ssr分子标记在杂交水稻品种纯度鉴定中的应用研究

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1、目录5．3试验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯315．4结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯315．5小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．346讨论与结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一356．1讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．356．2结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。36参考文

2、献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一36附蜀匙⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．43个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．45Vl引言我国是世界上第一个在生产上利用水稻(OryzaSativa)杂交优势的国家，目前我国杂交水稻播种面积占水稻播种总面积的60％左右，我省水稻播种面积约占51％。种子质量是

3、水稻生产的核心，俗话说“好种长好稻”，就是指种子质量直接决定水稻的收成。种子质量包括品种真实性与纯度、种子净度、种子水分、种子重量、种子生活力与发芽力、种子健康、种子活力等指标。但从近年来我国水稻种子质量抽查结果来看，品种纯度达不到要求是影响我国水稻生产的关键因素。品种纯度是我国种子质量的四大指标之一，种子销售前必须对生产的种子进行纯度鉴定【1之J。品种纯度是充分发挥品种优良遗传特性的重要因素，也在生产、加工、贮藏、销售等方面起着重要作用【lJ。目前，水稻品种纯度鉴定的方法包括田间检验和室内检验两种方法。田间小区种

4、植鉴定，是最直观的方法。但这一方法多采用异地反季田间鉴定，费时费工，需占用大量农田，多受环境条件制约，对于种子形态和性状特异性较小的真假品种很难区分，而且，异地反季种植杂株表现的生育期也有很大差异。室内检验主要包括：种子鉴定、幼苗鉴定、分子标记鉴定等。其中基于SSR分子标记的水稻品种鉴定方法是我国农业行业标准(NY／T1433．2007)已经推广的方法。SSR分子标记鉴定方法是当前杂交水稻种子纯度检测中使用最多的分子标记检测技术。主要是因为该方法具有数量丰富、多态性高、遗传上呈共显性、实验操作简单、结果稳定可靠等优

5、点。但在实际应用中DNA的提取和PCR过程繁琐，所以在杂交水稻纯度鉴定中很难大规模推广【2。3J。因此简化水稻种子DNA提取方法及PCR扩增条件，是提高SSR分子标记鉴定效率的必要途径。SSR分子标记在杂交水稻品种纯度鉴定中的应用研究1文献综述1．1杂交水稻品种纯度鉴定方法概述目前常见的杂交水稻品种纯度鉴定的方法有室外检测法和室内检测法。室外检测主要是指田间小区种植鉴定法，室内检验法主要包括种子形态鉴定法、幼苗鉴定法、分子标记鉴定法等。田间小区种植鉴定是传统、直接、可靠的纯度鉴定方法，它以长成的植株为研究对象，根据

6、植株在生育期间的形态特征和生物学特性为依据进行鉴定。鉴定的最佳时期是作物典型性状表现明显期，不同的作物典型性状表现时期不同，鉴定时间也不一致。此外，该方法多采用异地鉴定，所需周期长、费工占地，受季节限制，对当年生产的杂交种子纯度难以及时判断，给种子收购、定级、调用造成困难。另外，对由于环境等外界因素影响所引起的变异与品种遗传所产生的变异区分也存在困难【31。种子形态特征是比较稳定的性状之一，也是鉴定品种的重要依据。在杂交水稻种子形态鉴定中，可以根据谷粒形态、长宽、大小、稃壳和稃尖颜色、稃毛长短、稀密、柱头夹持率、变

7、色谷粒长度、宽度、形状、颜色以及精米心白大小和胚乳类型等性状，鉴定出杂交水稻的真实性与纯度。但是实际应用中发现真正能用于鉴定品种的形态特征非常有限，并且这些性状也只适用于品种间差异明显的品种鉴定，因此其实用价值并不大【3．5】。幼苗鉴定法一般有两个途径：一是给植株提供加速发育的条件，当幼苗达到适宜观察的发育阶段时进行鉴定，比如把水稻种子放在培养室中进行培养，当幼苗达到适宜观察的发育阶段时对全部或部分幼苗的芽鞘、中胚轴的颜色进行鉴定等；二是让植株生长在特殊的逆境条件下，根据不同品种对逆境的不同抗性来鉴别品种等。幼苗形

8、态鉴定法所用设备简单，操作容易，成本较低，鉴定周期短，人为因素影响小，结果相对准确可靠。但该方法也存在一些局限性：幼苗鉴定法能把两个遗传基础相近的种子在个体典型性的差异上进行鉴别，却难以在群体内将它们区分开来；另外，在基本原理相同的前提下，不同杂交种子的处理方法也不同，所以幼苗鉴定法亦适用于品种间有明显差异的鉴定【3‘5J。分子标记鉴定法根据对DNA多态性不