青蒿琥酯对哮喘大鼠模型治疗作用实验的研究

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1、内容摘要目的观察核因子-КBnuclearfactor-КBNF-КBToll样受体4Tolllikereceptor4,TLR4在抗原致敏支气管哮喘大鼠气道重塑模型中的表达情况运用青蒿琥酯进行干预观察NF-КBTLR4表达的变化探讨TLR4—NF-КB信号传导通路在气道重塑的形成过程中的作用以及青蒿琥酯对气道高反应性和气道重塑的影响及其作用机制方法将Wistar大鼠随机分为空白对照组哮喘模型组地塞米松治疗组青蒿琥酯低剂量中剂量高剂量治疗组等6组采用卵白蛋白OVA致敏的方法制备哮喘大鼠气道重塑模型治疗组采用雾化吸入的方式给药治疗在采集标

2、本后进行外周血白细胞分类计数和支气管肺泡灌洗液BALF白细胞分类计数HE染色检测肺组织病理形态学改变并利用PowerLab系统记录离体气管螺旋条对乙酰胆碱的收缩反应采用免疫组织化学技术RT-PCR技术检测核因子NF-КBP65蛋白TLR4-mRNA在哮喘大鼠支气管上皮的表达结果哮喘模型组的外周血白细胞分类计数和支气管肺泡灌洗液白细胞分类计数其嗜酸性粒细胞数目明显高于其他各组地塞米松组和青蒿琥酯各组嗜酸性粒细胞数目与哮喘模型组比较明显降低肺组织病理形态学检测显示哮喘模型组大鼠支气管粘膜皱襞增多肺泡隔增厚气道平滑肌的厚度明显增加粘膜下管壁及

3、肺泡间质均见有大量嗜酸性粒细胞浸润管腔狭窄有典型的气道重塑表现而地塞米松治疗组及青蒿琥酯各组炎症反应明显减轻粘膜结构完整无明显的气道重塑表现离体气管螺旋条对乙酰胆碱的收缩反应实验结果显示地塞米松组和青蒿琥酯中高剂量组的气管螺旋条对乙酰胆碱的收缩反应明显降低与哮喘模型组比较有显著性差异免疫组织化学技术检测结果显示哮喘模型组NF-КBp65的表达量明显高于空白对照组及其他各组经过地塞米松青蒿琥酯雾化吸入治疗后NF-КBp65的表达降低以高剂量组疗效最为明显RT-PCR技术检测结果显示哮喘模型组TLR4-mRNA的表达量明显高于空白对照组及其

4、他各组经过地塞米松青蒿琥酯雾化吸入治疗后TLR4-mRNA的表达降低以高剂量组疗效最为明显结论在抗原致敏支气管哮喘大鼠气道重塑模型中,NF-КBP65蛋白TLR4-mRNA表达均增高雾化吸入青蒿琥酯对抗原致敏支气管哮喘大鼠气道重塑和气道高反应性有着的干预和治疗的作用能够一定程度上抑制NF-КBP65蛋白IITLR4-mRNA在哮喘大鼠支气管上皮的表达干预TLR4—NF-КB信号传导通路同时也提示TLR4—NF-КB信号传导通路在气道重塑的形成和进展中起到了重要的作用关键词哮喘气道重塑青蒿琥酯NF-КBTLR-4IIIAbstractOb

5、jective:Inthisstudy,theexpressionofTolllikereceptor4(TLR4)andNF-κBwereobservedinthemodelofairwayremodelingofrats.FurthermoretheeffectsofartesunateonexpressionofTLR4andNF-κBwerealsoexamined.TheultimateistoexploreapossibleroleforTLR4/NF-κBpathwayinthedevelopingofairwayremo

6、deling.Methods:Ananimalmodelofasthmawasestablishedbyovalbumin(OVA)sensitizing-challengingWistarrats.Thirtysixratswererandomlydividedintosixgroups:thecontrolgroup,theasthmamodelgroup,thedexamethasonetreatinggroupandartesunatelowdose,midestdose,highdosetreatinggroups.Thean

7、ti-asthmaticeffectswereassessedbymeansofhemomyelogramofperipheralbloodandbronchoalveolarlavagefluid(BALF),andhistopathologicalexamination.Thecontractileresponseoftrache-spiral-stripexvivototacetylcholine(Ach)weredetectedthroughPowerLabsystem.Immunohistichemicalandreverse

8、transcriptase-polymerasechain(RT-PCR)techniquewereusedtodetectthetheexpressionofTLR4andNF-κBintheratbro