玉米种子中寄生真菌以及镰孢菌毒素的检测

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1、新疆农业大学硕士学位论文玉米种子中寄生真菌以及镰孢菌毒素的检测姓名：罗晓杨申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：王晓鸣;郭庆元20090601玉米种子中寄生真菌以及镰孢菌毒素的检测摘要植物种质资源的保存和利用是作物育种的重要基础。对玉米种子进行健康检测可以为玉米种质的安全保存提供依据。本研究采用PDA平板培养法对300份玉米种质携带的真菌进行了检测，共检测出11个属的真菌，主要是镰孢属、曲霉属、木霉属、毛壳孢属、青霉属、链格孢属、德氏霉属、黑孢霉属等；采用冷冻滤纸法和PDA平板培养法检测了24份玉米生产品种种质，

2、较为常见的真菌是轮枝镰孢、黑曲霉、黄曲霉、稻黑球孢。一轮枝镰孢Fusariumverticilioides是引起玉米穗腐病的重要病原菌之一。镰孢菌侵染玉米后，不但可以引起玉米穗腐病，还可以在玉米组织中产生各种镰孢菌毒素。这些毒素对玉米的种质和玉米的食用价值有严重的影响。其中，较重要的镰孢菌毒素有伏马毒素∞)和脱氧雪腐镰孢菌烯醇(DON)。含有这些毒素的玉米籽粒被人畜食用后直接影响健康，同时玉米种子中的毒素还会影响种质的安全保存。本研究选用一对引物FumSF／FumSR检测镰孢菌菌株的产生FB毒素的化学型，在产生FB毒素

3、的菌株中能稳定的扩增出845bp的DNA片段；用3对引物Tril3F／Tril3R、Tri5F／Tri5R、Tox5．1／Tox5-2检测产生DON毒素的轮枝镰孢茵菌株，能较稳定地扩增出799bp、544bp、658bp的DNA片段，引物Tril3F／Tril3R的扩增效果最好。本研究用酶联免疫吸附反应(ELISA)对轮枝镰孢茵菌株和玉米种质中产生的FB、DON和T-2毒素的化学型进行了检测。检测了不同保存条件下玉米种子中FB、DON的含量，发现毒素在保存过程中受保存时间和保存条件的影响。种子干燥处理后两种毒素的含量均

4、下降，这两种毒素含量在此后的18个月内增加，但DON毒素含量在24个月时降到最低值。从24个月到36个月之间，毒素含量整体呈降低趋势，但是个别玉米品种的毒素含量有较大程度的升高；一直到36个月时，毒素含量才回升到一个稳定值。关键词：玉米种子；镰孢菌毒素；分子检测DetectingParasitizedFungiandMainFusariumToxinsinMaizeSeeds。AbstractTheconservationandutilizationofplantgerrnplasm他s0峭arethefoundati

5、onofcrop嘲in吕SeedhealthtestingofmaizeseedslaythebasisforsafeconservatiorLAtotalof300maizeaccessionsweflgusedtodetectseed-born缸19ibyagarplate．Elevengeneraoffungiweredeteeed,includingFusarium,Aspergillus,Trichodetma,Chaetomium,Penicillium，Alternaria,Drechslera,Nigr

6、osporaeta1．Theseedhealthtestingwasconductedin24commercialnKIizevarietiesusmgPDACtllttl他plateandblottermethods．Fusar／wnverticilioides,Aspergillusniger,Aspergillus舢，Nigrosporaory'勰werefrequentlydetectedintheseseed-bom缸西．Fusariumverticillioidesisoneoftheimportantpa

7、thogensthatc卸Jsee缸rotandotherdiseasesinmaize,producingtoxinsinmaizegrowthandconservationstage．Thesetoxins,forexample,fumonisins(FB)anddeoxynivalenol(DON)producedbyFusar／wnspecies,haveseriouseffectonseedqual时andcommercialvalue,damagingtothehealthofhumanandlivesto

8、ck,andtheegnversationofseeds．OnepairofpublishedprimersFumSF／Fum5Rwe他usedtodetectFB-chemotypesofEverticillioides．InFverticillioidesproducingFB．845bpfragmentwereamplifi