急性高眼压对大鼠血-视网膜屏障的影响

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1、中南大学硕士学位论文急性高眼压对大鼠血-视网膜屏障的影响姓名：张全鹏申请学位级别：硕士专业：神经生物学指导教师：黄菊芳;童建斌20100501硕士学位论文中文摘要摘要目的：从视网膜的微环境入手，研究急性高眼压对大鼠BRB的影响，探讨急性高眼压后大鼠BRB损伤的时空特征以及视网膜HIF．1a的表达与BRB损伤的关系。方法：144只SD大鼠随机分为正常对照组、实验对照组和实验组。实验组大鼠制作高眼压模型，实验对照组大鼠施行假手术；之后分别存活3h、12h、ld、3d、7d。其中108只大鼠在处死前2小时大隐静脉注射3％伊文思蓝(EB)，用共聚焦显微镜检测视网膜铺片和切片

2、中EB的分布；用分光光度计定量视网膜EB的含量。36只大鼠用免疫组化方法检测视网膜HIF．10t的表达。结果：在正常视网膜中偶见EB红色荧光斑点，在急性高眼压后视网膜中可见EB红色荧光斑点主要分布在节细胞层的毛细血管周边，3h、12h和1d时EB红色荧光斑点还见于内核层的毛细血管周边。视网膜中央部在3h时EB红色荧光斑点开始增多，12h时EB红色荧光斑点最多，然后逐渐减少；视网膜周围部在3h时EB红色荧光斑点最多，然后逐渐减少；视网膜周围部先于中央部出现EB渗漏高峰。进一步定量检测显示和正常对照组相比，视网膜中央部在3h时EB渗漏量开始增多，12h时EB渗漏量最多，

3、以后逐渐减少，7d时接近恢复正常；视网膜周围部在3h时EB渗漏量最多，以后逐渐减少，7d时接近恢复正常；视网膜周围部先于中央部出现EB渗漏量峰值。免疫组化结果显示视网膜HIF．1a在正常对照组未见阳性表达，在HIOP后3h可见HIF．1a阳性产物增多，12h时达高峰，然后1d、3d、7d逐渐减少；从视网膜中央部和硕士学位论文中文摘要周围部HIF．1Q表达情况看，在3h和1d时视网膜周围部HIF—la阳性产物明显比中央部多；HIF．1a阳性产物主要见于节细胞层，3h、12h时HIF．1a阳性产物还见于内核层。结论：1．大鼠BRB在急性高眼压后的早期损伤更明显，晚期逐渐

4、恢复；视网膜周围部BRB先于中央部出现严重破坏；BRB损伤主要分布于节细胞层。2．急性高眼压后HIF．1a的表达在早期明显上调，晚期逐渐恢复，其表达的时空特征与BRB损伤的时空特征一致，提示急性高眼压后HIF．1a的表达上调可能与BRB的损伤有关。关键词：急性高眼压，伊文思蓝，缺氧诱导因子．1a，血．视网膜屏障，视网膜节细胞Il硕士学位论文英文摘要ABSTRACTOBJECTIVE：TostudytheimpactofAHIOPonBRBtofinditsspatialandtemporalfeaturebasedontheretinalmicroenvironme

5、nt，andinvestigatetherelationshipbetweentheexpressionofHIF—laandBRBinjury．METHOD：144SDratswererandomlydividedintonormalgroups，experimentalcontrolgroupsandexperimentalgroups．RatsofexperimentalgroupsweremadeintoAHIOPmodelandratsofexperimentalcontrolgroupswereexecutedtheshamoperation，thens

6、urvivedfor3h，12h，ld，3d，7drespectively．3％Evansblue(EB)wasinjectedintothesaphenousveinof108rats2hoursbeforetheratswerekilied．ThedistributionofEBintheretinalwholemountandretinalslicewasobservedbyusingconfocalmicroscopyandtheEBcontentofretinawasmeasuredbyusingSpectrophotometer．TheHIF-laexp

7、ressioninrat’Sretinawasdetectedwithimmunohistochemistryontheother36rats．RESULTS：EBredfluorescencespotswereoccasionallyseeninthenormalretina，whichwasmainlydistributingintheganglioncelllayeraroundcapillariesfollowingAHIOP．In3h，12handlditwasalsofoundintheinnernuclearlayersurroundingthec