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1、大肠癌中VHLmRNA，FIH论文杨晓军,高鹏,车团结,黄海云【关键词】结直肠肿瘤；低氧诱导因子1α；VHL基因；缺氧诱导因子抑制因子1EffectofVHLmRNAandFIH1mRNAexpressionsincolorectalcarcinomaonHIF1αproteinlevel【Abstract】AIM:TodetectmRNAexpressionsofVHLandFIH1incolorectalcancer,andexploretheireffectonHIF1αproteinlevel.METHODS:SemiquantitativeRTPCRassayRNA,FIH1mR
2、NAin42patientseasuredbySPimmunohistochemistry;Spearmanrankcorrelation.RESULTS:mRNAlevelsofVHLandFIH1incolorectalcancerorlocationandgender.In42casesofcolorectalcancer,positiverateofHIF1αproteinanrankcorrelationdisplayedthattheexpressionsofVHLmRNAandFIH1mRNAayplayanimportantroleinthedevelopmentandma
3、tastasisofcolorectalcancer；ThedecreaseofVHLmRNAandFIH1mRNAexpressionsiscloselycorrelateds;HIF1α;VHL;FIH1【摘要】目的：检测大肠癌中VHLmRNA，FIH1mRNA以及HIF1α蛋白的表达,探讨VHL，FIH1对HIF1α蛋白水平的影响.方法：采用RTPCR技术检测42例大肠癌组织和相应的癌旁正常粘膜组织中VHLmRNA，FIH1mRNA的表达，采用免疫组化SP法检测HIF1α蛋白在大肠癌和癌旁正常组织中的表达，Spearman相关关系检验分析其之间的相关性.结果：大肠癌组织VHLmRNA
4、和FIH1mRNA的表达水平显著低于癌旁正常组织（t=-10.14,P=0.00；t=-15.26,P=0.00）；二者的表达水平随Dukes分期而降低，DukesA+B期显著高于DukesC+D期（t=2.84,P=0.01；t=-5.13,P=0.00）；它们的表达水平与与肿瘤部位、性别无关.大肠癌组织HIF1α蛋白表达阳性率为69.1%(29/42),在癌旁正常组织中均为阴性；DukesC+D期(80.0%,24/30)显著高于DukesA+B期(41.7%,5/12),(t=5.89,P=0.02)；Spearman相关分析显示，HIF1α表达水平与VHLmRNA.freelRNA
5、的表达水平显著负相关（rs=-0.97,P=0.01，rs=-0.66,P=0.01）.结论：HIF1α的过表达在大肠癌的发生发展、浸润转移过程中起着重要作用，大肠癌组织中VHL以及FIH1的水平下降与HIF1α蛋白水平的升高之间存在密切相关.【关键词】结直肠肿瘤；低氧诱导因子1α；VHL基因；缺氧诱导因子抑制因子1低氧诱导因子1（hypoxiainduciblefactor1，HIF1）在低氧状态下通过对靶基因的转录激活，调控着血管发生、红细胞生成以及糖酵解等过程［1］.希佩尔林道病(vonHippelLindau,VHL)希佩尔林道病肿瘤抑制蛋白(proteinvonHippelLin
6、dau,pVHL)在依赖于氧的条件下作用于HIF1的α亚单位，促使其发生泛素化和蛋白酶体的降解［2］.低氧诱导因子1抑制因子(factorinhibitingHIF1,FIH1)能结合HIF1α并抑制其转录激活功能［3］.我们采用RTPCR法检测了大肠癌组织和相应癌旁正常组织中VHLmRNA,FIH1mRNA的表达水平，同时采用免疫组化方法检测HIF1α蛋白的表达，并进一步分析探讨它们之间的相关性.1材料和方法1．1材料甘肃省人民医院肛肠科200410/200504手术切除并经病理证实的新鲜大肠腺癌标本42(男27，女15)例，年龄31～76（中位56)岁.其中结肠癌7例，直肠癌35例.D
7、ukesA期5例，B期7例，C期18例，D期12例(有7例发生转移),术前未做化放疗.同时距肿瘤边缘5～10cm以上切取正常组织作为自身对照.标本离体后5min内即投入液氮罐并转至-80℃冰箱冻存.RNA提取试剂,饱和酚,100bpDNAladder购自上海生工;逆转录酶MMLV(RNaseH)，Taq酶，AgaroseGel，MMLVRtasecDNAsynthesisKit(codeD6130)，RNA酶抑制剂，琼脂
