人脐带间充质干细胞定向分化心肌样细胞的研究

人脐带间充质干细胞定向分化心肌样细胞的研究

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1、单位代码:10472学号:1117003中图分类号:028密级:公开拓卿搿乎纨硕士学位论文人脐带间充质干细胞定向分化心肌样细胞的研究TheResearchontheDifferentiationofHumanUmbilicaICordDerivedMesenchymalStemCellsintoCardiomyogenicCells研究生姓名何夏里笠TheResearchontheDifferentiationofHumanUmbilicalCordDerivedMesenchymalStemCellsi

2、ntoCardiomyogenicCellsAThesisSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate:He、№nliSupervisor:Prof.XuZhenpinProf.LiYonghaiSchoolofLifeSciencesandTechnologyXinxiangMedicalUniversity新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集

3、体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:俪乃翌日期:wff年占月f日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权新乡医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“4”):1

4、.保密口,在一年解密后适用本授权书。2.不保密函作者签名:俪乃里日期:研中年新虢删畸嗍冽伊6月臼f日/日目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一11结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一17讨i仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯一26参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..31综述:人脐带问充质干细胞诱导分化心肌样细胞及其应用的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯..34附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..46攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..47致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯..49新乡医学院硕士学位论文人脐带间充质干细胞定向分化心肌样细胞的研究摘要背景心脏疾病的干细胞治疗已成为人们关注的焦点。干细胞治疗心脏疾病及其作用机制亟待解决。在干细胞诱导分化心肌方面已多有报道,但大多集中在动物来源的间充质干细胞以及胚胎干细胞。近年来,由于人脐带间充质干细胞(Humanumbilicalcordmysenchymalstemcells,HUCMSCs)来源丰富,扩增和分化能力强,免疫原性较低,不涉及伦理问题,成为诱导分化心肌的热点,但使用缬沙坦(valsartan)、胎儿心脏组

7、织匀浆(Humanfetalhearttissueextracts,HFHTE)诱导人脐带间充质干细胞未见报道。目的探讨缬沙坦、胎儿心脏组织匀浆诱导人脐带间充质干细胞体外定向分化心肌样细胞(cardiomyogeniccells)的可行性,以及二者之间是否存在相互作用。方法1.细胞培养:HUCMSCs使用生长培养液(含有10%胎牛血清+100U/mL青霉素+100I,tg/mL链霉素的低糖DMEM培养液)在饱和湿度、37。C、5%C02的培养箱内培养,每3d换液一次。当细胞融合达N80~90%时,使用0.

8、25%胰酶(pH7.4)消化细胞,按照l:2的比例进行传代培养。2.细胞诱导和分化:采用以下三种方案对HUCMSCs进行诱导:(1)生长培养液+valsartan诱导24h,之后换为生长培养液分别继续培养至1W、2W和3w;(2)生长培养液+HFHTE诱导3d之后换为生长培养液分别继续培养至1w、2W和3w;(3)生长培养液+valsartan+HFHTE诱导3d,之后换为生长培养液分别继续培养至1w、2W和3W。3.通过Re

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