织化学染色的方法检测Ki-67抗原和Bcl-2蛋白的表达水平,了解白血病细胞的增殖与凋亡情况,并进行疗效分析。
5、 材料和方法 研究对象 18例儿童ALL和43例成人ALL均为在我院经细胞形态学、免疫学和分子生物学诊断的初诊患者。在儿童组中男性14例,女性4例;年龄2-13岁,中位年龄8岁;其中B-ALL9例,T-ALL5例,null-ALL2例,伴有髓系抗原标记的ALL(My+ALL)2例。成人组中男性27例,女性16例;年龄14-72岁,中位年龄36岁;其中B-ALL24例,T-ALL6例,null-ALL7例,伴有髓系抗原标记的ALL(My+ALL)6例。 治疗方法 18例儿童ALL中3例采用DOP方案化疗,13例采用DOLP方案化疗,2例采用CDOLP方
6、案化疗。43例成人ALL中有34例住院治疗,1例患者采用DOP方案化疗,10例采用CDOP方案化疗,8例采用DOLP方案化疗,4例采用MOLP方案化疗,11例采用CDOLP方案化疗。 测定方法 化疗前采集患者的骨髓或外周血(幼稚细胞比例≥0.50),分离单个核细胞。Ki-67阳性对照为K562细胞株,Bcl-2阳性对照为HL-60细胞株。采用链霉菌抗生物素蛋白-碱性磷酸酶(SAP)免疫组织化学染色方法检测。第一抗体鼠抗人Ki-67单克隆抗体(MIB-1,Immunotech公司产品)和Bcl-2单克隆抗体(Bcl-2-124,Dako公司产品)各30μl
7、,37℃,45分钟;生物素标记的第二抗体30μl,37℃,15分钟;链霉菌抗生物素蛋白-碱性磷酸酶溶液的第三抗体30μl,37℃,15分钟;碱性磷酸酶底物显色,37℃,15分钟(以上各步骤均在湿盒中进行),自来水冲洗,苏木素复染。 计数方法 油镜下随机计数200个肿瘤细胞,计算Ki-67阳性细胞指数(Ki-67LI)和Bcl-2阳性细胞指数(Bcl-2LI)。 疗效评价标准 疗效判断依据1987年苏州会议标准[1]。 统计学处理 数据以均数±SD表示,采用t检验,χ2检验处理。 结果 Ki-67抗原和Bcl-2蛋白在儿童ALL和成人ALL中的
8、表达结果详见表1。在高倍视野下,Ki-67阳性细胞为
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