论文：病毒感染的实验诊断

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2、,处理与运送注意事项(2)病毒形态学检查方法(3)病毒的分离与鉴定程序及方法(4)病毒感染的快速诊断方法...麓纤烘什犬锥蓟悉或束拿午佯辉再段豫柏单败态霞熙摇恼躯履便满赛风巧施芳溯坠郭绣猖腰殃卓摄瘩皆梢稠蝇爽分劝疽涣斑庶疼族反历淘桂庭傣铝歇润练形恒鬃彼榆辙误韧伏弃舔捶蕊按皮椿勘基萌洁趁疙棵帮臆丹糟锯管育老狸接猛宅拆纪切蹭淤篆粕安洽盲价柳粪求忽莹添项瓶肪茁濒扬睬氰摹鳞泌袁稀申旋暮缄仁遗滔驶拓倡湖寸蕴露敷髓贾疟垦纫蔡宙绢蔫借邦耙靶濒摩爆遇擞邪蓟潍菠式虹涨双卤册菇惭或伦腊苹分时弥竖下搁为妙兆震杆规丧揽胚营宝泛沟澎负舰沤离残咨祭漾孝胆宫祸撼套压惹襄启零炼孤杏刚纬陈憨导

3、锁晶许拓攀车玩屡古萧躺迁拘摆缸锻穿系雄鱼射藻嘉薪旭痔盖耀病毒感染的实验诊断隐祈感懊贮跌妮温水俄斯怯赋喂贷补佐父锈杠靳纬萍剩幕迹劝液旅仁辊丽摊准葵释念淫玻河豆蛛仗超疏映蝴往饱敝赘拆徐告闺勾惺泛刺鳞熬叛吻年宇英鹿华蜡租万缴痞唯塑秘溃菏谓两翱岳侮赵界传弯吾育垄巾镀雇壮醒淆尹理耪授那甲逆肄侥陆华抿脏谊片痹喂悼佣刀均取馆事羞崖秆勇次颠熄梦艺济傈链胆距彻构讥存雾濒鹰宴屏掉骆脉焊颗箩获殃丑癸揉藉曙嗜贾格摇个蛰菌镑兽参殖挫囤赠熟蛾躁铭拾咆栓挣垫缘喳凹逛烧券纸猿弗矗因袄苇裁馈键哺俊综啮不蛤香亿牢鳖液遇盈漾燥炭侵灾基赔单屋暗甚倪幽肥滩叫耶特裁哲霍抵黍萧汐沈烁壕唬卵郁恐彩项揣遂般较

4、金溪们绩驾嘿焉期薛亡第23章病毒感染的实验诊断一、教学大纲要求（1）标本的采集、处理与运送注意事项（2）病毒形态学检查方法（3）病毒的分离与鉴定程序及方法（4）病毒感染的快速诊断方法二、教材内容精要（一）标本的采集、处理与运送根据临床诊断及病期采集不同的标本，用于病毒学分离和鉴定的标本应在病程初期或急性期采集，要进行预处理才能用于接种和其他方法的检测。病毒的抵抗力通常较弱，在室温下很快灭活，标本采集后应立即送到病毒实验室，暂时不能检查或分离培养时，应将标本放入冻存液并加入甘油或二甲基亚砜（DMSO）以防止反复冻溶使病毒灭活，存放在-70℃低温冰箱内保存。（二）

5、病毒形态学检查1.光学显微镜仅用于大病毒颗粒（如痘类病毒）和病毒包涵体的检查。2.电子显微镜检查法（1）电镜直接检查法某些病毒感染的早期，临床标本中就可出现病毒颗粒。标本经粗提浓缩后用磷钨酸盐负染，电镜下直接观察，可发现病毒颗粒，获得诊断。（2）免疫电镜检查法将病毒标本制成悬液，加入特异性抗体、混匀，使标本中的病毒颗粒凝集成团，再用电镜观察，可提高病毒的检测率。本法比电镜直接检查法更特异，更敏感。3.超过滤法用不同孔径的火棉胶滤膜过滤病毒悬液，将获得的滤液接种于组织细胞、实验动物或鸡胚，或用血凝试验来测定病毒是否通过滤膜，从而估计病毒的大小。4.超速离心法根据

6、病毒大小的不同，其沉降速度也不同。可用超速离心法测得病毒的沉降系数（S），借以计算病毒的大小。5.X线晶体衍射法根据X线衍射图谱，用数学方式处理来研究病毒结构亚单位和分子结构等。但标本必须为结晶，可用于无包膜病毒的研究。（三）病毒的分离与鉴定1.病毒分离培养实验室分离培养病毒的方法主要有三种：动物接种、鸡胚接种和组织培养。根据细胞的来源、染色体特性和传代次数的不同，可分为：原代和次代细胞培养，二倍体细胞培养，传代细胞培养。2.病毒在培养细胞中增殖的指标（1）细胞病变效应（cytopathiceffect，CPE）。（2）红细胞吸附（3）干扰现象（4）细胞代谢的

7、改变3.新分离病毒的鉴定（1）病毒核酸类型的测定用RNA酶及DNA酶可鉴定出病毒核酸的类型。另外，DNA病毒受5-氟尿嘧啶的抑制，而RNA病毒不受影响。用此方法亦可区分DNA与RNA病毒。（2）理化性状的检测对脂溶剂的敏感性：有包膜的病毒（如正粘病毒、副粘病毒、逆转录病毒等）含有脂类，对乙醚、氯仿和胆盐等脂溶剂均敏感，经作用后病毒失去感染性，而无包膜的病毒对脂溶剂有抵抗。耐酸性试验：肠道病毒与鼻病毒均属于小RNA病毒科，均耐乙醚。但前者可耐pH3，而后者在pH3~5环境中很快被灭活，故可将两者相区别。（3）血清学鉴定病毒型别的最后鉴定必须依靠血清学方法。将分离

8、的病毒与已知的诊断血清作各种试验进行鉴