基于免疫反应的高灵敏检测方法的建立

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1、江南大学硕士学位论文在碳纳米管内，由于电子的量子限域所致电子只能在石墨片中沿着碳纳米管的轴向运动，因此碳纳米管表现出独特的电学性能。实验发现根据其直径和螺旋度的不同，它既可以表现出金属性又可以表现出半导体性。BrittoP．J．等【54】首先将碳纳米管制成电极并用于对神经递质多巴胺的电催化氧化，成功地探测了生物电化学反应，开辟了碳纳米管的应用。Amid等【55J利用多壁碳纳米管、Nation和cobalt(i13．5。nitrosalophen(CoNSal)复合物修饰碳糊电极，同时检测了复杂样品中尿酸和维生素C的含量。与传统的其它碳电极相比，在反应速率和导电性等方面，碳纳

2、米管修饰电极具有很大的优越性。1．2．2．2碳纳米管热学性质的应用纳米碳管是最好的导热材料，它依靠超声波传递热能，其传递速度可达到每秒l万米。并且发现，即使将纳米管捆在一起，热量也不会从一根纳米管传到另一纳米管，这说明纳米碳管只能在一维方向传递热能。并且，纳米碳管优异的导热性能将使它成为今后计算机芯片的导热板，也可用作发动机、火箭等各种高温部件的防护材料。1．2．2．3碳纳米管的电磁性能的应用在碳纳米管内，由于电子的量子限域所致，电子只能在石墨片中沿着碳纳米管的轴向运动，因此碳纳米管表现出独特的电学性能。它既可以表现出金属的电学性能又可以表现出半导体的电学性能。Ebbese

3、n等【56】人直接测量了多壁碳纳米管的电导，证明了碳纳米管金属性和半导体性的存在。碳纳米管具有优异的磁性能，新近发现的碳纳米管软磁材料在高频场中具有巨磁阻抗效应。其应用领域有功率变压器、脉冲变压器、扼流圈、互感器磁头和磁开关等。它将成为铁氧体的有力的竞争者【57】。1．3免疫印迹及电化学分析方法1．3．1免疫印迹方法免疫印迹法(Westernblotting)是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法，如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或

4、抗原检测等。免疫印迹法(immunobiottingtest，IBD亦称酶联免疫电转移印斑法(enzymelinkedimmunoelectrotransferblot,EITB)，因与Southcm早先建立的检测核酸的印迹方法Southernblot相类似，亦被称为Western-blot。二氨基联苯胺(DAB)、37，3’，57，57，．四甲基联苯胺(TMB)常被用于免疫印迹分析的染色【5引。但由于这些化学染料的的检测限太高，做微量复杂蛋白样品的分析时，受到很大的限制。于是化学与荧光发光染料开始在免疫印迹分析中得以应用，使检测限大大降低，免疫印迹分析的应用范围进一步扩大

5、。41．3．2电化学分析方法电化学作为化学的分支之一，是研究两类导体(电子导体，如金属或半导体，以及离子导体，如电解质溶液)形成的接界面上所发生的带电及电子转移变化的科学。传统观念认为电化学主要研究电能和化学能之间的相互转换，如电解和原电池。但电化学并不局限于电能出现的化学反应，也包含其它物理化学过程，如金属的电化学腐蚀，以及电解质溶液中的金属置换反应。由于电化学的高灵敏度，在各个领域中的应用越来越广。近年来，电化学与何种纳米材料相结合，应用于各种传感器的研制，在检测分析领域发挥着越来越重要的作用【59-60l。碳纳米管在电化学传感器中的应用在国外内研究比较多，但大多是在商

6、品化的电极上直接进行修饰，价格较高。1．4本课题研究内容、目标1．4．1研究内容1、将量子点与免疫印迹方法相结合，建立基于聚合量子点的免疫印迹新方法，对微量复杂蛋白样品进行分析，并与商品化的化学发光试剂盒进行了比较。2、将碳纳米管与电化学相结合，制备出碳纳米管．纸电极用以对日常饮用水中的藻毒素进行分析检测，建立了一种快速、操作简便、经济的电化学检测方法。并与传统的ELISA方法进行了比较。1．4．2研究目的1、对量子点进行修饰，增强其稳定性、增强其荧光强度。将修饰好的量子点应用于免疫印迹分析，降低该研究方法的检测限，扩大其检测范围，突破免疫印迹方法只能做半定量分析的瓶颈，使

7、其在微量、复杂蛋白样品的分析中得到更好的发挥。2、利用碳纳米管材料制备出碳纳米管．纸电极，作为工作电极，用电化学方法将其应用于日常饮用水中微囊藻毒素的检测分析，以得到一种快速、操作简便、经济的检测方法。5江南大学硕士学位论文2．1实验材料2．1．1实验药品碲化镉(CdTe)量子点蛋白A抗蛋白A抗体生物素化羊抗兔抗体牛血清白蛋tj(BSA)生物素(biotin)亲和素(avidin)硼氢化钠氯化钠磷酸二氢钠磷酸氢二钠Tween-20羧基修饰的单壁碳纳米管(SWNTs)微囊藻毒素抗体Nation聚苯乙烯磺酸钠(Pss)