不同种群罗氏沼虾遗传多样性的研究

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1、暨南大学硕士学位论文不同种群罗氏沼虾遗传多样性的研究姓名：钟金香申请学位级别：硕士专业：水生生物学指导教师：林小涛20020101独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得瑗瀚女曾或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：婶名詹签字日期：妒≯年f月¨日学位论文版权使用

2、授权书本学位论文作者完全了解蟹旬j≮警有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权噔献髻可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：铆岔杏签字目期：加)年f月to日学位论文作者毕业后去向工作单位：通讯地址：差墨著翥i娥签字日期：妒眸r为医一目电话邮编摘要采用RAPD技术，对省级斗门罗氏沼虾良种场提供的四个种群的罗氏沼虾：

3、广东本地人工多代繁殖种群(G)、自江苏吴江引进的种群(J)、自上海水产研究所引进的种群(S)以及自越南引进的野生种群(Y)的遗传多样性进行了研究。各种群罗氏沼虾个体基因组DNA的提取和纯化：采用SDS．蛋白酶K法进行提取，利用酚-氯仿一异戊醇进行纯化。对所得到的DNA进行检测，．20℃保存。利用OPM组和OPB组随机引物对所提取的罗氏沼虾各种群的混合DNA和个体DNA进行扩增筛选，最后得到13个可用于正式扩增的引物。用下列反应条件：反应体系总体积为2591，其中含10xbuffer2．51al(含2．0mm

4、ol／L镁离子浓度)，200／．tmol／LdNTP(脱氧核苷三磷酸)，1．5个单位Taq酶和20ng左右模板DNA。用下列PCR反应程序：反应过程包括47个循环：94'C变性40s，36"C退火50s，72℃延伸90s。首次循环前于944C预变性5min，最后一个循环后于72℃延伸5rain。结果表明，用SDS．蛋白酶K法可以从罗氏沼虾的肌肉组织中提纯到较高质量的DNA，可以用于RAPD分析，所选用的RAPD反应体系和PCR反应程序可扩增出很好的RAPD带，藿复性好。结果还表明在研究罗氏沼虾的遗传多样性方

5、面RAPD是一种快捷而较有效的方法。对于四个种群的种群内个体问遗传距离和Jaccard遗传相似度进行比较，结果发现，越南种的种群内个体间遗传距离最大，江苏种群次之，上海种群内个体间遗传距离较小，广东本地种群内个体间的遗传距离最小。而遗传相似度的排序则相反。对四个种群间的遗传距离和遗传相似度进行比较，结果发现，各种群间的平均遗传距离为O．13，其中广东本地种群与其它几个种群间的遗传距离最远。而种群问的平均遗传相似度为79‘3％。关键词：罗氏沼虾，种群，遗传多样性，RAPDAbstractInordertoha

6、veasightintogeneticdiversityofMacrobrachiumrosenbergii，RandomlyAmplifiedPolymorphicDNA(RAPD)analysiswasappliedtothefourPopulationscarriedfromMacrobrachiumrosenbergiiwell-bredfarm，whichwerethefilialgenerationofthelocalpopulationbyartificialreproduction(G)，t

7、hepopulationintroducedfromWuJiangofJiangshu(J)，theoneintroducedfromShanghaifisheryInstituteandonenaturalpopulationintroducedfromVietnam(Ⅵ．Thepurificationofeachindividual’sgeneDNAfromthefourpopulations：extracttheDNAwithSDS—proteinaseK，thenpurifythemwithhydr

8、oxybenzene-chloroform—lsoamylalcoh01．ThepurifiedDNAwastestedbyelectrophoresisandthenholdedin20"Cbelowzero．Thirteen10-metprimerswereselectedfrom40primers．Thefollowingconditionforamplificationwasusedinthisstudy