北五味子藤茎多糖的提取及含量测定论文

《北五味子藤茎多糖的提取及含量测定论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、北五味子藤茎多糖的提取及含量测定论文【摘要】目的从不同品种的北五味子藤茎中提取多糖并测定多糖含量。方法经脱脂、醇提后，用水提醇沉法提取多糖，用苯酚-硫酸法测定其含量。结果五味子藤茎中多糖含量为2.46%～4.44%，平均回收率为100.26%，RSD=1.55%(n=6)。结论不同品种的北五味子藤茎多糖的含量有一定的差异。【关键词】北五味子;多糖;提取;苯酚-硫酸法北五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.为木兰科北五味子属植物，主产东北，为常用中药，《神农本草经》将其列为上品.freell索氏提取器，北京玻璃仪器厂产品。

2、2方法与结果2.1葡萄糖标准溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖0.1038g，用蒸馏水溶解并定容到100ml即为1.038mg/ml的葡萄糖储备溶液。吸取1ml葡萄糖储备溶液于100ml容量瓶中，用水稀释到刻度，作为葡萄糖标准溶液。2.2苯酚溶液的配制取苯酚100g，加铝片0.1g和NaHCO30.05g，蒸馏，收集182℃馏份，称取10.0g，加水溶解定容于200ml容量瓶中，放冰箱备用。2.3标准曲线绘制精密量取葡萄糖标准溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6ml置具塞试管中，分别加蒸馏水至1.0ml，再分别加入5%苯酚溶液1.

3、0ml,摇匀，然后加浓H2SO45.0ml，充分摇匀，置40℃水浴中恒温30min4，取出冷却至室温。另以蒸馏水同上操作为空白对照，在490nm处测定吸光度，绘制标准曲线，建立回归方程:A=0.0104C+0.07033，r2=0.9996。葡萄糖含量在1.038～6.228μg/ml范围内呈良好的线性关系。2.4精密度实验精密吸取标准品溶液1.0ml6份，同“2.3”项下操作，结果显示吸光度的RSD=1.27%。2.5北五味子藤茎多糖的提取与精制称取55℃干燥的北五味子藤茎400g，用清水洗净，加水4000ml，微沸煎煮1h，过滤，滤渣加水4000ml

4、，超声30min后继续煎煮1h，过滤，合并提取液，加热浓缩至400ml。加入乙醇使溶液中乙醇含量为80%，放置12h，抽滤，沉淀依次用无水乙醇、丙酮洗涤。得到棕色粗多糖。将粗多糖溶于水，用氯仿∶正丁醇=4∶1除去蛋白，加入0.1%活性炭，置于40℃的水浴锅中搅拌40min5，抽滤,滤液加入乙醇使溶液含乙醇达80%,静置过夜,抽滤,残渣用无水乙醇、丙酮反复洗涤，真空干燥，即得精制北五味子藤茎多糖。2.6换算因子测定精确称取60℃干燥恒重的北五味子藤茎多糖233mg，置100ml容量瓶中，加入少量蒸馏水溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为多糖储备液。精确量取多糖储

5、备液0.20ml，加水至1.00ml，按测定标准曲线同样的方法测其吸光度值，根据标准曲线计算浓度。按下式计算换算因子：f=l-1)，D为多糖的稀释因子。测得f=0.629(n=6)。2.7样品含量的测定精密称取不同品种的北五味子藤茎粉各100mg，置于索氏提取器中用80%乙醇回流2h，抽滤，弃去滤液，残渣挥发至干，继续以蒸馏水煎煮1h,煎煮2次，抽滤,滤液反复洗至100ml容量瓶中，定容，摇匀成为样品液。测定时，精密吸取样品液1.0ml，按测定标准曲线同样方法测其吸光度值，按下式计算多糖含量(以粗多糖计)：多糖含量(%)=CDf×100/l-1)，D为样

6、品溶液的稀释因子，f为换算因子，l(6份)再分别精密加入不同量的标准溶液，依样品测定方法测定吸光度，计算回收率平均值为100.26%，RSD=1.55%。2.9稳定性实验将供试品溶液完成显色后，每隔30min测吸光度1次，连测4次。结果表明2h内稳定性良好，以A值计算，RSD=1.36%(n=4)。表1不同品种北五味子多糖含量测定结果3讨论多糖是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子聚合物,是构成生命的分子基础之一,是自然界含量最丰富的生物聚合物。人们陆续发现,多糖不仅作为广谱免疫促进剂，具有免疫调节功能，还在抗肿瘤、抗病毒、抗炎、降血糖、降血脂

7、、抗辐射等方面具有广泛的药理作用6。多糖的测定方法很多，本实验使用热水浸提法，再以80%乙醇提取以除去单糖、寡聚糖、苷类及生物碱等醇溶成分，再用水提醇沉法分离多糖成分，并以苯酚-硫酸法测定其含量。通过回收率实验和稳定性实验可知，实验结果表明，北五味子藤茎多糖平均含量为3.58%。其中抚松2号一年生含量最高为4.44%，黄果一年生的含量最低为2.46%，除黄果外，其它品种的一年生的多糖含量都高于两年生的含量。但其化学组成、理化性质及药理活性还有待于进一步研究。【