抑菌活性乳酸菌的筛选及其生物学特性研究

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1、项目编号山东大学大学生科技创新基金项目申请书项目名称：高抑菌活性乳酸菌的筛选及其生物学特性研究申请者：闫鹏程指导教师：孔健教授所在学院：生命科学院申请金额：2000元申请日期：2006.6联系电话：88365408电子信箱：shuidian224311@163.com山东大学大学生科技创新基金项目立项组织工作办公室二○○六年六月制一、基本情况1、项目情况项目名称高抑菌活性乳酸菌的筛选及其生物学特性研究项目性质□小发明、小创作、小设计等●基础性研究□应用性研究□开放实验室□创新性研究□社会调研□其它科技实践项目□国家级重点实验室项目□省部级重点实验室项目合作情况●个人项

2、目□集体项目项目类别□文学类●理学类□工学类□医学类项目来源□自主选题●教师指导选题□教师课题子项目□企事业单位委托课题起止时间自2006年6月至2007年6月申请金额￥2000元2、申请者（集体项目代表）情况姓名闫鹏程性别男年龄21民族汉学院生命科学院年级2004专业生物科学兼职电话883654083、项目组成员情况姓名性别年级专业分工每周工作时间签字闫鹏程男2004生物科学菌种分离20小时王清涛男2004生命基地抑菌活性测定20小时黄彬男2004生物科学菌种培养20小时4、指导教师情况姓名孔健职称教授专业微生物学E-mailkongjian@sdu.edu.cn学

3、院生命科学院电话0531-88364384转8401签字二、研究方案1、研究目的和意义：乳酸菌一般指的是革兰氏染色阳性，过氧化氢酶反应阴性，可发酵碳水化合物主要产乳酸，兼性或专性厌氧菌。乳酸菌可以产生多种抑菌活性物质，包括细菌素，PHA，环肽化合物等，特别是乳酸菌细菌素以其安全、高效、无毒副作用和无抗药性等优点，引起广大从事食品防腐剂、饲料添加剂以及医药开发人员的研究热情，成为国内外研究的热点。但在细菌素的研究中仍存在许多有待解决的问题，主要有:(1)细菌素的产量普遍较低;(2)细菌素的抑菌谱较窄，大部分细菌素只对革兰氏阳性菌有作用，而对革兰氏阴性菌、酵母菌和霉菌没有

4、抑制作用;(3)细菌素在不同食品介质中的溶解性和稳定性各异，而且只有在偏酸的环境中才有活性。因此，筛选具有抑菌活性高，抑菌谱宽的细菌素产生菌株仍然是国内外细菌素研究的主要内容之一，具有重要的理论和实践意义。申请小组要申请的项目就是从乳酸菌的自然生境(如泡菜、动物肠道、西红柿表皮和奶制品等)中筛选乳酸菌，再从中筛选产高活性，宽抑菌谱的抑菌物质的菌株。并对其抑菌物质进行分离纯化。对乳酸菌的基础理论研究和防腐剂的改良等实践应用都有重要的现实意义。2、研究内容与方法：研究内容：从乳酸菌的自然生境(如泡菜、动物肠道、西红柿表皮和奶制品等)中筛选乳酸菌，再从中筛选产高活性，宽抑菌

5、谱的抑菌物质的菌株。并对其抑菌物质进行分离纯化。研究方法：从自然生境(如泡菜、动物肠道、西红柿表皮和奶制品等)中取菌种先在MRS液体培养基中进行富集培养．然后采用改良的MRS固体培养基进行稀释平扳法分离，挑取适合菌落按常规划线法进行纯化，获得纯苗。利用指示菌对纯化得到的菌种进行抑菌实验，验证其抑菌活性，从中筛选出高活性，广抑菌谱的菌株。最后对其产生的抑菌物质进行分离纯化。3、研究目标与结果：第一筛选出产高活性，宽抑菌谱的抑菌物质的乳酸菌的菌株。第二得到乳酸菌抑菌活性物质的纯化物。4、研究进度及安排：2006.07～2006.11进行菌种的培育和筛选2006.11～20

6、07.6进行抑菌物质的提取与纯化5、经费来源及使用计划：经费主要来源于学校的项目基金，部分来源于指导老师。经费主要花销于军中的培育筛选和抑菌物质的提取纯化。三、当前国内外同类课题研究水平概述乳酸菌是存在于人和禽畜肠道、许多食品、物料及少数临床样品中的一大类能发酵糖产生大量乳酸的兼性厌氧菌。广泛应用于医药、食品等工业。主要包括乳杆菌(Lactobacillus)、乳球菌(LactococcuS)、明串珠菌(LeuCOYIOStOC)、片球菌(Pediococcus)、链球菌(Strepto—COCCUS)、肠球菌(Enterococcus)、双歧杆菌(Bifidobac

7、teri—um)和肉食杆菌(Carnobacterium)等属。许多乳酸菌除产生乳酸、乙酸和双乙酰外，还可产生一些具有抑菌或杀菌作用的细菌素。乳酸菌细菌素以其安全、高效、无毒副作用和无抗药性等优点，已经引起广大从事食品防腐剂、饲料添加剂以及医药开发人员的研究热情，成为国内外研究的热点。但随着其应用的推广，以及不同行业对细菌素性质要求的不断提高，在细菌素的研究中仍存在许多有待解决的问题，主要有:(1)细菌素的产量普遍较低;(2)细菌素的抑菌谱较窄，大部分细菌素只对革兰氏阳性菌有作用，而对革兰氏阴性菌、酵母菌和霉菌没有抑制作用;(3)细菌素在不同食品介质