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1、不同采收期合欢皮与山合欢皮中总皂苷含量比较论文.freeldifferentcollectionperiods.MethodSpectrophotometryinethecontentsofsaponin.ResultThecontentsofsaponininone-yearBarkofSilktreeAlbizziaeisdifferentfromteasmulti-yearBarkofSilktreeAlbizziae(P0.05).Thecontentsofsaponininmulti-yearBarkofSilktreeAlbizziaei
2、sdifferentfrommulti-yearBarkofSilktreeAlbizziaekaldora(P0.05).ConclusionThecontentofsaponininBarkofSilktreeAlbizziaeandBarkofSilktreeAlbizziaekaldoraderivedfromdifferentcollectionperiodsisquitedifferent.Key处显示最大吸收波长。由于合欢皮与山合欢皮所含皂苷均为三萜皂苷,且为齐墩果烷型2,与香草醛浓硫酸加热反应生成物的最大吸收波长与齐墩果酸一致,故选定
3、齐墩果酸为标准对照品,540nm为测定波长。2.2供试品溶液的制备合欢皮与山合欢皮粉碎过40目筛,60℃恒温烘2h,置干燥器中备用。精密称取样品各2g,置索氏提取器中,加甲醇适量,回流提取至无皂苷反应(约7h),减压回收甲醇,用适量水溶解残渣,转移至分液漏斗中,乙醚脱脂,用水饱和的正丁醇萃取4次,合并正丁醇萃取液,减压回收正丁醇,残渣用少量甲醇溶解,过滤,滤液置10mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为供试品溶液。2.3对照品溶液的制备精密称定干燥至恒重的齐墩果酸适量,用甲醇制成每1mL含1.22mg的溶液,作为对照品溶液。2.4标准曲线的制备精密量
4、取齐墩果酸对照品溶液20、40、60、80、100μL,分别置于试管中,挥干；精密加入8%香草醛乙醇溶液0.5mL和72%硫酸溶液5mL,摇匀,置恒温水浴60℃加热10min,取出试管,置冰水浴中冷却15min。分别于540nm处测吸收光度值。以吸光度值为纵坐标,取样量为横坐标绘制标准曲线。其回归方程为：Y＝7.52×10-3X－0.0244,r＝0.9993。2.5回收率测定称取合欢皮样品2份,其中1份加齐墩果酸一定量,并依上法处理与测定,重复5次,其平均回收率为96.9%,RSD＝1.69%,结果见表1。表1回收率试验结果（略）2.6样品含量的测
5、定吸取合欢皮、山合欢皮供试品溶液各50μL和对照品溶液40μL,分别置于试管中,挥干,各精密加入8%香草醛乙醇溶液0.5mL,72%硫酸5mL,摇匀,置60℃恒温水浴加热10min,取出试管,置冰水浴中冷却15min,以溶剂50μL代替供试品溶液的同样操作制备液为空白对照,在波长540nm处测定吸收度,计算,即得。结果见表2。表2不同采收期合欢皮与山合欢皮中总皂苷含量测定结果（略）注：与二年生合欢皮比较,*P0.05；与多年生山合欢皮比较,#P0.053讨论本试验含量测定方法的选择是根据文献2-3,利用合欢皮总皂苷均为三萜皂苷,且为齐墩果烷型,故采用
6、硫酸-香草醛比色法测定合欢皮总皂苷的含量,经检测,合欢皮总皂苷的最大吸收波长与齐墩果酸一致,故选定齐墩果酸为标准对照品。样品提取方法的选择是根据查阅的文献并结合一定的预试验,采用提取皂苷的通法,用甲醇提取、乙醚脱脂、正丁醇少量多次萃取得总皂苷。本试验采用比色法测定合欢皮中总皂苷的含量,操作简便,且具有较好的稳定性和重现性。针对目前商品药材中合欢皮与山合欢皮混用的现象,采用比色法来测定合欢皮、山合欢皮总皂苷的含量。结果山东产二年生合欢皮与二年生山合欢皮、多年生合欢皮与多年生山合欢皮比较总皂苷含量均有显著差异(P0.05)。一年生、二年生与多年生的合欢皮
7、进行比较,一年生合欢皮与二年生合欢皮有显著差异(P0.05),二年生合欢皮与多年生合欢皮无显著差异(P0.05)。考虑到保护生态资源,采收合欢皮应以多年生为宜。【
