兔脑短暂缺血再灌注的功能mr与病理对照研究

兔脑短暂缺血再灌注的功能mr与病理对照研究

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1、中文摘要兔脑短暂缺血再灌注的功能MR与病理对照研究摘要目的:短暂缺血是严重危害人类健康的常见疾病,具有高发病率、高致残率及高复发率等特点。早期诊断是早期治疗的前提,而早期治疗的主要目的是挽救缺血半暗带(ischemicpenumbraIP),阻止IP发展为不可逆性脑梗死,因此确认IP和了解其演变规律,对指导临床治疗具有非常重要的意义。MR扩散加权成像(difusionweightedimaging,DWI),灌注加权成像(perfusionweightedimaging,PWI)和流动敏感交互式反转恢复(flow-sensitiv

2、ealtematingin—versionrecovery,FAIR)灌注成像技术序列的出现为IP的诊断提供了新手段,IP是否存在及其存在时间长短和范围的能力,提供直观、个性化的影像学信息。本课题旨在建立一种简单易行、梗死面积稳定的兔大脑中动脉阻塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)模型,在24h内进行DWI、PWI和FAIR研究以确定IP是否存在及其存在时间和范围,并与光镜、免疫组化相对照IP区脑组织相应的病理变化相对照,研究IP的影像学演变规律,从而为临床进一步制定治疗方案、预后、判断治疗效

3、果提供理论依据。方法:新西兰大白兔49只,雌雄不限,4~6月龄,体重2.5.3。5kg,由河北医科大学实验动物中心提供。本实验采用完全随机设计(completelyrandomizeddesign),将兔按随机数字表法分为缺血再灌注组和对照组,缺血再灌注组35只,对照组14只。各组根据不同时间点又分为缺血30min再灌注中文摘要O.5h.1h,2h,4h,6h,12h,24h,7个亚组,缺血再灌注组每个亚组5只,对照组每个亚组2只。新购兔在动物实验中心饲养一周后开始实验。术前禁食12d'时,自由饮水。2%的戊巴比妥钠按lml/kg

4、(20mg/kg)经耳缘静脉缓慢注射行静脉麻醉,仰卧位固定于兔台上,保持自主呼吸,颈部备皮后,消毒,铺单。在无菌条件下行颈部正中切口,分离皮下组织和肌层,暴露左侧颈总及颈内、外动脉,选择直径0.53ram导丝从颈总动脉至颈内动脉插入大脑中动脉遇阻即止,造成MCAO。并行MRI检查,DWI高信号,确定造模成功。并于缺血再灌注前15min行DWI检查和缺血30min/再灌注后0.5h、lh、2h、4h、6h、12h、24h行头颅MR扫描,扫描序列包括:Tl。FLAIR、T2.FLAIR、PROP.T2、DWI、PWI和FAIR扫描。应

5、用MR影像学、光镜、免疫组化法观察梗死体积、神经功能缺损、表观弥散系数比值(ADCR)、CytC释放和caspase.3蛋白表达。评价DWI、PwI和FAIR在IP诊断中价值。结果:(1)纳入49只,因造模失败、死亡等因素脱失6只,最终进入结果分析43只。(2)假手术组无神经功能缺陷,缺血再灌注组为2.28±0.47,二者比较有差异显著性fP<0.001)。(3)在缺血再灌注组,DWI异常在再灌注早期有短暂消失,但是在4—12h后再次出现,4.6h后T2WI出现高信号。(4)病灶中,t:,rADC,对照组维持在正常水平。缺血再灌注

6、组在早期rADC短暂恢复正常,但4.24h后再次出现下降。(5)病灶周边rADC,对照组维持正常水平。缺血再灌注组再灌注后0.5—2H未见明显变化,2-6H逐渐下降,6-24HADC值比率逐渐升高。各时间点病灶中,Q,rADC周边rADC比较,除0.5H、4H、24H有差异显著性(P

7、面积随时间的推移而逐渐减小,半暗带图上中心蓝色标记区为坏死区,周围绿色标记区为半暗带,红色标记区为灌注基本正常区,NEI图上由梗死中心向外周信号强度呈逐步递增。(8)Fair半暗带图上表现与PWI半暗带图一致。FAIR与PWI最大层面不匹配区比较除0.5h无统计学意义,其余各时间点比较均有统计学意义(P<0.05),但FAIR测得的面积比PwI较高。(9)光镜观察,假手术组神经元形态结构正常,缺血再灌注组:细胞间质水肿,细胞体肿胀,细胞结构严重破坏,部分神经细胞有坏死表现。假手术组仅可见少量CytC弄1]caspase.3蛋白表达

8、。缺血再灌注组病灶周围CytC的释放和caspase.3蛋白表达量显著多于假手术组(P

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