吐温80对黄连中小檗碱提取率的研究

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1、吐温80对黄连中小檗碱提取率的研究【摘要】　　目的研究吐温80对黄连中小檗碱提取率的影响。方法综合考虑吐温80用量，H2SO4浓度，H2SO4用量三方面因素，按照正交实验设计的要求确定最佳的提取条件。结果吐温80固液比为2∶3，H2SO4浓度为0.2%，H2SO4固液比为1∶35时黄连中盐酸小檗碱的提取率最高。结论吐温80可促进黄连中小檗碱提取率的增加。【关键词】吐温80;黄连;小檗碱　　Abstract:ObjectiveTostudytheincludingeffectofpolysorbate-80onext

2、ractionofberberinefromCoptischinensis.MethodsOrthogonalexperimentdesignizeexcractionconditions.Threefactors,includingthecontentofpolysorbate80，concentrationofsulfuricacid,contentofsulfuricacid,umconditionsofextractionotetheextractingrateofberberinefromcoptisc

3、hinensis.　　Key80）；是一种非离子亲水性的表面活性剂，淡黄色粘稠状液体；微有脂肪臭，味微苦。易溶于水、乙醇、氯仿、乙醚，不溶于液状石蜡。应用广泛，除作乳化剂外，也用作某些水中难溶药物的增溶剂，物理吸附于脂质双面表层，其聚氧乙烯基从脂质双层中伸出，致密覆盖在双层表面，形成有一定厚度的亲水相，对植物粉末产生润湿作用，对不同分子结构的难溶物质增溶作用不同，降低提取溶剂乙醇的体积分数，降低提取成本，因此用吐温80作为药物的增溶剂有较高的实用价值〔2〕。　　1材料与仪器黄连，购自于沈阳东北大药房，经沈阳农业大学

4、生物科学技术学院高级实验师陈贵老师鉴定为味连CopticchinensisFranch；盐酸小檗碱对照品购自中国药品生物制品检定所。所用试剂均为国产分析纯。722-型光栅分光光度计（山东高密彩虹分析仪器有限公司）。　　2方法与结果　　2.1小檗碱标准曲线的制备〔3〕精密称取10mg小檗碱纯品，用95%的乙醇定容于50ml的容量瓶中，摇匀，备用。从50ml容量瓶中精密量取0，0.2，0.4，0.8，1.6，2.0ml的小檗碱溶液，置于6个50ml容量瓶中，再分别将其用95%的乙醇定容到50ml，振荡静置。制成一系列不

5、同浓度梯度的溶液。用分光光度计在348nm下测定A值,求出标准曲线为y=0.2513x+0.0076。　　2.2传统稀H2SO4浸渍法提取　　称取2.0006g黄连粉末倒入一个小烧杯中，按固液比1∶30的比例加入60ml0.2%的H2SO4溶液，浸泡1h，过滤，得到硫酸小檗碱。用石灰乳调pH7～8，抽滤。再用10%的盐酸小檗碱将滤液pH调至2～3，然后加入滤液体积3%～5%的NaCl,静止30min后抽滤，得到盐酸小檗碱的粗提物，在348nm下测其A值。得盐酸小檗碱含量为101.8mg/g。　　2.3表面活性剂吐温

6、80对黄连中小檗碱提取率的影响　　2.3.1吐温80用量对黄连中小檗碱提取率的影响　　称取干燥的黄连粗粉2g左右，置于100ml烧杯中，按固液比（1∶30）加入60ml的0.2%H2SO4，然后加入吐温80，加入量分别为固液比2∶1，1∶1，2∶3，1∶2，按稀H2SO4粗提法测定小檗碱的含量。结果见图1，由图可知，吐温80用量为固液比1∶1时，小檗碱提取率最高。表1正交实验因素水平（略）表2L9（34）正交实验结果（略）表3方差分析结果（略）　　2.3.2H2SO4浓度对小檗碱提取率的影响　　称取干燥的黄连粗粉2

7、g左右，置于100ml烧杯中，按固液比（1∶30）加60mlH2SO4，加入3ml吐温80，选取H2SO4的浓度分别为0.2%,0.4%,0.6%，0.8%。处理后按稀H2SO4粗提法分别测定黄连中小檗碱的含量。结果见图2，由图2可知，当H2SO4浓度为0.2%时，小檗碱提取率最高。　　2.3.3H2SO4用量对黄连小檗碱提取率的影响　　称取干燥的黄连粗粉2g左右，置于100ml烧杯中，按固液比（1∶25，1∶30，1∶35，1∶40）加入H2SO4，加入2ml吐温80。处理后按稀H2SO4粗提法分别测定黄连中小檗

8、碱的含量，结果见图3，由图3可知，H2SO4用量为固液比1∶35时，小檗碱提取率最高。　　2.4正交设计实验　　在单因素基础上，本实验选取3个有代表性且对小檗碱的提取率影响较大的因素作为正交设计的三因素，即吐温80用量，H2SO4浓度，H2SO4用量。按照L9（34）正交实验要求，称取2g左右黄连粉末于100ml烧杯中，加入对应量的吐温80，在H2SO4不同