丙戊酸钠对急性髓系白血病细胞株hl-60增殖和凋亡的影响

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1、广东医学院硕士学位论文丙戊酸钠对急性髓系白血病细胞株HL-60增殖和凋亡的影响姓名：李庆华申请学位级别：硕士专业：@指导教师：杨志刚200905丙戊酸钠对急性髓系白血病细胞株珊枷增殖和凋亡的影响摘要【目的】研究丙戊酸钠(Ⅵ)A)对急性髓系白血病细胞株HL．60细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用，并初步探讨其可能作用机制。【方法l1．分别用不同浓度Ⅵ慵处理}玎j60细胞24h、36h、48h、60h、72h，采用CCK．8法检测各作用时阔点的细胞生K=抑制率。2．采用瑞氏染色光学显微镜观察Ⅵ)A作用后HL-60细胞形态的变化。3．用不同浓度Ⅵ)A处理印■60细胞48ll'应用流式细胞仪(F

2、CM)检测凋亡细胞比例及细胞周期分布的变化。4．用2．0mmol／LⅥ)A处理阳L．60细胞，分别于36h、48h采用细胞凋亡一EINALadder抽提试剂盒提取DNA，琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA片段化现象。【结果】1．不同浓度VPA处理HL．60细胞，随着药物浓度的增加及作用时间的延长，细胞的生长逐步受到抑制，呈明显剂量依赖性和时问依赖性趋势。各浓度组Ⅵ愎处理HL．60细胞24h、36h、48h、60h、72h，细胞的生长抑制率百分比(％)分另Ⅱ为：O．5mmol／LVPA：14．45士0．43、14．3士0．48、28士3．55、30．51士1．58、38．21士4．28

3、(不同时间点间比毫霓尸≮O．01)；1．Ommol／LVPA：14．49士6．84、20．56士1．37、37．43士1．98、43．17士1．9、57．77士2．21(不同时间点间比较尸．<0．01)；2．Ommol／LⅥPA：27．42士5．2l、45．77士1．11、77．16士6．34、86．83士4．95、89．96士2．02(不同时间点间比较尸．

4、I

5、期细胞比例逐渐减低，由处理前的(57．8钍4．64)％分别减少为(45．08士7．49)％和(12．32士5．61)％：细胞增殖指数(PI)，由处理前的(65：88士3：85)％分别：下降至(船：7：士5．5蜘和1(14．76士曼37)％(两两比较P’均<0．01)。PI染色后FCM检测的凋亡细胞亚二倍体峰由处理前的(0．28士O．3){％分别上升为(5．25士1．36)％和(16．58士1．39)％，与对照组相比差异有统计学意义伊

6、l／L剂量范围内，V】)A对HL一60细胞具有增殖抑制作用，且呈剂量、时间依赖性。2．1．0和2．Ommol／I，的Ⅵ)A作用48h，可以诱导}玎．一_60细胞发生凋亡，且随着Ⅵ)A浓度的升高，凋亡细胞百分率升高。3．1．O和2．O蚴。儿Ⅵ)A作用HL．60细胞48h，可使细胞周期分布发生明显变化，主要是发生Go／G1期阻滞，且Ⅵ)A浓度升高，细胞周期Go／G1期阻滞的趋势增加。提示V】)A对HL．60细胞的增殖抑制和诱导细胞凋亡作用可能与细胞周期阻滞有关。【关键词】丙戊酸钠；眦-60细胞；增殖；凋亡Eff．ectsofSodiumValproateonProliferationa

7、ndApoptosisofaclItenIyebidkukemiaceULiIIeHL-60ABSTRACT【Objecti、，elT0咖dy也ee触tS0fsodi啪vaJproalc(vPlA)∞龇删feB撕on觚dmeapo咖sisof∞lItemyeloidlellkemiacenli船皿-60，觚dtodi∞吣sthe御1titIlmormeCh撕sms．．【Methods】1)A缸删蜥也．Ⅵ协缸24h、36h、48h、60h、72k阻60cell舯啉也in