免疫磁珠分离技术用于弓形虫速殖子纯化的研究

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1、目录中英文词汇对照表.......................................................................................1中文摘要..........................................................................................................2英文摘要..................................................................................

2、........................4前言.................................................................................................................7材料与方法......................................................................................................9实验方法..........................................

3、..............................................................13结果...............................................................................................................…22讨论……………………………………………………………………..….…27结论…………………………………………………………………..……….30参考文献………………………………………………………..…………...31附录一（个人简历）

4、……………………………………………..……...36附录二（致谢）…………………………………………………..………..37附录三（综述）…………………………………………………..……..38安徽医科大学硕士学位论文中英文缩略词对照表英文缩写英文全称中文全称SDSSodiumDodecylSulfate十二烷基硫酸钠PAGEPolyacrylamideGelElectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳IHAIndirecthemagglutination间接血凝APSAmmoniumPersulfate过硫酸胺bpbasepair碱基对EDTAethylenediaminetetr

5、aaceticacid乙二胺四乙酸PBSPhosphate-BufferedSaline磷酸盐缓冲液ODOpticaoDensity光密度TEMEDN,N,N',N'-TetramethylethylenediamineN,N,N',N'-四甲基乙二胺rpmrevolutionsperminute每分钟转速McAbmonoclonalantibody单克隆抗体kDakilo-dalton千道尔顿Kbkilobase千碱基对Tristrishydroxymethylaminomethane三羟甲基氨基甲烷LSLargeCellSeparationColumns大细胞分选柱1安徽医科大学

6、硕士学位论文免疫磁珠分离技术用于弓形虫速殖子纯化的研究硕士研究生楼研导师沈继龙教授安徽医科大学病原生物学教研室；安徽医科大学病原生物学省级实验室；人兽共患病安徽省重点实验室（安徽医科大学）中文摘要目的在弓形虫和弓形虫病的基础和临床研究中，以及免疫诊断的抗原制备中，如何从弓形虫感染的宿主标本中快速获得高度纯化的弓形虫速殖子，尽可能去除宿主细胞成分的污染，又尽可能避免对虫体产生机械或者化学的损伤，不影响其活性与毒力显得尤为重要。目前使用的各种方法纯化产物尚有不同程度的宿主细胞的污染，或者回收率较低。因此，需要探讨一种新的纯化弓形虫速殖子的方法。用免疫磁珠分离技术分选弓形虫速殖子，以去除宿

7、主细胞成分，并尽可能对虫体的生物学特性无不良影响，为弓形虫与弓形虫病的基础与临床研究提供技术基础。方法将采自流浪猫的心、脑、舌组织提取的弓形虫Wh3株速殖子（基因型为China1）感染小鼠，发病后提取腹腔液，无菌生理盐水离心洗涤三次后，常规方法制备速殖子可溶性抗原,BCA蛋白浓度测定法测定抗原浓度。免疫新西兰大白兔共3次，获得兔抗弓形虫多克隆抗体IgG。用弓形虫IHA间接血凝诊断试剂测定抗体效价，ProteinASepharoseCL-4B亲和层析柱纯化抗