小鼠qpct基因印记分析及其表达调控机制的研究

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1、国内图书分类号：Q951+.4学校代码：10213国际图书分类号：577密级：公开理学硕士学位论文小鼠Qpct基因的印记分析及其表达调控机制的研究硕士研究生：郭婧导师：吴琼教授申请学位：理学硕士学科：生物学所在单位：生命科学与技术学院答辩日期：2012年6月授予学位单位：哈尔滨工业大学ClassifiedIndex:Q951+.4U.D.C:577DissertationfortheMasterDegreeinScienceIMPRINTINGANALYSISOFQPCTANDEXPRESSIONPROFILEANDSTUDYOFTHEREG

2、ULATIONMECHANISMINMOUSECandidate：GuoJingSupervisor：Prof.WuQiongAcademicDegreeAppliedfor：MasterofScienceSpeciality：BiologyAffiliation：SchoolofLifeScienceandTechnologyDateofDefence：June,2012Degree-Conferring-Institution：HarbinInstituteofTechnology哈尔滨工业大学理学硕士学位论文摘要Qpct是一个潜在的肿瘤

3、抑制基因，编码谷胺酰肽环化转移酶前体。谷胺酰基环化酶(QC)是一个依靠Zn++的酰基转移酶，带有α-螺旋/β折叠片结构，能催化分子内的谷胺酰基的N末端环化形成焦谷氨酸。这种焦谷氨酸的快速聚与没有被修饰的AD淀粉样蛋白斑相比较有较长的生物半衰期以及较高的毒害神经的作用。本课题先通过NCBI信息学检索，报告并叙述此基因的基本信息。Qpct基因位于小鼠17号染色体上，基因组定位chr:79451246-79489583，共有7个外显子。为了阐明Qpct基因在小鼠胚胎发育阶段的差异，本课题首先利用基于SNP的PCR产物直接测序法分析了Qpct基因在胚

4、内和胚外组织的印记状况。同时利用原位杂交和实时定量RT-PCR技术检测该基因在胚期的时空表达模式。印记分析结果表明Qpct在E15.5小鼠的胎盘中特异性母本表达父本印记。全胚原位杂交表达分析表明Qpct基因在E9.5、E10.5和E11.5的脑中表达较强，在E10.5小鼠的听泡处检测到较强信号，而在E11.5小鼠中除听泡中表达，在心脏中也有较强表达。E15.5小鼠中其表达的部位增多，脑、舌、肝、肺、肠及背根神经节都有一定水平的表达；其中在脑中表达最强，垂体中检测到高表达，肝和背根神经节次之。在胎盘中，该基因在E9.5-E14.5前表达逐渐上升

5、而后又逐渐下降，在E15.5天中表达最高。12.5天胎盘原位杂交数据表明其在成胶质细胞层和迷路区高表达，而在15.5胎盘的蜕膜层高表达。然而对Qpct印记机制进行初步研究，其印记机制不受CpG岛调控，利用染色质免疫共沉淀(ChIP)技术证实其印记不受H3K9me3的调控。关键词：Qpct；印记分析；原位杂交；表观遗传调控；实时定量PCR-I-哈尔滨工业大学理学硕士学位论文AbstractQpctisapotentialtumorsuppressorgene,itcancodetheprecursorofglutamicacylcyclizat

6、ionenzyme(QC).QCisaZn++dependentacyltransferase,ithasaalphahelix/βfoldedpieceofstructure.QpctwhichcodeglutamicacylcyclasecancatalytictheN-teminalofglutamicacytobepyroglutamicacid(pE).OncepEisgatheredquickly,theroleofthepoisontothenervoussystemhasbeenactived.Recentresearchde

7、monstratedthatamyloidisthereasonofADdisease(Alzheimerdisease).ThroughthereportofNCBI,Qpctislocatedinthe17chromosomeofthemouse.Ithassevenexons,andthegenomiclocationischr:79451246-79489583.InordertoclarifythedifferenceexpressionofQpctduringthemouseembryonicdevelopmentstage,th

8、eimprintingstateisconfirmedintheembryoandextraembryonictissueswithSNP-basedPCRprod