nogoa及受体ngr对大鼠视皮层可塑性调控作用的研究

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1、原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：垒鱼垫日期：学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩

2、印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：喀派l讹导师签．文铀√期：函4年_』月1L日f本课题受中南大学博士研究生学位论文创新基金资助(2∞9BSXT050)博士学位论文中文摘要摘要第一章Nogn及受体NgR在正常发育及单眼剥夺模型大鼠视皮层中表达的动态变化目的探讨正常发育过程及单眼剥夺模型大鼠视皮层中Nogo-A及受体NgR的mRNA和蛋白质表达的动态变化及意义。方法84只新生SD大鼠随机分为6组：O日龄正常组(NorPO，12只)

3、、14日龄正常组(NorPl4，12只)、28日龄正常组(NOrP28，12只)、60日龄正常组(NorP60，18只)、28日龄模型组(MDP28，12只)以及60日龄模型组(^IDP60，18只)，模型组大鼠于出生后21天缝合右侧眼睑建立单眼形觉剥夺模型。各组动物均依照实验设计的时间点处死并取左侧视皮层组织，提取总RNA及蛋白质，采用RT—PCR及免疫印迹westernblot方法检测视皮层中Nogo-A及NgR的表达，了解正常发育及单眼剥夺模型大鼠视皮层中Nogo-A及NgR的动态表达趋势，同时通过免疫荧光组织化学方法检测早期单眼

4、剥夺对Nogo-A及NgR蛋白表达影响的层特异性。结果正常新生大鼠(№rPO)视皮层中即有№go—A／NgRmRNA及蛋白质的表达，其表达量随年龄增长而明显上调。其中Nogo—AmRNA及蛋白质于出生后28天(NorP28)到达高峰并持续至成年期(№rP60)；NgRmRNA于出生后14天(NorPl4)到达高峰并持续至成年期(NorP60)，而NgR蛋白质表达上调则较mRNA滞后，于出生后28天(№rP28)到达高峰并持续至成年期(NorP60)。早期单眼剥夺后，模型组(MDP28、MDP60)大鼠剥夺眼对侧视皮层中Nogo—A／Ng

5、RmRNA博士学位论文中文摘要及蛋白质表达较同日龄正常组(№rP28、NorP60)轻度减少，差异均无统计学意义(P>O．05)。此外，肋P28组与MDP60组大鼠比较剥夺眼对侧视皮层中Nogo—A／NgRmRNA及蛋白质表达水平差异无统计学意义(P>O．05)。免疫荧光组织化学方法检测显示Nogo_A及NgR蛋白在NorP60组及肋P60组大鼠视皮层II—III层，IV层，V层，VI层中均有表达，早期单眼剥夺可使肋P60组大鼠剥夺眼对侧视皮层中第1I—III层、IV层№go_A及NgR免疫阳性细胞密度较№rP60组明显下调。结论大鼠N

6、ogo-A／NgRmRNA及蛋白质自出生到成年期在视皮层中持续表达，且在视觉发育关键期后期达高峰，视觉发育早期单眼剥夺可致其表达下调，呈现出一定的视觉经验依赖性。因此，№go—A／NgR在视觉发育早期可能主要参与轴突生长及导向；同时调控视皮层可塑性关键期的终止，并对成年视皮层可塑性发挥一定的抑制作用。Ⅱ博士学位论文中文摘要第二章NgR拮抗剂NEPl一柏对成年单眼剥夺模型大鼠视皮层可塑性的再激活作用目的观察NgR拮抗剂NEP卜40对成年单眼剥夺模型大鼠剥夺眼对侧视皮层结构及功能可塑性再激活的影响，进一步阐明Nogo-A／NgR信号系统对成

7、年视皮层可塑性的调控作用。方法将120只新生SD大鼠随机分为两大组即正常组和单眼剥夺模型组。按给药方式不同，正常组又分为正常对照组(Nor)、正常+PBS治疗组(№r+PBS)、正常+NEP卜40治疗组(Nor+NEP)；单眼剥夺模型组又分为模型对照组(MD)、模型+PBS治疗组(MD+PBS)以及模型+NEP卜40治疗组(MD+NEP)，每组各20只。模型组大鼠于出生后21天缝合右侧眼睑建立单眼形觉剥夺模型，于45日龄时打开剥夺眼，对各组大鼠行闪光视觉诱发电位(F—VEP)检测，确定单眼剥夺模型建立成功后，对需给药的各组大鼠按组别给予

8、O．02mg／¨l的NEP卜40或O．01M的PBS侧脑室注药治疗，每天1次，每次10¨1，持续7天。于52日龄时对各组大鼠再次行F—VEP检测后处死动物，取侧脑室组织行尼氏染色明确给药部位，取左侧视皮层组