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时间:2018-12-30
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1、为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划酶的竞争性抑制作用实验报告 实验四酶的竞争性抑制作用一、目的要求: 通过实验加深对酶的竞争性抑制作用的了解二、实验原理: 与底物化学结构类似的抑制剂,能与底物竞争和酶活性中心的结合、抑制酶的活性,这种类型的抑制为竞争性抑制。竞争性抑制的程度由抑制剂与底物相对浓度决定。如果底物浓度不变,酶活性被抑制的程度随抑制剂的浓度增加而增强。反之,如果抑制剂浓度不变,则酶活性随底物浓度的增加而逐渐恢复。(来自:写论文网:酶的竞争性抑制作用实验报告) 本实验观察丙二
2、酸对琥珀酸脱氢酶的影响。琥珀酸脱氢酶的活性,在隔绝空气的条件下,可从加入的甲烯蓝褪色情况来观察。 COOHCOOH︳︳ CH2琥珀脱氢酶CH ︳+甲烯蓝——————→‖+甲烯白 CH2CH ︳︳ COOHCOOH三、实验材料1、试剂:目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 mol/L琥珀酸:称取琥珀酸,用蒸馏水配成约600ml,用5mol/LNaOH调pH至
3、,再加水至1000ml /L琥珀酸:用mol/L琥珀酸稀释10倍 mol/L丙二酸:称取丙二酸,用蒸馏水配成约600ml,5mol/LNaOH调pH至,再加水至1000ml /L丙二酸:用mol/L丙二酸稀释10倍/L磷酸盐缓冲液:取mol/LNa2HPO419ml,加蒸馏水至200ml(6)%甲烯蓝液体石蜡2、器材 小试管及试管架吸量管及滴管研钵四、实验方法 1、心肌匀浆的制备:取动物心肌1g,置研钵中,剪碎,研磨成匀浆,再加入/L磷酸盐缓冲液10ml,磨匀,备用2、取小试管5支并编号,按下表操作: 加入液体石蜡后,室温放置。观察各管甲烯蓝褪色情况。五、
4、结果处理 记录各管甲烯蓝褪色情况,并解释结果。六、注意事项 1.心肌要用新鲜的 2.注意各种试剂加入的顺序,混匀各管已加入的试剂后马上加入液体石蜡3.及时、仔细观察颜色变化 4.观察结果过程中,不要摇动试管,以免溶液与空气接触而使甲烯白重新被氧化变蓝七、思考题 在此实验基础上,如何设计实验来观察“增加底物浓度,酶的竞争性抑制作用可以降低或消除”的现象? 酶促反应动力学实验报告目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利
5、开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 杨恩原 实验目的: 1.观察底物浓度对酶促反应速度的影响 2.观察抑制剂对酶促反应速度的影响 3.掌握用双倒数作图法测定碱性磷酸酶的Km值 实验原理: 一、底物浓度对酶促反应速度的影响 在温度、pH及酶浓度恒定的条件下,底物浓度对酶的催化作用有很大的影响。在一般情况下,当底物浓度很低时,酶促反应的速度(v)随底物浓度[S]的增加而迅速增加,但当底物浓度继续增加时,反应速度的增加率就比较小,当底物浓度增加到某种程度时反应速度达到一个极限值(即最大速度Vmax)。底物浓度和反应速度的这种关系可用米氏方
6、程式来表示(Michaelis-Menten方程)即: 式中Vmax为最大反应速度,Km为米氏常数,[S]为底物浓度 当v=Vmax/2时,则Km=[S],Km是酶的特征性常数,测定Km是研究酶的一种重要方法。但是在一般情况下,根据实验结果绘制成的是直角双曲线,难以准确求得Km和Vmax。若将米氏方程变形为双倒数方程(Lineweaver-Burk方程),则此方程为直角方程,即:目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展
7、,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 以1/V和1/[S]分别为横坐标和纵坐标。将各点连线,在横轴截 距为-1/Km,据此可算出Km值。 本实验以碱性磷酸酶为例,测定不同浓度底物时的酶活性,再根据1/v和1/[S]的倒数作图,计算出其Km值。 二、抑制剂对酶促反映的影响 凡能降低酶的活性,甚至使酶完全丧失活性的物质,成为酶的抑制剂。酶的特异性抑制剂大致上分为可逆性和不可逆性两类。可逆性抑制又可分为竞争性抑制和非竞争性抑制等。竞争性抑制剂的作用特点是使该酶的Km值增大,但对酶促反映的最大速度Vmax值无影响。非竞争性抑制剂的作用
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