免疫性肝损伤小鼠外周血淋巴细胞亚群变化及大蒜多糖c的干预作用论文

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1、免疫性肝损伤小鼠外周血淋巴细胞亚群变化及大蒜多糖C的干预作用论文【摘要】目的观察免疫性肝损伤小鼠外周血淋巴细胞亚群变化并研究大蒜多糖C的干预作用。方法采用尾静脉注射卡介苗加脂多糖(BCG+LPS)建立免疫性肝损伤模型，应用流式细胞术测量小鼠外周血淋巴细胞亚群的百分比和CD4+/CD8+比值。结果模型组T淋巴细胞、CD8+T细胞百分比值较正常对照组明显升高（P0.01），B淋巴细胞百分比值、CD4+/CD8+比值明显下降（P0.01），CD4+T细胞百分比也有减少（P0.05），NK1.1+T细胞百分比无显著变化。大蒜多糖C（800mg/kgig，q

2、d×12）治疗能使BCG+LPS免疫性肝损伤小鼠外周血T，B，CD4+T和CD8+T淋巴细胞百分比显著下降.freelphocytesubsetsintheperipheralbloodofmicemunologicalliverinjuryandinterventionofGarlicPolysaccharideC.MethodsTheanimalimmunologicalliverdamagemodeletteGuein)andlipopolysaccharide(LPS)intomice．Theperipheral-bloodlymphocy

3、tesubsets'percentagesandtheCD4+/CD8+ratioeasuredbythefloetry.Resultsparedalcontrolgroup,thepercentagesoftheTlymphocyteandtheCD8+Tlymphocyteintheperipheral-bloodinimmunologicalliverdamagemicesiginificantlyincreased（P0.01）,hophocyte,CD4+TlymphocyteandtheratioofCD4+/CD8+decreased

4、(P0.05orP0.01).GarlicpolysaccharideCatdoseof800mg/kg(ig，qd×12)decreasedthepercentagesofT,B,CD4+TandCD8+Tlymphocyteintheperipheral-bloodinmicetreatedallevel.ThepercentagesoftheNK1.1+TlymphocyteshoodelandGarlicPolysaccharideCgroups.ConclusionGarlicPolysaccharideCcaninhibittheimm

5、unologicactivity,andestablishanemunologicbalance,therebyproduceprotectiveeffectsonimmunologicalliverinjury.Keymunity;Liverinjury；Lymphocytesubset；GarlicpolysaccharideC；Floetry病毒性肝炎的损害与机体的免疫应答有密切的关系［1］。卡介苗联合脂多糖(BCG+LPS)诱导的免疫性肝损伤是研究病毒性肝炎发病机制及药物防治的有效实验模型［2，3］，此模型中小鼠外周血淋巴细胞亚群的变化特征

6、尚无定论。大蒜药食同源，近来我们从大蒜球根中提取分离出新的安全低毒有效成分大蒜多糖C，并证实大蒜多糖C在体外有抗乙型肝炎病毒作用，对四氯化碳所致化学性及BCG+LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝功能均具保护性作用［3～5］。为此，本研究则进一步观察BCG+LPS免疫性肝损伤小鼠外周血淋巴细胞亚群变化并研究大蒜多糖C的干预作用，以探讨大蒜多糖C护肝作用的相关免疫机制，寻求有效的抗病毒性肝炎药物。1材料和方法1.1主要药品及试剂大蒜多糖C：参照文献方法提取及纯化，纯度为92.3％［3～5］。卡介苗（BCG）活菌：兰州生物制品研究所产品，冻干粉剂，批号：20

7、020501，使用前用灭菌生理盐水配制成1％的溶液。脂多糖（LPS）:SIGMA公司产品。小鼠单克隆抗体:FITC标记CD3试剂、PE标记CD19试剂、PE标记CD4试剂、PE标记CD8试剂以及相应同型对照，均为Caltag公司产品。流式鞘液及溶血剂（Immuno-Prep）均由BeckmanCoulter公司提供。1.2动物与仪器健康雄性昆明小鼠，体重22～25g，由湖北医学科学院提供，适应1周后开始实验。主要仪器：美国BeckmanCoulter公司EPACSXL流式细胞仪。1.3动物模型、分组、标本采集及制备采用卡介苗（BCG）加脂多糖（LP

8、S）诱发的小鼠免疫性肝损伤模型，即小鼠先尾静脉注射1%BCG活菌2mg/只致敏，12d后再尾静脉注射微量LPS（4μg/只