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《脑缺血后恢复脑血流是治疗脑缺血最关键的方》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、184ChinJApplphysiol2007;23(2)姜黄素对沙土鼠脑缺血/再灌注损伤的海马CA1区细胞凋亡3和即早基因c2fos、c2jun、NF2κB表达变化的关系11222曹 红,李 军,李广明,王耀岐,曾因明(11温州医学院附二医麻醉科,浙江温州325027;2.徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室,江苏徐州221002)摘要 目的:探讨姜黄素对沙土鼠海马CA1区缺血/再灌注损伤的影响及与即早基因c2fos、c2jun、NF2κB在海马CA1区表达的关系及意义。方法:采用沙土鼠双侧颈总动脉阻断缺血/
2、再灌注损伤模型。动物随机分为假手术组(SH)、脑缺血/再灌注组(I/R)、姜黄素组(CU)、溶剂对照组(SC);每组据再灌注时间点的不同又分多个亚组,每组6只动物。在预定时间点行开阔法行为学检查、TUNEL法海马CA1区凋亡细胞检测,免疫组织化学ABC法测定c2fos、c2jun、NF2κB蛋白在海马CA1区的动态变化。结果:姜黄素可显著减少沙土鼠探索活动及海马CA1区凋亡锥体细胞数量(P<0101)、诱导Fos蛋白及抑制Jun和NF2KB蛋白的表达(P<0101)。结论:姜黄素具有脑保护作用,调控即早基因
3、c2fos、c2jun和NF2κB的表达可能是作用机制之一。关键词:姜黄素;c2fos;c2jun;NF2κB; 沙土鼠; 海马; 脑缺血中图分类号:R97312;R963文献标识码:A文章编号:100026834(2007)0220184205 脑缺血后恢复脑血流是治疗脑缺血最关键的方113 动物分组法,但再灌注后可加重缺血脑组织的损伤,这种损伤雄性蒙古沙土鼠,清洁级,体重50～70g,由徐以凋亡为主,因此减少缺血/再灌注后神经元凋亡为州医学院实验动物中心提供。术前在22～25℃实重要的脑保护机制。有作
4、者报道丝裂原活化蛋白激验室中饲养1～2d以适应实验室环境。动物随机酶家族成员JNK的激活是再灌注损伤引起凋亡的分为4组(n=6):(1)假手术组(SH):仅游离双侧颈重要信号转导通路之一。姜黄素是一抗炎、抗肿瘤总动脉但不阻断;(2)脑缺血/再灌注组(I/R):夹闭[1]药物,同时又可抑制JNK。本研究通过动态观察颈总动脉5min后,松开动脉夹复灌;(3)姜黄素组姜黄素处理后脑缺血及即早基因c2fos、c2jun、NF2κB(CU):缺血前1h腹腔注射20mg/kg体重姜黄素;蛋白在海马CA1区表达的变化,旨
5、在探讨姜黄素的(4)溶剂对照组(SC):缺血前1h腹腔注射等容积的可能脑保护机制。二甲基亚砜。每组根据观察指标的不同分不同亚组。c2Fos选择再灌注(Ir)后15min、2h、4h、6h、11 材料与方法d、3d、5d、7d8个亚组,c2Jun选择再灌注后6h、1111 药物配置及剂量d、3d、5d、7d五个亚组,NF2κB分为再灌注后1d、兔抗c2FosIgG多抗(产品标号:sc252)、兔抗3d、5d、7d4个亚组。c2JunIgG多抗(产品标号:sc21694)及抗NF2κB兔114 行为学观察IgG
6、多抗均为美国SantaCruz公司产品,凋亡试剂再灌注后第1d、3d、5d、7d用开阔法测定沙盒为德国宝灵曼公司产品,姜黄素购自美国Sigma土鼠行为学变化。将沙土鼠放入76cm×72cm×公司。姜黄素用二甲基亚砜溶解配置成10mg/ml57cm的木箱,箱底均分为25小格,记数动物10贮存液,避光于4℃冰箱保存。min爬行的格子数。实验在安静房间内进行。整个112 模型制备实验过程中保持室内灯光等周围环境条件的一致。[2]为排除实验设计人员的心理因素,所有行为学观察采用沙土鼠前脑缺血/再灌注损伤模型,1%戊
7、巴比妥钠40mg/kg腹腔注射麻醉。应用无创微由同一实验员单独完成。动脉夹夹闭双侧颈总动脉5min,松开动脉恢复脑血流灌注。以夹闭双侧颈总动脉后1min内监测的脑电图成等电位作为前脑缺血成功的标志,并将未3基金项目:江苏省教育厅基金资助课题(03KJB320142);浙江成等电位的沙土鼠从实验中剔除。监测鼓膜温度以省自然科学基金资助课题(Y205200)反映脑温。整个实验过程将动物置于流动空气浴箱收稿日期:2006202215;修回日期:2006212208作者简介:曹 红(19662),女,江苏人,副教授
8、,从事重要脏中,维持动物鼓膜温度在(37±013)℃。器衰竭的防治及机制研究。©1994-2007ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net中国应用生理学杂志,2007;23(2)185115TUNEL法原位检测细胞凋亡d、3d、5d、7d沙土鼠爬行格子数分别增加44%、在预定时间点,沙土鼠
