6种中草药抗耐药性大肠杆菌的抑菌效果论文

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时间:2018-11-17

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1、6种中草药抗耐药性大肠杆菌的抑菌效果论文黄衍强,黄宏思,张莲,林丽霞,黄荃荃,甘江丽,蓝文清,梁思武【摘要】目的筛选对耐药性大肠杆菌有抑制作用的中草药。方法选用侧柏叶、大蓟、艾叶、石菖蒲、夏枯草、黄芩6味中草药.freell时有抑菌作用,其他4味中药无抑菌作用;在浓度1.0g/ml时6味中药均有不同程度的抑菌作用,夏枯草、黄芩两味中药抑菌作用特别明显。结论6味中药对耐药性大肠杆菌均有不同程度的抑制作用,夏枯草、黄芩抑菌作用强于侧柏叶、大蓟、艾叶、石菖蒲。【关键词】中草药大肠杆菌耐药性随着抗生素广泛

2、应用,越来越多的病原菌产生了耐药性,而且耐药性严重。大肠杆菌对青霉素类(青霉素耐菌率为99.05%)、大环内脂类(红霉素耐菌率为79.72%)、氨基糖甙类(链霉素耐菌率为48.98%,庆大霉素耐菌率为43.88%)、喹诺酮类(氧氟沙星耐菌率为37.76%)耐药性都很高[1]。如果对大肠杆菌耐药性处理不好,发展成超级菌,那么对感染病人的治疗将带来很大的困难,对社会造成的损失也是不可估量的。中草药对细菌有一定的抑制作用,以其低毒、无残留、耐药性发生率低的独特优势,被广泛地应用于临床,用来治疗各种感染性

3、疾病。因此中草药的抑菌效果研究是目前医学研究的主要方向之一,我们通过抑菌实验筛选有效的抗耐药性大肠杆菌的中草药,为治疗耐药性大肠杆菌引起的疾病奠定理论基础。1材料与方法1.1材料中药:侧柏叶、大蓟、艾叶、石菖蒲、夏枯草、黄芩购自广西一心药业百色连锁店。菌种:耐药性大肠杆菌由右江民族医学院微生物学教研室分离、鉴定、保存。大肠杆菌经青霉素和红霉素的标准药敏纸片(购自杭州天和生物有限公司)测定为耐药。试剂:M-H培养基、NS购自杭州天和生物有限公司。其他材料:滤纸、培养皿、棉签等购自杭州天和生物有限公司

4、。1.2方法1.2.1煮沸法提取药液[2,.freelin,第3次为30min。将3次药液合并后浓缩为100ml(相当于0.5g/ml生药),再取第1次浓缩液10ml,将其浓缩为5ml的2次浓缩液(相当于1.0g/ml生药)。将2次浓缩液备用。1.2.2自制药敏纸片制作直径6mm的滤纸纸片,高压灭菌后烘干,然后把滤纸片浸泡于浓缩液中过夜,60℃烘干箱烘干,无菌保存备用。1.2.3K-B法药敏试验[4]①按每1000ml蒸馏水称取Muller-hintonAgar38g配备M-H琼脂,按每个平皿(直

5、径9mm)25ml进行分装。②将孵育16~24h的菌种分别接种于生理盐水试管中,校正浓度至0.5麦氏标准(相当于1.0×108CFU/ml)。③用无菌棉签蘸取菌液,在试管内壁旋转挤去多余菌液后在M-H琼脂表面均匀涂布接种3次,每次旋转平板60°,最后沿平板内缘涂抹1周。④平板在室温下干燥3~5min后用无菌镊子将药物纸片紧贴于琼脂表面,置35℃孵育16~18h,记录抑菌圈的直径。⑤药敏实验重复3次,以3次平均值为该味药的抑菌直径。1.2.4观察结果观察6种中药提取物在体外对耐药性大肠杆菌的抑菌效果

6、。2结果K-B法测定不同浓度6味中药水煮物对耐药性大肠杆菌的抑菌情况:夏枯草、黄芩两味中药在浓度0.5g/ml时有抑菌作用,其他4味中药无抑菌作用;浓度在1.0g/ml时6味中药均有不同程度的抑菌作用,但夏枯草、黄芩两味中药抑菌作用特别明显,见表1。表1K-B法测定不同浓度6味中药水提物对耐药性大肠杆菌的抑菌直径(略)3讨论实验中选用的6味中草药(侧柏叶、大蓟、艾叶、石菖蒲、夏枯草、黄芩)具有清热解毒、健脾润肺、攻积导滞、泻火凉血、活血祛淤和利胆退黄等临床疗效,并且这些中药中富含各种生物碱、有机酸

7、等有效成分及广谱抗菌抗病毒成分[5]。本实验中使用两种不同药物浓度的中药水提物抑制耐药性大肠杆菌。结果表明,6味中草药在浓度1.0g/ml时对耐药性大肠杆菌均有一定的抑菌效果,但是抑菌效果有一定差异。夏枯草、黄芩在低浓度时抑菌效果也是很明显,而其他4味药物在高浓度时有效,低浓度时无效。显然,夏枯草和黄芩对耐药性大肠杆菌抑菌效果比较明显,这对治疗耐药性大肠杆菌引起的疾病起到了很好的指导作用。但是,夏枯草和黄芩中哪些成分起作用,如何发生作用,如何快速提取有效成分是值得我们继续研究的内容。中草药的抑菌实

8、验是目前研究的主要课题之一。如何筛选效果良好的抑菌药物,以及提取中草药的有效成分并确定其分子结构,探讨中草药作用机制,对研究中草药,帮助阐述中草药的治疗理论有重要的意义。我们目前的研究只是药物的筛选以及方法的探索,希望同行能给宝贵的意见,共同加快中草药的研究进程,解决细菌耐药性难题。【

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