肝癌组织survivin的表达及其与hbv感染的关系

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1、肝癌组织survivin的表达及其与HBV感染的关系作者：马楠冯英明张贺龙纪统理张伟张惠中【摘要】　　目的：研究肝癌组织中的survivin的表达与HBV感染的关系.方法：应用免疫组化法检测原发性肝癌组织45例，癌旁肝硬化组织25例，肝硬化组织18例，肝炎组织5例，正常肝组织10例中survivin的表达，同时检测原发性肝癌中HBsAg的表达.结果：在45例肝癌组织中survivin阳性34例(75.5％)，阳性率高于癌旁肝硬化组织（44.4％），肝硬化组织（0），肝炎组织（0）和正常肝组织(0，P<0.001）.肝癌中survivin的表

2、达在Edmondson分级Ⅲ～Ⅳ级高于Ⅰ～Ⅱ级（P=0.014），而在年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、是否有门脉转移方面无统计学差异（P>0.05），survivin与HBsAg的表达呈正相关（P=0.014）.结论：肝癌组织中survivin高表达说明其在肝癌发生发展中起重要作用，同时HBV感染对于survivin表达上调有一定作用.【关键词】存活素癌肝细胞肝炎表面抗原乙型细胞凋亡基因0引言肝细胞性细胞癌(HCC)是肝脏最常见的恶性肿瘤.肝细胞的正常凋亡和增殖的平衡被打破会促使HCC的发生和发展［1］.Survivin属凋亡抑制蛋白(in

3、hibitorofapoptosisprotEin，IAP)家族新成员，在多数恶性肿瘤组织中高表达［2］.我们采用免疫组化法检测survivin和HBsAg在肝癌组织中的表达，并探讨survivin与HCC临床病理特征、HBsAg的相关性及其临床意义.1材料和方法1.1材料1993/2003经手术切除并经病理学证实的HCC标本45例(其中带有癌旁肝硬化组织25例)，肝硬化组织18例，肝炎组织5例，所有病例术前均未行化疗和其它治疗.HCC标本中，男38例，女7例，年龄27～61（中位46.4）岁；肿瘤直径≤5cm者15例，＞5cm者30例；门脉癌栓

4、者15例，阴性者30例.Edmondson分级Ⅰ～Ⅱ级16例，Ⅲ～Ⅳ级29例；TNM临床Ⅰ～Ⅱ期16例，Ⅲ～Ⅳ期29例.标本经40g/L甲醛固定，石蜡包埋，4μm厚连续切片.10例正常肝脏组织标本作为对照组.鼠抗人survivinmAb，鼠抗人HBsAgmAb，免疫组化SP法检测试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司.1.2方法采用链霉抗生物素蛋白一过氧化物酶(SP)免疫组织化学方法检测survivin与HBsAg表达.肝癌组织survivin蛋白表达的免疫组织化学染色按照SP法常规操作进行，以试剂公司提供的阳性对照片作为阳性对照，PBS代替一抗

5、作阴性对照.光镜下观察免疫组化染色切片的显色反应，survivin染色定位于胞质，呈棕黄色，随机选择5个肿瘤区内200倍(20×10倍)视野，计算每个视野阳性细胞率，≥l0％判为阳性，<10％判为阴性.HBsAg染色定位于胞质，棕黄色为阳性，其阳性判断标准同survivin.统计学处理：所得数据应用SPSS11.0统计软件处理.Survivin的表达及其与各临床病理特征之间的关系采用χ2进行检验分析，与HBsAg的相关分析采用spearman秩相关.2结果2.1Survivin在HCC中的表达Survivin蛋白主要表达于肝癌细胞质，SP染

6、色可见胞质内棕黄色颗粒，阳性细胞在肝癌组织内呈散在分布.在45例HCC中survivin阳性34例(75.5%,图1A)，癌旁肝硬化组织25例survivin阳性11例(44.4%)，肝硬化组织，肝炎组织均无survivin阳性病例，正常肝组织survivin为阴性（图1B）.HCC组织survivin的阳性率高于癌旁组织和肝硬化组织和肝炎组织(P<0.001).Edmondson分级Ⅰ～Ⅱ级16例，survivin阳性8例，阳性率50％,Ⅲ～Ⅳ级29例，阳性26例(89.6%)，两者差异有统计学意义（P<0.05）.Survivin

7、表达与病理分级有关而与年龄、性别、分期、肿瘤大小、转移无关（表1）.2.2Survivin表达与HBsAg的关系HBsAg表达于HCC细胞，阳性细胞胞质呈棕黄色颗粒.在45例HCC中HBsAg阳性30例(66.7%,图2)，其中surivin阳性34例中HBsAg阳性26例.采用spearman秩相关检验进行统计分析，得出survivin与HBsAg表达呈正相关（r=0.366,P=0.014）.表1Survivin表达与HCC临床病理特征的关系3讨论凋亡在维持正常细胞的生长和组织内环境稳定中起重要的平衡作用［3］.Survivin是迄今为止发现

8、的最强的凋亡抑制因子，在多种肿瘤组织中均有高表达［4-5］.我们发现肝癌中survivin阳性率显著高于癌旁组织、肝硬化组织、肝炎及正常