河南省部分地区传染性法氏囊病病毒分离株的分子流行病学研究

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1、河南农业大学硕士学位论文河南省部分地区传染性法氏囊病病毒分离株的分子流行病学研究姓名：张宇耕申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：崔保安；李新生201205河南农业大学2012届硕士学位论文摘要传染性法氏囊病(Infectiousbursaldisease，IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectiousbursaldiseasevirus，IBDV)弓[起的急性接触性传染病，该病毒IBDV主要侵害雏鸡的中枢免疫器官一法氏囊，导致淋巴细胞凋亡，引起鸡只长期的免疫抑制。该病是危害世界养禽业的主要传染病之一。目前国内外防治该病的主要方法是使

2、用弱毒苗和灭活苗免疫鸡群。近年来IBDV变异株与超强毒株的出现，导致免疫失败常有发生。由IBDV侵染家禽所引起的传染性疾病长期影响着河南养鸡业的经济增长。而有关河南省内的IDBV分子流行病学调查一直都是空白。因此，分离与鉴定IBDV河南流行株，从分子水平了解病毒毒力的变异情况，有助于追踪IBDV的遗传进化，帮助临床上正确地使用疫苗，建立有效的防治措施。为了解IBD在河南省区流行情况，本研究从河南郑州、南阳、焦作等不同地区采集7l份疑似病料，通过接种9．11日龄SPF鸡胚绒毛尿囊膜(chorio．allantoicmembrane，CAM)，盲传数

3、带后，收集病变尿囊膜并经琼脂免疫扩散试验、SPF鸡回归试验等实验方式初步筛选并分离了6株IBDV病毒株。为了进一步对这6株lBDV病毒株分子特征研究，分别采用逆转录酶一聚合酶链式反应(reversetranscriptasepolymerasechainreaction，RT-PCR)扩增了这5株病毒株的VP2基因并对其进行分析，并对其中一株IDBV病毒株进行了全基因组扩增分析，序列分析表明IBDV-HN．04株CU．1同源性达99％，病毒具有弱毒株特征氨基酸，与中国其他分离株同源性在94．99％之间，对比氨基酸序列得出HN．04共含有76(G)

4、、271(T)、331(R)、408(C)、542(V)、555(6)、703(R)、900(G)矛II974(E)等9个特征氨基酸。通过对病毒的序列分析指出，目前在河南省流行的IBDV毒株同时存在经典株，变异株，超强株，以超强株为主，与日本毒株同源性较高，与欧洲株以及美洲株同源性较低，同时，病毒流行情况十分复杂，出现了不同毒力的毒株间的重组。这些结果为这些结果为河南传染性法氏囊炎病毒的分子流行情况、鉴别诊断及防治提供技术依据，为了解和防治该病提供了一定的基础。关键词：传染性法氏囊炎；VP2基因；全基因组；系统进化树河南农业大学2012届硕士学位

5、论文TheMolecularEpidemiologyofTheIsolatesoflnfectiousBursalDiseaseVirusfromSomePartsofHenanProvincDlseaseVlrUSmomet-lenanrrovncesSupervisor：Prof．CUIBaoanMasterCandidate：ZhangYugengAbstract：InfectiOtisbursaldisease(IBD)isanacute，highlycontagiousviralinfectiousofyoungchickenscaus

6、edbyinfectiousbursaldiseasevirus．SincethebursaofFabficiusiSimportantorgantothematuratioofB-lymphoidcells，amountofBcellsinthelymphoidfollicleofbursaFabriciusiSlytic，atrophofbursacausingimmunosuppression，leadingtoincreasedsusceptibilitytootherpathogensanddecreaseimmunologicalre

7、sponsetovaccine．Inrecentyears，theemergenceofwIBDVandvIBDV,subtypediversityandantigenicvariationthatpromotethenewfeaturesoftheincidenceandprevalenceofthisdiseaseandbringgreateconomiclossestothepoultryindustry．Inordertounderstandthemolecularepidemiologyofinfectiousbursaldisease

8、virusinHenanProvince，wehavebeensequencingwholegenomenucleotidesequen