鞣酸对糖尿病大鼠肾脏功能和形态改变的影响

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1、鞣酸对糖尿病大鼠肾脏功能和形态改变的影响作者：魏海峰李才魏雁虹曲萌苗春生孙波【摘要】目的观察鞣酸（tannicacid，TA）对链脲佐菌素（STZ）诱发糖尿病（DM）大鼠血糖及肾脏功能和形态改变的影响。方法用STZ诱发大鼠DM模型后，随机分为DM模型组、氨基胍（AG）组和TA低高剂量组，另设正常对照组。AG组按40mg·kg-1·d-1给予；TA低高剂量组分别按20及30mg·kg-1·d-1给予；正常对照组和模型组每天给予等体积生理盐水，给药方式均为腹腔注射，共10a公司）按52mg/kg体重（使用前用0.1mol/L、pH4.2无菌柠檬酸盐缓冲

2、液配成2%溶液）单次腹腔注射，正常对照组大鼠仅腹腔注射等体积0.1mol/L柠檬酸盐缓冲液。注射STZ后48h，用尿糖试纸测尿糖，应在及以上，1mol/L者确定为DM模型大鼠，给予标准饲料、充足的饮用水饲养，用于下一步的实验。造模期间有4只大鼠死亡，7只大鼠血糖值偏低，未列入实验对象。　　1.2动物分组及给药方法　　成模的51只DM大鼠随机分为DM模型组15只，氨基胍（AG）（40mg·kg-1·d-1）组、TA低高剂量（20及30mg·kg-1·d-1）组各12只。药液的配制：AG及TA均购自Sigma公司，注射前用0.1mol/LPBS溶液配

3、制2%AG溶液及1%TA溶液，以NaOH调整溶液pH7.0，超净台下用0.22μm微孔滤膜过滤除菌备用。正常对照组和模型组每天给予等剂量的生理盐水，各组给药方式均为腹腔注射，为期10in离心10min，吸取血清分装于Eppendorf管中，采用日立7150型全自动生化仪检测各组大鼠血清肌酐（Cr）、血尿素氮（BUN）、尿酸（UA）；尿蛋白测定：给药10l，1500r/min离心10min，去除沉渣，分装于Eppendorf管中，采用日立7150型全自动生化仪检测尿蛋白（UrineProtEin），计算24h尿蛋白排泄量。④大鼠取血后处死，立即摘取肾

4、脏，置于4%多聚甲醛中固定48h，常规制备石蜡切片，行组织形态学检查，包括HE、Masson染色。同时各组取少量肾组织经2.5%戊二醛前固定，1%锇酸后固定，乙醇系列脱水，Eppon812环氧树脂包埋，LKBⅢ型超薄切片机半薄切片定位后行超薄切片，醋酸双氧铀及柠檬酸铅双重染色，JEM1200EX型透射电子显微镜观察、摄片，观察肾小球超微结构的变化。　　1.4统计学方法　　数据用x±s表示，采用SPSS13.0软件进行组间方差分析。　　2结果　　2.1各组大鼠一般状况　　正常对照组大鼠饮食饮水及二便正常，精神状态良好，毛色光润，反应敏捷，体重增加

5、，无死亡。注射STZ造模后72h，大部分大鼠出现多饮、多尿，活动减少，体毛枯燥无光泽，精神萎靡，反应迟钝，拱背蜷卧。实验期间及结束，模型组大鼠“三多一少”症状未得到缓解，体重明显降低，体毛松散无光泽，状态差，死亡7只。AG及TA组大鼠也有相似的表现，但活动较模型组活跃，实验后期饮水及尿量有所减少。死亡情况为：AG组死亡4只，TA低剂量组死亡3只，TA高剂量组死亡5只，两种药物治疗组之间无明显差别。　　2.2各组大鼠肾脏指数的变化　　DM大鼠体重明显减轻，肾脏体积增大，重量增加，明显大于正常对照组（P<0.01）。TA组大鼠体重减轻程度不如模型

6、组明显，肾脏肾体积和重量较模型组显著降低（P<0.01），TA高低剂量组与AG组无明显差别。见表1。表1各组大鼠体重、肾重、肾重/体重、不同病程大鼠血糖水平及生化指标的比较(略)　　2.3TA对不同病程的大鼠血糖的影响　　各组DM大鼠空腹血糖明显高于正常对照组（P<0.01），与模型组相比，TA处理2theperipheryoftheglomendarcapillaryechanismsofrenaldiseaseprogression〔J〕.ExpBiolMed，2008；233(1):411.　　4ChandakPG，Gaikel

7、ioratesthedevelopmentofstreptozotocininduceddiabeticnephropathybypreventingtheactivationofPARP〔J〕.PhytotherRes，2009；23(1):727.　　5KikkaJKidneyDis，2003；92(9):1650.　　6姚思宇，赵鹏.鞣质降血脂作用的动物实验研究〔J〕.中国热带医学，2004；4(6):9456.　　7万静，刘丽梅.氧化应激抗氧化系统与糖尿病肾病〔J〕.国际内分泌代谢杂志，2006；26(4):1820.　　8Sza

8、bóC，BiserA，BenkoR，etal.Poly(ADPribose)polymeraseinhibitorsam